磷酸酶a的测定实验
实验方法原理4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联:葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化:葡萄糖-6-P+NADP+ → 葡萄糖酸-6-P+NADPH+H+实验材料磷酸酶 a试剂、试剂盒磷酸钾EDTA糖原葡萄糖磷酸变位酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:0.05 mol/L 磷酸钾,pH 6.80.01 mol/L EDTA(Mr=292.3,29.2 mg 溶于 10 ml 水中)糖原(60 mg 溶于 10 ml 水中)......阅读全文
碱性磷酸酶染色实验临床意义
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义: 类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低; 急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常; 真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低; 再生障碍性贫血患者明显升高,淋
碱性磷酸酶染色实验临床意义
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义:类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低;急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常;真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低;再生障碍性贫血患者明显升高,淋巴细胞白血病往往积分
碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定
一、实验原理 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase EC 3.1.3.1简称为ALPase)广泛存于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应,磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸
碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定
、实验原理 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase EC 3.1.3.1简称为ALPase)广泛存于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应,磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受
免疫碱性磷酸酶组织化学实验——间接免疫碱性磷酸酶法
免疫碱性磷酸酶组织化学技术是以碱性磷酸酶(AKP 或 AP)取代 HRP 来显示结果的免疫酶组织化学技术。最早出现的是间接免疫碱性磷酸酶法(IAP),1983 年 Mason 及 Moir 等建立了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)复合物法。随后,人们建立了更为敏感的生物素-亲和素-碱性磷酸酶复合
λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理实验
λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除,能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体(如 λgt10、λgt11 和 λORF8)或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体(如 λgt18-23 和 λZAP) 时,本方法可被用于抑制非重组子背景。本实验
λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理实验
实验方法原理 λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除,能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体(如 λgt10、λgt11 和 λORF8)或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体(如
λ噬菌体载体DNA的碱性磷酸酶处理实验
实验方法原理 λ 噬菌体两臂内部末端 5'-磷酸基团的去除,能有效防止自连和减少非重组噬菌体的背景。当使用含单一克隆位点的插入型载体(如 λgt10、λgt11 和 λORF8)或使用虽含多克隆位点但用单一酶切割的插入型载体(如 λgt18-23 和 λZAP) 时,本方法可被用于抑
测定碱性磷酸酶(ALP)的参考值是什么
男性:1~12岁<500U/L,13~15岁<750U/L,25岁以上40~150U/L; 女性:1~12岁<500U/L,15岁以上40~150U/L。
比色法测定酸性磷酸酶(ACP)的方法
1.方法(1)麝香草酚酞比色法:该方法目前已少用。(2)连续监测法:α-磷酸萘胺在酸性条件下被ACP水解为α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固红TR盐反应生成稳定的重氮化合物。通过测定在405nm吸光度的变化速率来计算ACP的活性。前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可测得非前列腺酸性磷酸酶活
比色法测定酸性磷酸酶(ACP)的方法
1.方法 (1)麝香草酚酞比色法:该方法目前已少用。 (2)连续监测法:α-磷酸萘胺在酸性条件下被ACP水解为α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固红TR盐反应生成稳定的重氮化合物。通过测定在405nm吸光度的变化速率来计算ACP的活性。 前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可测得非前
碱性磷酸酶同工酶测定的临床意义
1.ALP1(来源于肝)阳性:见于肝外阻塞性黄疸、转移性肝癌、肝脓肿、肝充血和胆总管结石等。 2.ALP2增高:见于肝内胆汁淤滞、急性肝炎、原发性肝癌等。 3.ALP3增高: (1)骨骼疾病,如骨肿瘤和肿瘤骨转移、Paget氏病、医学/教育网佝偻病和骨软化症。 (2)其他疾病,如肾性营养
免疫碱性磷酸酶组织化学实验
实验方法原理 此方法的基本原理与 HRP-抗体间接法类似,所不同的是用 AKP 代替 HRP 标记第二抗体,将其制备成酶标记抗体。实验材料 石蜡切片动物血清试剂、试剂盒 蛋白酶特异性一抗核固红二甲苯乙醇树胶PBSAKP 标记的二抗TBS(含左旋咪唑、MgCl2)仪器、耗材 滴管玻片湿盒实验步骤 1.
免疫学实验骨碱性磷酸酶介绍
骨碱性磷酸酶介绍: 血清中的骨碱性磷酸酶的浓度被认为反映了成骨细胞的代谢活性,而骨代谢的精确评价对于明确骨代谢病的严重程度和治疗反应有着重要意义。因此在变形性骨炎、骨软化、原发性甲状旁腺功能亢进、肾性骨营养不良、骨质疏松和骨转移瘤中,血清骨碱性磷酸酶水平的检测有着用武之地。骨碱性磷酸酶的测
比色法测定酸性磷酸酶生理变异
男、女性血中ACP含量无差异,新生儿ACP活性与成人相似,出生后1个月中血清酶活性甚高,然后随年龄的增长而逐渐下降,青春期又可出现一活性峰值,至20岁降至成人水平。
精浆酸性磷酸酶测定(ACP)参考值
80~1000U/ml(速率法);>200U/1次射精 (β-硝基酚法)。
比色法测定酸性磷酸酶的临床意义
临床血清ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标。前列腺癌,特别是有转移时,血清ACP可明显升高,前列腺酸性磷酸酶更有意义。溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期作过直肠检查者,此酶亦可轻度增高。由于血清ACP酶活性极不稳定,活性测定的应用渐趋稀少。
骨源性碱性磷酸酶的测定及注意事项
血浆中骨源性碱性磷酸酶(BAP)活性测定,首先是血球和血浆的分离,这一过程是基于全血样品经血浆分离器将血球截留在分离器的血球容纳膜上,而血浆渗滤穿过转运膜到达反应膜的特定区域,血浆分离完成后,将血浆分离器从反应装置上取下。第二步是BAP与血浆中其它组分,包括其它来源的碱性磷酸酶(ALP)分离达到特异
比色法测定酸性磷酸酶的临床意义
临床血清ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标。前列腺癌,特别是有转移时,血清ACP可明显升高,前列腺酸性磷酸酶更有意义。 溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期作过直肠检查者,此酶亦可轻度增高。 由于血清ACP酶活性极不稳定,活性测定的应用渐趋稀少。
骨源性碱性磷酸酶的测定及注意事项
血浆中骨源性碱性磷酸酶(BAP)活性测定,首先是血球和血浆的分离,这一过程是基于全血样品经血浆分离器将血球截留在分离器的血球容纳膜上,而血浆渗滤穿过转运膜到达反应膜的特定区域,血浆分离完成后,将血浆分离器从反应装置上取下。第二步是BAP与血浆中其它组分,包括其它来源的碱性磷酸酶(ALP)分离达到特异
骨源性碱性磷酸酶的测定及注意事项
血浆中骨源性碱性磷酸酶(BAP)活性测定,首先是血球和血浆的分离,这一过程是基于全血样品经血浆分离器将血球截留在分离器的血球容纳膜上,而血浆渗滤穿过转运膜到达反应膜的特定区域,血浆分离完成后,将血浆分离器从反应装置上取下。 第二步是BAP与血浆中其它组分,包括其它来源的碱性磷酸酶(ALP)分离达
碱性磷酸酶(AKP、ALP)的测定及医学意义是什么
1.正常参考值: ① 速率法 女性: 1~12岁:<500 U/L 15岁以上:40~150 U/L 男性: 1~12岁:<500 U/L 12~15岁:<750 U/L 25岁以上:40~150 U/L ② 比色法: 健康成年人:3-13 金氏单位 儿童:5-28 金氏单
碱性磷酸酶染色实验有哪些临床意义
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义: 类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低; 急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常; 真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低; 再生障碍性贫血患者明显升高,淋
碱性磷酸酶染色实验有哪些临床意义
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义: 类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低; 急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常; 真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低; 再生障碍性贫血患者明显升高,淋
比色法检测血清碱性磷酸酶(ALI)实验
实验方法原理在PH10的反应液中,碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解,生成游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替比邻结合,并经铁氯化钾氧化生成显红色的醌的衍生物,根据红色深浅计算酶活力的高低。实验步骤一、 实验试剂:l. 0.1mol/L碳酸盐缓冲液(PH10.0)溶解无水碳酸钠6.39g碳酸氢钠3.
碱性磷酸酶染色实验有什么临床意义?
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义:类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低;急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常;真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低;再生障碍性贫血患者明显升高,淋巴细胞白血病往往积分
碱性磷酸酶染色实验有哪些临床意义?
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义:类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低;急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常;真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低;再生障碍性贫血患者明显升高,淋巴细胞白血病往往积分
比色法检测血清碱性磷酸酶(ALI)实验
实验方法原理在PH10的反应液中,碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠水解,生成游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替比邻结合,并经铁氯化钾氧化生成显红色的醌的衍生物,根据红色深浅计算酶活力的高低。实验步骤一、 实验试剂:l. 0.1mol/L碳酸盐缓冲液(PH10.0)溶解无水碳酸钠6.39g碳酸氢钠3.
比色法测定酸性磷酸酶参考值
成人总酶活性为0~9U/L, 前列腺酸性磷酸酶为0~3U/L(连续监测法)。
碱性磷酸酶同工酶测定的临床意义是什么
1.ALP1(来源于肝)阳性:见于肝外阻塞性黄疸、转移性肝癌、肝脓肿、肝充血和胆总管结石等。 2.ALP2增高:见于肝内胆汁淤滞、急性肝炎、原发性肝癌等。 3.ALP3增高: (1)骨骼疾病,如骨肿瘤和肿瘤骨转移、Paget氏病、医学/教育网佝偻病和骨软化症。 (2)其他疾病,如肾性营养