延胡索酸酶的测定实验
实验方法原理L-苹果酸 ⇌ 延胡索酸+H2O实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾L-苹果酸溶液磷酸钾血清白蛋白仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 0.05 mol/L L-苹果酸溶液0.02 ml 延胡索酸溶液(用 0.1% 血清白蛋白稀释)25℃ 时 240 nm 处的吸收值升高,ε240=2440 l/(mol·cm)。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.50.05 mol/L L-苹果酸溶液(L-苹果酸,Mr=134.1;悬浮 134 mg 在 10 ml 水中)0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.5 中,用 3.5 ml 1 mol/L NaOH 中和并用 0.1 mol/L 1 磷酸钾 pH 7.5 加至 20 ml0.1% 血清白蛋白(质量浓度)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.5 中展开......阅读全文
丙酮酸脱羧酶的测定实验
实验方法原理 在酶测定中二氧化碳的释放可以用压力计或 14C1-丙酮酸盐测定。在此将描述一个与ADH 有关的实验。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 柠檬酸缓冲液丙酮酸焦磷酸硫胺素MgCl2NADHADH仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml
脯胺酸测定的实验室用途
脯氨酸以天然存在形式,胶原的主要成分之一。DL-型以明胶为原料,经盐酸水解等多步处理后可制得该品盐酸盐。为生化试剂,用于生化及营养研究,微生物试验,制备培养基。L-型以L-谷氨酸与无水乙醇酯化、还原而制得。
丙酮酸脱羧酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 在酶测定中二氧化碳的释放可以用压力计或 14C1-丙酮酸盐测定。在此将描述一个与ADH 有关的实验。
蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法
实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后,用分光光度测定的方法对其上清液分析,氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线,已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光
血清淀粉酶(AMS)测定实验
实验方法原理血清或血浆中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1.4葡萄糖苷健水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1.6糖苷键支链的糊精,在底物充分(已知浓度)的条件下,反应后加入碘液未经碘水解的淀粉结合成蓝色化合物,其颜色的深浅与未经酶促反应的空白等比较,从而推算出酶的活力单位。实验步骤一、 实验试剂:1.
莽草酸脱氢酶测定实验
基本方案 实验方法原理 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应
莽草酸脱氢酶测定实验
实验方法原理 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应。实验材料 莽草酸脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒 莽草酸碳酸钠NADP仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合
莽草酸脱氢酶测定实验
实验方法原理莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应。实验材料莽草酸脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒莽草酸碳酸钠NADP仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02
血清淀粉酶(AMS)测定实验
实验方法原理血清或血浆中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1.4葡萄糖苷健水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1.6糖苷键支链的糊精,在底物充分(已知浓度)的条件下,反应后加入碘液未经碘水解的淀粉结合成蓝色化合物,其颜色的深浅与未经酶促反应的空白等比较,从而推算出酶的活力单位。实验步骤一、 实验试剂:1.
乙醇酸氧化酶活性测定(比色法)
原理 乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中起重要的作用,在它的作用下将乙醇酸氧化生成乙醛酸和过氧化氢,反应如下: 如果我们以二氯靛酚作为氢受体,接受乙醇酸氧化时脱下的H ,使二氯靛酚还原,此时原来为蓝色的染料则褪至无色,其反应如下: 利用染料颜
琥珀酸脱氢酶活力测定方法简介
1、硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法 琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succinate+PMS→Fumarate+PM
琥珀酸脱氢酶测定方法MTT法
MTT法MTT是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazana),经异丙醇作用颗粒溶解显色。在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比,因此可根据光密度570nm处OD值推测出活细胞的数目。
延胡索的功效用法
1、性味:辛;苦;温;无毒。 2、归经:肝;胃;心;肺;脾经。 3、主治:活血;散瘀;理气;止痛。主心腹腰膝诸痛;月经不调;症瘕;崩中;产后血晕;恶露不尽;跌打损伤。 4、用法用量:内服:煎汤,1.5-3钱;或入丸、散。
齿瓣延胡索的介绍
齿瓣延胡索(Corydalis turtschaninovii Bess.),又名蓝雀花、蓝花菜、元胡。系年生草本。 生于疏林下或林缘灌丛、山坡稍湿地。产于东北。
全叶延胡索的介绍
全叶延胡索(原变种) 产 黑龙江省、吉林省、辽宁省,生于海拔700-1000米的灌木林下或林缘。俄罗斯远东的符拉迪沃斯托克( 海参崴)和朝鲜有分布。
东北延胡索的生长环境
1、东北延胡索:生于杂木疏林下、林缘、阴湿沟边。分布于东北地区,以东部较多。 2、全叶延胡索:生于海拔700-1000m的杂木疏林下或林缘。分布于东北及河北、山东、江苏、安徽、浙江、河南等地。
延胡索的功效与作用
活血,散瘀,理气,止痛。治心腹腰膝诸痛,月经不调,癥瘕,崩中,产后血晕,恶露不尽,跌打损伤。 ①《雷公炮炙论》:“治心痛欲死。” ②《日华子本草》:“除风,治气,暖腰膝,破癥癖,扑损瘀血,落胎,及暴腰痛。” ③《开宝本草》:“主破血,产后诸病,因血所为者。妇人月经不调,腹中结块,崩中淋露,
延胡索乙素的性状
本品为白色或淡黄色片状结晶。无臭。味微苦。放置后色渐变深。 本品在乙醚或氯仿中极易溶解。在水或碱溶液中几乎不溶。 熔点 本品的熔点(中国药典1977年版二部附录15页)为147O—149O。
东北延胡索的形态特征
1、东北延胡索:又名白元胡。多年生草本,无毛,高15-25cm。块茎球状,单一,直径8-15mm,断面白色至淡黄色。茎软弱,单一,近基部具鳞片1枚;自鳞片腋常3-4分枝。叶具细柄,叶片灰绿色二回3出全裂,一回裂片有明显的柄,末回裂片无柄或具短柄,长椭圆形至倒卵形,长1-3cm,有时分裂,先端钝圆
延胡索的药理作用
1、对中枢神经系统的影响: ①镇痛作用:用电刺激小鼠尾巴法证明,延胡索粉有镇痛作用,其效价为阿片的1/10,作用持续2小时。小鼠热板法证明,延胡索甲素、丑素均有显着的镇痛作用。兔乙热刺激法和电总 和刺激法证明,乙素15-20mg/kg、丑素10-15mg/kg或甲素30-40mg/kg均有镇痛
延胡索的药理作用
从现代药理作用来看,延胡索具有调节中枢神经系统的作用,治疗消化系统疾病和治疗心脑血管疾病的作用,抗溃疡作用等。 镇痛作用 用电击小鼠尾巴法证明内服延胡索具有止痛作用。其所含生物碱的镇痛作用以乙素最强,丑素次之、甲素与癸素最弱,但均不及吗啡强。是通过阻断脑干网状结构上行激动系统及一些下行抑制功
东北延胡索的性状鉴别
1、东北延胡索:块茎球形、扁球形或长球形,直径5-10mm。表面黄色或黄棕色,无明显皱纹;上端微凹处有茎痕,底部可见不定根痕。质较硬,断面白色或黄白色。气微,味较苦。 2、全叶延胡索: 块茎扁球形或球形,直径5-10mm。表面黄色或黄棕色,无明显皱纹;上端微凹处有茎痕,底部可见不定根痕。质较硬
延胡索的镇痛作用介绍
用电击小鼠尾巴法证明内服延胡索具有止痛作用。其所含生物碱的镇痛作用以乙素最强,丑素次之、甲素与癸素最弱,但均不及吗啡强。是通过阻断脑干网状结构上行激动系统及一些下行抑制功能而起作用,对大脑皮层无直接作有。延胡索乙素及丑素有耐受性、并能与吗啡产生交叉耐受性。 延胡索含有的延胡索粉,延胡索甲素、乙
氨基酸序列测定实验——辅助方案
实验材料蛋白质样品试剂、试剂盒1 mol/L NaHCO3 (可选)100% 冰冷乙醇(不含变性剂 USP 级)样品缓冲液 0.1% (V/V)焦宁 Y 染料仪器、耗材超滤浓缩器/Speedvac蒸发器拉细的巴斯德吸管/凝胶加样吸头1.5 ml 微量离心管离心机实验步骤1. 必要时,用1 mol/L
由酶循环确定烟酰胺核苷酸实验
实验方法原理 为了测定 NADP(H),可以采用谷氨酸脱氢酶(GluDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH) 的偶联反应:在指定的条件下,一个 NADP 分子可以催化生成 5000~10 000 个 6-磷酸葡萄糖酸盐。NADP的浓度为 10-9 mol/L(1 ul 含有 10~15 mol)
由酶循环确定烟酰胺核苷酸实验
NADP(H) 的测定 NAD(H)的测定 实验方法原理 为了测定 NADP(H),可以采用谷氨酸脱氢酶(GluDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6
Nature子刊文章:癌症代谢研究中的关键酶
来自上海交通大学医学院,上海市胰腺疾病重点实验室等处的研究人员发表了题为“O-GlcNAcylation of fumarase maintains tumour growth under glucose deficiency”的文章,发现了一条之前从未发现过的通过延胡索酸酶调控的转录机制,并且
琥珀酸脱氢酶及丙二酸的抑制作用实验
甲烯蓝脱色法 实验方法原理 琥珀酸脱氢酶能使琥珀酸脱氢生成延胡索酸,并将脱下的氢交给受氢体。用甲烯蓝作受氢体时,甲烯蓝被氢还原生成无色的甲烯白。其反应如下:
琥珀酸脱氢酶及丙二酸的抑制作用实验
实验方法原理 琥珀酸脱氢酶能使琥珀酸脱氢生成延胡索酸,并将脱下的氢交给受氢体。用甲烯蓝作受氢体时,甲烯蓝被氢还原生成无色的甲烯白。其反应如下: 琥珀酸+甲烯蓝→延胡索酸+甲烯白+蓝酸 丙二酸是琥珀酸脱氢酶竞争性抑制剂细菌量越多或脱氢酶活性越高甲烯蓝脱色所需时间越短,因此,甲烯蓝脱色所需时间的倒数可用
丙酮酸铁氧还原蛋白还原酶的测定
实验方法原理 丙酮酸合酶,丙酮酸:铁氧还原蛋白 2-氧化还原酶(乙酰-CoA 化)丙酮酸 + CoA + 氧化型细胞色素 c ⇌ 乙酰-CoA + CO2 + 还原型细胞色素 c实验材料 酶样品试剂、试剂盒 Tris-HCl细胞色素 c丙酮酸CoA仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体