磷酸酶a的测定实验
实验方法原理4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联:葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化:葡萄糖-6-P+NADP+ → 葡萄糖酸-6-P+NADPH+H+实验材料磷酸酶 a试剂、试剂盒磷酸钾EDTA糖原葡萄糖磷酸变位酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:0.05 mol/L 磷酸钾,pH 6.80.01 mol/L EDTA(Mr=292.3,29.2 mg 溶于 10 ml 水中)糖原(60 mg 溶于 10 ml 水中)......阅读全文
磷酸酶-a-的测定实验
基本方案 实验方法原理 4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1
磷酸酶-a-的测定实验
实验方法原理4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联:葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化:葡萄糖-6-P+NADP+ → 葡萄糖酸-6-P+
酸性磷酸酶的测定实验
实验方法原理正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2O → 水杨酸+Pi实验材料酶样品试剂、试剂盒乙酸缓冲液σ-磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤25℃时,持续 3 min0.1 ml 酶样品25℃ 时
酸性磷酸酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2
腺苷三磷酸酶的测定实验
实验方法原理ATP → ADP+Pi很多 ATP 酶是与膜组分联系在一起的酶,比如氧化磷酸化或离子转运系统。在细胞匀浆中或膜悬浮物中必须测定它们的不溶性。实验材料酶样品试剂、试剂盒TES-TrisATPMgCl2BSA 溶液十二烷基硫酸钠实验步骤在 37 ℃ 下轻轻地振荡培养 1 ml 含有 5~2
腺苷三磷酸酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 ATP → ADP+Pi很多 ATP 酶是与膜组分联系在一起的酶,比如氧化磷酸化或离子转运系统。在细胞匀浆中或膜悬浮物中必须
碱性磷酸酶的测定实验
哺乳动物碱性磷酸酶 细菌碱性磷酸酶 实验方法原理 实验材料 酶样品
腺苷三磷酸酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 ATP → ADP+Pi很多 ATP 酶是与膜组分联系在一起的酶,比如氧化磷酸化或离子转运系统。在细胞匀浆中或膜悬浮物中必须
碱性磷酸酶的测定实验_细菌碱性磷酸酶
实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤实验混合物25℃ 时,于 405 nm 处吸收值降低,ε405=18.5×103 l/(mol·cm)。
碱性磷酸酶的测定实验_哺乳动物碱性磷酸酶
正磷酸单酯磷酸水解酶(最适碱度)。正磷酸单酯+H2O → 醇+Pi这个酶可以从各种渠道得来,如细菌和哺乳动物肠黏膜。每个酶分子有两个 Zn2+离子键。碱性的磷酸酶频繁地与抗体配位,例如在 Westernblots 中及酶联免疫鉴定(ELISA)中。细菌酶的最适 pH 是 8.0,哺乳动物的要较高一点
磷酸酶-a-的测定
实验方法原理 4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联:葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化:葡萄糖-6-P+NADP+ → 葡萄糖酸-6-P
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP) 实验材料 细胞
磷酸酶制备实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 缓冲盐清洗液抽提缓冲液实验步骤 一、组织/细胞制备和提取1. 配制下列溶液:(1) 缓冲盐清洗液:20 mmol/L 的 MOPS 缓冲液,pH 7.5(配成 100 ml)5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
磷酸酶制备实验
蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)实验材料细胞 试剂、试剂盒缓冲盐清洗液
腺苷三磷酸酶的测定
实验方法原理 ATP → ADP+Pi很多 ATP 酶是与膜组分联系在一起的酶,比如氧化磷酸化或离子转运系统。在细胞匀浆中或膜悬浮物中必须测定它们的不溶性。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 TES-TrisATPMgCl2BSA 溶液十二烷基硫酸钠实验步骤 在 37 ℃ 下轻轻地振荡培养 1 ml
酸性磷酸酶的测定
实验方法原理 正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2O → 水杨酸+Pi实验材料 酶样品试剂、试剂盒 乙酸缓冲液σ-磷酸硝基苯仪器、耗材 分光光度计实验步骤 25℃时,持续 3 min0.1 ml 酶样品
碱性磷酸酶的测定
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 甘氨酸-KOH对磷酸硝基苯仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.02 ml 酶样品25 ℃ 时于 405 nm 处吸收值降低,ε405=18.5×103 l/(mol·cm)。注意事项 其他 试剂:0.1 mol/L 甘氨酸
酸性磷酸酶的显示实验
实验方法原理 Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化铵作用使其变成棕黄色至棕黑色的硫化铅沉淀。实验材料 427细胞试剂、试剂盒 丙酮乙醇Gomori硝酸铅作用液甲基绿硫化铵仪器、耗材 温箱冰箱显微镜乳头吸
酸性磷酸酶的显示实验
基本方案 实验方法原理 Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化
酸性磷酸酶的显示实验
实验方法原理Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化铵作用使其变成棕黄色至棕黑色的硫化铅沉淀。实验材料427细胞试剂、试剂盒丙酮乙醇Gomori硝酸铅作用液甲基绿硫化铵仪器、耗材温箱冰箱显微镜乳头吸管实验步
酸性磷酸酶的显示实验
基本方案 实验方法原理 Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化
磷酸酶制备实验——膜蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)
试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材微型离心机Superose 6 柱子实验步骤1. 用 1 ml 含有 1% NP-40 去污剂的提取缓冲液提取颗粒部分(按照上面组织/细胞的制备和提取所述方法准备)15 分钟,用一个小匀浆器固定在微型离心管里匀浆或者通过微量移液器吸头尖反复吸入和排出悬浮液以确保沉淀分
碱性磷酸酶染色实验
实验方法原理 细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性(PH9.0-9.6)环境下使作用液中的底物(a一磷酸萘酚钠)水解,产生出a萘酚,然后再与偶氮盐偶联,生成不溶性的耐晒染料(最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同).试剂、试剂盒 磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤 一、实验试剂:底物作用液的配制:α-磷
碱性磷酸酶染色实验
实验方法原理细胞组织中的碱性磷酸酶在碱性(PH9.0-9.6)环境下使作用液中的底物(a一磷酸萘酚钠)水解,产生出a萘酚,然后再与偶氮盐偶联,生成不溶性的耐晒染料(最终产物的颜色因所用偶氮盐的品种不同而有所不同).试剂、试剂盒磷酸萘酚钠偶氮盐丙二醇实验步骤一、实验试剂:底物作用液的配制:α-磷酸萘酚
酸性磷酸酶的显示方法实验步骤
实验试剂1. 10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g2. 酸性磷酸酶作用液蒸馏水 90ml 0.2mol/L醋酸缓冲液(pH4.6) 12ml 5%硝酸铅 2ml3. 2%β—甘油磷酸钠 4ml先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合,随后分成大致相等的两份,一份中
测定碱性磷酸酶(ALP)的临床意义
碱性磷酸酶是一组在pH9~10.5的碱性环境中催化有机磷酸酯水解的酶。血清中的ALP主要来源于肝脏、骨骼、少部分来自小肠和妊娠期胎盘组织,肾脏也有极少量,肝细胞产生的ALP一般从胆道排入小肠。琼脂糖凝胶电泳可将ALP分为6种同工酶,其中ALP2来自肝脏。检测方法见诊断酶学【参考值】男性:1~12岁<
碱性磷酸酶是测定什么的指标
正常范围:成人 32~92U/L;儿童 (小于10岁)36~213U/L。检查介绍:碱性磷酸酶是一种磷酸单酯酶,广泛存在于人体组织和体液中,以骨、肝、乳腺、肠粘膜、肾,胎盘中。临床意义:增高:①阻塞性黄疸、肝硬化、肝坏死,碱性磷酸酶明显升高(肝细胞性黄疸则升高不明显)。②原发性和继发性肝癌时碱性磷酸
碱性磷酸酶染色实验的临床意义
临床上碱性磷酸酶染色法对以下疾病有鉴别意义:类白血病反应显著增高,慢性粒细胞白血病 (无继发感染) 显著减低;急性细菌感染伴白细胞增多时,积分显著升高,病毒性感染时多正常;真红细胞增多症积分升高,继发性红细胞增多者则正常,而阵发性血红蛋白尿症则减低;再生障碍性贫血患者明显升高,淋巴细胞白血病往往积分
血清碱性磷酸酶(ALP)测定的临床意义
升高 :常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。另外,少年儿童在生长发育期骨胳系统活跃,可使ALP增高。注意:使用不同绶冲液,结果可出现明显差异。
血清碱性磷酸酶(ALP)测定的临床意义
升高:常见于肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸、急慢性黄疸型肝炎、骨细胞瘤、骨转移癌、骨折恢复期。另外,少年儿童在生长发育期骨胳系统活跃,可使ALP增高。 注意:使用不同缓冲液,结果可出现明显差异。