凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量实验_凝胶过滤层析法

凝胶过滤也称排阻层析、分子筛层析和凝胶层析。本实验目的是了解凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量的基本原理,巩固柱层析的操作方法。实验方法原理凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel Chromatography) 。凝胶一般是由葡聚糖的胶体溶液凝结而成的固体物质, 其内部具有很细微的多孔网状结构。凝胶层析的机理是分子筛效应, 当凝胶装柱后, 柱床容积称为“ 总容积” ( Vt ) , 它由Vo、Vi 、Vg 三部分组成, Vt = Vo + Vg ,式中Vo 为“外水容积”, 或“ 孔隙容积”, 即存在于柱床内凝胶颗粒外面孔隙之间的水相容积; Vi 为“ 内水容积” 即凝胶颗粒内部所含水相的容积, 相当于一般层析法中的固相容积, 它可以从干凝胶颗粒重量和吸水后的......阅读全文

磷酸钙介导的高分子量基因组-DNA-转染细胞实验

下述方法是对 Graham 与 Van der Eb(1973) 建立的磷酸转方法的改进,用高分子量基因组 DNA 代替了质粒 DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用(Segeetal.1984,Kingsley et al.1986)。本实验来源于分子克隆

转膜时大分子量和小分子量蛋白,该如何选择膜孔径

对所有的蛋白,我们推荐用 Nitrocellulose Sandwiches #12369(0.2 μm)的杂交膜去转膜,尤其是分子量低于 30 KD 的蛋白,建议使用较高浓度(12-15%)的蛋白分离胶并缩短转膜的时间,建议在 1 小时以内。大分子量蛋白(> 150 kDa)推荐使用 tris-a

分子量标志的概念和用途

中文名称分子量标志英文名称molecular weight marker定  义用于鉴定所分离的物质(如核酸、蛋白质等)分子大小的参照物。常用于电泳、层析、离心等分离技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

分子量标准的概念和用途

中文名称分子量标准英文名称molecular weight standard定  义作为分子大小的标准参照物。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

高分子量DNA的回收

SageHLS系统是美国Sage公司2017年新发布的平台,它可以直接从细胞样品中快速纯化高分子量DNA。Sage公司的首席科学官Chris Boles,一直在帮助研发团队开发SageHLS平台(HLS是高分子量DNA文库制备系统的缩写)。那么,高分子量DNA对于生命科学和生物医学研究有哪些

怎样计算质量数、分子量

◇计算质量数◇分子量的计算分子量计算器

链霉亲和素的分子量

链霉亲和素是四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10 mol/L 数量级,这一性质常用于分子生物学用途 。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基,分子量为16450。

表观相对分子量的概念

中文名称表观相对分子量英文名称apparent relative molecular weight定  义利用已知分子量的标准参照物通过凝胶层析或SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳等实验结果推导所得生物大分子的分子量。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

质谱测试分子量的范围

常用100-1000,离子阱50-2000,三重四级杆50-2000,TOF50-几万,另外根据调谐(calibration)的范围不同上面的范围会有变化

如何查询已知蛋白的分子量

分子筛-高效液相色谱联用这两个是实验室主要应用的方法,如果是在家简易测定,可以试试花百把块几十毫升分子筛,用个注射器装柱,然后去弄点天然存在的较便宜的纯蛋白(比如说鸡蛋清的盐析产物是较纯的鸡卵清蛋白、盐析法提取的羊igg、等电点沉淀法制备牛奶中的酪蛋白和人igm),染色考马斯亮蓝g250后透析去除染

溶菌酶纯度鉴定与分子量测定

一、实验目的和内容目的:1. 通过本次实验的学习与操作,使学生在实验过程更好的理解SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)测定蛋白质纯度与分子量的原理与依据;2. 要求学生掌握电泳原理以及SDS-PAGE垂直板电泳分离蛋白质技术;3. 熟悉垂直板电泳操作原理和方法,凝胶染色与脱色方法,凝胶图谱的绘制与计算

有机物分子量的测定

有机物分子量的测定质谱技术是一种鉴定技术,在有机分子的鉴定方面发挥着非常重要的作用,它能快速而准确地测定物质的分子量。关于质谱技术对有机物分子量的测定原理及方法,相关文章已有介绍,本节再补充部分说明。1.分子量的概念有机质谱分子量的概念与采用周期表中原子量计算的分子量是不同的,有机质谱中分子量是分子

质谱法鉴定蛋白质分子量

质谱法鉴定蛋白质分子量对样品的消耗很少,且具有更高的灵敏度、分辨率和准确度,有利于对复杂混合物样品的分析。目前广泛使用的用干蛋白质鉴定的质谱分析主要使用两种类型质谱:一种是MALDI-TOF直接对分子量进行测量,MALIDI离子源产生的离子多带单电荷,质谱图中的峰与样品各组分质量数是一-对应的,不用

质谱图如何判断分子量?

  先找到分子离子峰(一般为质荷比最大的质谱峰),再结合其同位素峰及碎片峰证和推断的经质量分开后,到被并记录下来,经处理后以质谱图的形式表示出来图中,表示离子的质荷比(m/z)值,从左到右质荷比的值增大,对于带有单电荷的离子,横坐标表示的数值即为离子的;表示离子流的,通常用来表示,即把最强的离子流强

超滤截留分子量与膜孔径

超滤膜截留的分子量 10000 30000 50000 60000 100000 200000 300000 500000 1000000..对应超滤膜孔径(μm) 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.1也就是说100kD(10万)的截留分子量对应50

壳聚糖絮凝剂分子量选择的实验中废水水样的最佳用量是多少

在壳聚糖絮凝剂分子量选择的实验中,废水水样的最佳用量通常取决于多个因素,包括实验仪器的容量、所使用的检测方法的灵敏度以及对实验精度的要求等。一般来说,每个实验组的废水水样用量在 500 毫升至 1 升之间是比较常见和合适的。这样的用量既能够保证实验有足够的代表性,又便于操作和检测。如果实验仪器的容量

怎样做低分子量蛋白的wb

分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同主要注意几个地方合适的内参印染,一般用的比较多的几种内参分子量都比较小(30~50KD)合适的凝胶,胶浓度要配制的稀一些,一般选择3%~10%的凝胶增加转膜时间,分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间

分子量梯状标志的概念和用途

中文名称分子量梯状标志英文名称molecular weight ladder marker定  义由一系列已知分子量大小的分子(核酸、蛋白质等)组成,经分离后各组分呈阶梯状分布,可作为样本分子大小的标志物。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

使用BiopharmaLynx软件分析蛋白完整分子量

对蛋白药的分子量进行测定,可以在完整蛋白水平,对其进行宏观表征,以初步确定蛋白的表达是否正确。BiopharmaLynxTM软件中,专门设计了对蛋白整体分子量测定及表征的多种功能,它具有以下特点。 ■ 通过原始质谱数据,计算出蛋白分子量。■ 自动标注蛋白的各种不同修饰形态。■ 以直观方式,比较样品与

丙酮的相对分子量是多少

  丙酮(acetone)是一种有机物,分子式为C3H6O,分子量58.08,是最简单的饱和酮。是一种无色透明液体,有特殊的辛辣气味。易溶于水和甲醇、乙醇、乙醚、氯仿、吡啶等有机溶剂。易燃、易挥发,化学性质较活泼。  丙酮是脂肪族酮类具有代表性的的化合物,具有酮类的典型反应。例如:与亚硫酸氢钠形成无

GPC测定PET的分子量及其分布

分子条件、参考文献1) 柱子:Spheron Gel  长60cm,内径7.5mm,1根;淋洗液:氯仿=1.6 mL/min;样品浓度:1mg/mL,20uL;紫外检测器。溶剂:间甲酚-氯仿(1:25)混合溶剂溶剂PET。书中附有K α值。---GPC快速测定涤纶树脂分子量分布 虞光志 高聚物分子量

蛋白质的分子量是多少

一般来说,蛋白质的分子量需在8000以上。若分子量再小一些就属于多肽的范围了。分子质量:设氨基酸的平均相对分子质量为a,含b个二硫键,蛋白质的相对分子质量=ma-18(m-n)-2b,也即氨基酸的平均分子量x氨基酸总的分子数(肽链数+肽键数)-18x脱水缩合的水分子数(和肽键数相等)。

抗原或抗体相对分子量分析

抗原或抗体在琼脂内自由扩散,其速度受分子量的影响。分子量小者扩散快,反之则较慢。由于慢者扩散圈小,局部浓度则较大,形成的沉淀线弯向分子量大的一方;如果两者分子量大致相等,则形成直线。

怎么算蛋白质的分子量

蛋白质的分子量可以通过多种方法计算,包括使用在线工具、软件或手动计算。蛋白质是由氨基酸残基通过肽键连接的大分子,其分子量是蛋白质的一个重要理化参数,通常以道尔顿(Da)为单位。下面将详细探讨计算蛋白质分子量的不同方法和步骤:基础估算法氨基酸数量估算:一个基本的估算方法是将氨基酸的数量乘以一个平均分子

熔融指数与分子量的关系

  熔体指数简称MI,是反映热塑性树脂熔体流动特性及分子量大小的指标,在一定的温度和负荷下,其熔体在10min内通过标准毛细管的质量值,以g/10min表示。  log(MI)=A-BlogM, A和B是比例常数,M即分子量。工业上常常利用这一关系来比较两个具有相同(相似)结构的聚合物分子量的相对大

丙烯酰胺粘度的影响因素分子量

  聚丙烯酰胺溶液的粘度随高聚物分子量的增大而增大,这是由于高分子溶液的粘度由分子运动时分子间的相互作用产生。当聚合物相对分子质量约为106时,高分子线团开始相互渗透,足以影响对光的散射。含量稍高时机械缠结足以影响粘度。含量相当低时,聚合物溶液可视为网状结构,链间机械缠结和氢键共同形成网的节点。含量

关于DNA分子量标准的制备的简介

  采用EcoRⅠ或HindⅢ酶解所得的λDNA片段来作为电泳时的分子量标准。λDNA为长度约50kb的双链DNA分子,其商品溶液浓度为0.5mg/ml,酶解反应操作如上述。HindIII切割 DNA后得到8个片段,长度分别为23.1, 9.4, 6.6, 4.4, 2.3, 2.0, 0.56和0

如何查找蛋白质的分子量大小

www.uniprot.orgUniProt是一个集中收录蛋白质资源并能与其它资源相互联系的数据库,也是目前为止收录蛋白质序列目录最广泛、功能注释最全面的一个数据库。 UniProt是由欧洲生物信息学研究所(European Bioinformatics Institute)、美国蛋白质信息资源(P

简述低分子量肝素的药理作用

  (1)低分子量肝素与下列药物合用,可加重出血危险:香豆素及其衍生物、阿司匹林及非甾体消炎镇痛药、双嘧达莫、右旋糖酐、肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素、组织纤溶酶原激活物、尿激酶、链激酶等。  (2)低分子量肝素并用碳酸氢钠、乳酸钠等纠正酸中毒的药物可促进肝素的抗凝作用。  (3)低分子量肝素可与

低分子量肝素的基本信息介绍

  1、低分子量肝素的理化性质:  为低分子量的硫酸氨基葡萄糖,平均分子量4000~6000,由各种解聚分组分法制成的短链肝素制剂,根据分子量、链末端结构和化合物结合盐类的不同,可以分为不同的商品制剂,目前中国市场上使用的主要有达肝素钠、依诺肝素钠和那曲肝素钙,均为无色或淡黄色的澄明液体。  2、低