凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量实验_凝胶过滤层析法

凝胶过滤也称排阻层析、分子筛层析和凝胶层析。本实验目的是了解凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量的基本原理,巩固柱层析的操作方法。实验方法原理凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel Chromatography) 。凝胶一般是由葡聚糖的胶体溶液凝结而成的固体物质, 其内部具有很细微的多孔网状结构。凝胶层析的机理是分子筛效应, 当凝胶装柱后, 柱床容积称为“ 总容积” ( Vt ) , 它由Vo、Vi 、Vg 三部分组成, Vt = Vo + Vg ,式中Vo 为“外水容积”, 或“ 孔隙容积”, 即存在于柱床内凝胶颗粒外面孔隙之间的水相容积; Vi 为“ 内水容积” 即凝胶颗粒内部所含水相的容积, 相当于一般层析法中的固相容积, 它可以从干凝胶颗粒重量和吸水后的......阅读全文

表观分子量的判定实验

实验材料目的蛋白标准分子量蛋白实验步骤1.将目的蛋白和标准分子量蛋白上样到同一块 SDS-PAGE 平板凝胶中,按照方案 1 的步骤进行 SDS-PAGE。在同一块平板凝胶上进行目的蛋白和标准分子量蛋白的电泳,可以消除由于丙烯酰胺浓度和电泳条件不同而产生的差异。可以通过商业途径获得多种标准蛋白试剂盒

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A280 的比值,来测定所得核酸的纯度。实验材料 DNA试剂

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

            实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A

分子量较大的蛋白怎么做wb实验

分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同主要注意几个地方合适的内参印染,一般用的比较多的几种内参分子量都比较小(30~50KD)合适的凝胶,胶浓度要配制的稀一些,一般选择3%~10%的凝胶增加转膜时间,分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间

截留分子量

截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff),是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能,又称切割分子量。由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实

羟乙基淀粉分子量及分子量分布表征

羟乙基淀粉(Hyroxyethyl Starch, HES)是一种非离子型淀粉改性产物。目前,被认为是最为良好的血浆代用品,在医学领域常作为失血性休克的治疗和血液的稀释剂等以维持血液胶体渗透压作用。因其独有的特性及功能,近年来,羟乙基淀粉再次成为人们关注的焦点。 HES的分子量及分子量的分布无疑

凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验

            实验方法原理 凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel C

凝胶过滤层析法测定蛋白质的分子量实验

实验方法原理 凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography ) 和凝胶层析( Gel Chromatography) 。凝胶一般是由葡聚糖的胶体

一体化专用GPC测定高聚物分子量实验

本实验考察了新型一体化专用凝胶色谱仪HLC-8320GPC EcoSEC的基本性能,对比了一体化仪器和组合式仪器在保留时间重复性、基线稳定性方面的区别;对保留时间、分子量测定结果的日内、日间重复性进行了考察;采用单分散宽孔径分布的聚苯乙烯填料装填的TSK-GEL SuperMuti

WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小

westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位

WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小

westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位

WB实验中蛋白跑带如何区分分子量大小

westernblot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为westernblot的膜应该是完全覆盖SDSPAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位

分子量怎样计算?

N的相对原子质量是14,H是1,C是12,O是16,NH2CONH2,含两个N原子,4个H原子,1个C、1个O,所以N的质量比是:(14*2)/(14*2+4+12+16)≈46.7%其它类同。

如何通过实验确定壳聚糖絮凝剂的最佳分子量?

以下是通过实验确定壳聚糖絮凝剂最佳分子量处理印染废水的一般步骤:准备不同分子量的壳聚糖絮凝剂样品可以通过化学方法或物理方法制备或获取具有不同分子量的壳聚糖。设计实验方案确定印染废水的水质参数,如色度、化学需氧量(COD)、悬浮物含量等。设定不同分子量壳聚糖的投加量梯度。实验操作取相同体积和水质的印染

核酸纯度、浓度与分子量测定实验——Ethidium-bromide染色法

实验方法原理利用一系列不同浓度的DNA标准溶液(0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml),或已知浓度的DNA marker,和未知浓度DNA样品一起进行琼脂糖凝胶电泳,以EB染色后,在凝胶图象分析仪上观察,比较标准浓度及未知浓度的亮度,来求取DNA 的含量;比较DNA样品与DNA

实验室分析方法有机物分子量的测定

质谱技术是一种鉴定技术,在有机分子的鉴定方面发挥着非常重要的作用,它能快速而准确地测定物质的分子量。关于质谱技术对有机物分子量的测定原理及方法,相关文章已有介绍,本节再补充部分说明。 1.分子量的概念有机质谱分子量的概念与采用周期表中原子量计算的分子量是不同的,有机质谱中分子量是分子离子的质量,而分

实验室测定蛋白质分子量的方法有哪些

测定蛋白质分子量的常用方法:粘度法、凝胶过滤层析法、凝胶渗透色谱法、SDS-凝胶电泳、渗透压法、质谱法包括电喷雾离子化质谱技术和基质辅助激光解吸电离质谱技术、光散射法(多角度激光散射)、沉降法(超速离心法)。1、粘度法 一定温度条件下,高聚物稀溶液的粘度与其分子量之间呈正相关性,随着分子量的增大,聚

壳聚糖絮凝剂分子量选择的实验过程是怎样的?

以下是壳聚糖絮凝剂分子量选择的一般实验过程:实验准备:准备不同分子量的壳聚糖絮凝剂样品。采集印染废水水样,并对其初始水质指标(如色度、化学需氧量 COD、悬浮物含量、pH 值等)进行测定。准备实验所需的仪器设备,如搅拌器、移液器、分光光度计、离心机等。实验步骤:分组:将废水水样均分成若干组,每组对应

壳聚糖絮凝剂分子量选择的一般实验过程

以下是壳聚糖絮凝剂分子量选择的一般实验过程:实验准备:准备不同分子量的壳聚糖絮凝剂样品。采集印染废水水样,并对其初始水质指标(如色度、化学需氧量 COD、悬浮物含量、pH 值等)进行测定。准备实验所需的仪器设备,如搅拌器、移液器、分光光度计、离心机等。实验步骤:分组:将废水水样均分成若干组,每组对应

酵母转化实验_单链高分子量的担体DNA制备

实验材料DNA试剂、试剂盒TE酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材超声波发生器实验步骤1.  将DNA溶于pH8.0的1×TE缓冲液,终浓度为10 mg/ml。于4℃搅拌过夜。 2.  用一个大的超声探头,在75%的满功率下超声处理DNA 30 s,以降低DNA溶液的粘度。取1 μg DNA在0.8%琼脂糖凝

表观相对分子量

中文名称表观相对分子量英文名称apparent relative molecular weight定  义利用已知分子量的标准参照物通过凝胶层析或SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳等实验结果推导所得生物大分子的分子量。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

lcms仪器最小分子量

  LCMS是有机合成中重要的分析工具,解析LCMS谱图也是一项基本技能。  想了解更多有机知识,请点击上方蓝字或扫描文末二维码,关注我的公众号。  小蓝建了有机化学交流微信群,已有10000多名小伙伴参与,点击这里,马上加入  LCMS基本原理和特性  1)LCMS的特性:是HPLC和MS的结合,

截留分子量的概念

截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff),是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能,又称切割分子量。由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实

核酸纯度、浓度与分子量测定实验——紫外分光光度法

核酸纯度、浓度与分子量测定可应用于:(1)分析核酸;(2)为进一步实验提供样品。实验方法原理溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以

凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量实验_凝胶过滤层析法

凝胶过滤也称排阻层析、分子筛层析和凝胶层析。本实验目的是了解凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量的基本原理,巩固柱层析的操作方法。实验方法原理凝胶过滤( Gel Filt ration ) 也称排阻层析( Exclusion Chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Ch

单分子量子纠缠首次实现

  美国两个科研团队在7日出版的《科学》杂志上分别刊文称,他们首次让单个的分子处于量子纠缠状态。在这种奇怪的状态下,分子之间即使相距遥远也能同时相互关联、相互作用。研究团队指出,这项研究为很多应用奠定了基础,包括构建更好的量子计算机、量子模拟器和传感器等。  实现可控的量子纠缠面临诸多挑战,此前科学

重均分子量是什么

所有合成高分子化合物的分子量以及大多数天然高分子化合物的分子量都是不均一的,它们是分子量不同的同系物的混合物。分子量及分布是高分子材料最基本的结构参数之一。聚合物中用不同分子量的分子重量平均的统计平均分子量。重均分子量是按质量的统计平均分子量,在单位重量上平均得到的分子量。聚合物的相对质量及其分布是

什么叫重均分子量

所有合成高分子化合物的分子量以及大多数天然高分子化合物的分子量都是不均一的,它们是分子量不同的同系物的混合物。分子量及分布是高分子材料最基本的结构参数之一。聚合物中用不同分子量的分子重量平均的统计平均分子量。重均分子量是按质量的统计平均分子量,在单位重量上平均得到的分子量。聚合物的相对质量及其分布是

磷酸钙介导的高分子量基因组-DNA-转染细胞实验

实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒 CaCl2甘油HEPES 盐缓冲液异丙醇NaCl基因组 DNA带有选择性标志的质粒细胞生长培养基仪器、耗材 聚乙烯试管Shepherd’s crook组织培养皿实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所浓度。Ca

磷酸钙介导的高分子量基因组-DNA-转染细胞实验

下述方法是对 Graham 与 Van der Eb(1973) 建立的磷酸转方法的改进,用高分子量基因组 DNA 代替了质粒 DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用(Segeetal.1984,Kingsley et al.1986)。本实验来源于分子克隆