用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验
利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ试剂、试剂盒反应缓冲液仪器、耗材磷酸纤维素滤纸离心管实验步骤1. 准备 P81 磷酸纤维素滤纸。(1) P81 磷酸纤维素滤纸切成 2cmX2cm 的方块，折起一个角，用铅笔在这里做个记号。(2) 将膜块放在一大张非吸收性材料上，如有机玻璃或者盖着铝箔的纤维板。2. 设置和标记进行分析反应的离心管。反应体积可以是 25~100 μl。对于 50 μl 反应，加入下列溶液：10X 反应缓冲液 5 μl10X 底物溶液 ......阅读全文
肠血管活性肽的概述
血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)由28个氨基酸组成，主要是由肠道神经元释放，在中枢神经系统中也大量存在，为重要的脑肠肽。胰腺中也有很多VIP能神经纤维。脂肪餐和迷走神经刺激均可引起VIP的释放。另外，肠缺血也可刺激其释放。它有着广泛的生物活性，如
消化道脂肪酶底物特异性
Ewa RogalskaS等（1990）研究了猪胰脂肪脂肪酶、兔胃脂肪酶和人胃脂肪酶对化学结构类似、但在同一甘油三酯分子中立体结构不同的酯键的立体选择性，结果表明两种胃脂肪酶对sn-3位具有立体选择性。如果由对映体过量百分率表示的话，人和兔胃脂肪酶对三辛酸甘油酯和三油精分别是54%、70%和74%、
血管活性肠肽简介
血管活性肠肽（VIP），又名舒血管肠肽，是神经递质的一种，存在于中枢神经和肠神经系统中。VIP由28个氨基酸组成，主要是由肠道神经元释放。VIP在生物体内具有双重作用，既是胃肠道激素，又是神经肽。VIP功能多样，如扩张心、脑、肝血管，调节脑血流量，降低肺动脉压，降低血压，松弛支气管平滑肌，调节中
分离肽和蛋白质色谱柱的维护
1、使用常规要求 pH：为了保证色谱柱长寿命，硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2～7，超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关，但是偏离2～7范围越远，色谱柱性能下降的越快。 温度：典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间，高温使用会缩短柱寿命。 缓冲溶液：生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动
分离肽和蛋白质色谱柱的维护
1、使用常规要求pH：为了保证色谱柱长寿命，硅胶基质色谱柱的使用pH范围是2～7，超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关，但是偏离2～7范围越远，色谱柱性能下降的越快。温度：典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间，高温使用会缩短柱寿命。缓冲溶液：生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的p
细胞活性和细胞毒性检测的实验方法
细胞数量确定1.将细胞悬浮液（100μL/孔）接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育（例如，在37℃，5％CO2下）。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡，因为它们会干扰O.D.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光
大连化物所等磷酸化蛋白质组分析方法研究取得新进展
近日，中国科学院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组（1809组）邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学教授李顺成研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法，显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的
大化所磷酸化蛋白质组分析方法研究取得新进展
近日，我所生物分离分析新材料与新技术研究组（1809组）邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学李顺成教授研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法，显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析覆盖率和灵敏度，相关
大连化物所等对磷酸化蛋白质组分析方法研究
近日，中国科学院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组（1809组）邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学教授李顺成研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法，显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析
利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
实验材料：异丙基 β-D-硫代半乳糖苷 试剂、试剂盒：非变性裂解液 非变性洗涤液
利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
实验材料 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒 非变性裂解液非变性洗涤液非变性洗脱液苯甲基磺酰氟仪器、耗材 超声匀浆器聚丙烯柱实验步骤 3.1 非变性条件下重组激酶的纯化用于磷酸化筛选的激酶必须是可溶和有活性的，且无其他激酶参杂的纯化激酶。因此，我们可以从 cDNA 表达文库中，大量生产和纯
酪蛋白激酶分析实验_用－β酪蛋白
实验材料β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中：4 μl 5 ×
活性肽的相关试剂的介绍
这类肽包括谷胱甘肽、肠促胰酶肽等。谷胱甘肽在小肠内可以被完全吸收，它能维持红细胞膜的完整性，对于需要巯基的酶有保护和恢复活性的功能，它是多种酶的辅酶或辅基，可以参与氨基酸的吸收及转运，参与高铁血红蛋白的还原作用及促进铁的吸收。 谷胱甘肽（GSH）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的三
Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。实验材料1 mg ml 钙调蛋白（- 70℃ 小量储存）有 CaM 激酶活性的酶样品10 mmol L 合成肽底物溶液试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液5 × CaM 激酶反
用肽适配体正向分析细胞过程实验
实验方法原理 实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒 完全极限（CM） 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50～100 ug 肽适配体库（在 pJM-2 或 pJM-3 中）转化酵母筛选株（106～107 转化株）。将转化株涂布到
生物发光技术在生命科学中的应用（二）
为了进一步提高检测基因的效率，我们对萤光素酶基因序列的密码子进行了优化，使得它在多种哺乳细胞中的表达水平提高了5～10倍；同时，为了减少对基因的非特异性调控，我们也对萤光素酶的载体进行了优化，去除了载体上哺乳动物转录因子结合序列的保守序列，从而大大降低了实验的本底，显着提高了实验的相对信号强度。优化
利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化实验
实验材料异丙基 β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒非变性裂解液非变性洗涤液非变性洗脱液苯甲基磺酰氟仪器、耗材超声匀浆器聚丙烯柱实验步骤3.1 非变性条件下重组激酶的纯化用于磷酸化筛选的激酶必须是可溶和有活性的，且无其他激酶参杂的纯化激酶。因此，我们可以从 cDNA 表达文库中，大量生产和纯化组氨酸标记
Chemical－Science:－酶特异性探针底物研发新策略
近日，中科院大连化学物理研究所杨凌团队探索出酶特异性探针底物的研发新策略，该团队采用计算机辅助筛选及酶催化位点局部改造的策略成功设计研发了首个细胞色素P450 1A1亚酶的高特异性荧光探针底物。相关研究成果以“A practical strategy to design and develop
方案13阵列探针标记及激酶底物相互作用放射性印迹检测
实验材料合适的激酶目标蛋白制备有蛋白质阵列的玻片试剂、试剂盒ATPDektol 显影剂干燥剂激酶缓冲液照相用定影剂NTB-2 放射自显影感光乳液冲洗缓冲液仪器、耗材β-射线盒离心机孵育箱光学扫描显微镜实验步骤展开
血管活性肠肽瘤的症状
分泌性腹泻是本病最明显的症状，水泻量大且持续时间长，尤其在禁食72小时以后腹泻仍无缓解者，有诊断价值；其他包括体重下降、腹部痉挛、皮肤潮红等。结合实验室检查、血清血管活性肠肽（VIP）测定、B超、CT、选择性胰动脉造影和经皮肝穿刺门静脉系置管取血法（PT-PC)等定位检查不难做出诊断。在本病的定
活性肽的生理功能（一）
活性肽是一千多种肽的总称（如大豆肽，海参肽等是活性肽中的一种）。它在人的生长发育，新陈代谢，疾病以及衰老，死亡的过程中起着关键作用。活性肽是人体中zui重要的活性物质。 目前，它成为全世界研究的热点、大量的国内外研究结果表明：生物活性肽是涉及生物体内多种细胞功能的生物活性物质，在生物
生物活性肽的生产方法介绍
生物活性肽的制备方法可分为直接提取法、人工合成法和蛋白质降解法三种。 直接提取法就是利用各种分离纯化技术， 直接从自然界生物体中提取出各种生物活性肽。由于这些生物活性肽是生物体本身所含有的，并且在生物体中含量很低，如果要把这些活性肽从生物体中分离出来获得较高纯度的产物，成本很高。 人工合成生
活性肽的生理功能（二）
活性肽的生理功能（二） 活性肽是一千多种肽的总称（如大豆肽，海参肽等是活性肽中的一种）。它在人的生长发育，新陈代谢，疾病以及衰老，死亡的过程中起着关键作用。活性肽是人体中zui重要的活性物质。正是因为它在体内分泌量的增多或减少，才使人类有了幼年，童年，成年，老年直到死亡的周期。目前，它
血管活性肠肽瘤的治疗
1.手术治疗 手术切除肿瘤是治疗本病的首选方法，具体术式选择遵循以下原则： ⑴肿瘤较小且为单个者，采用肿瘤剜出术或胰腺部分切除术。 ⑵如肿瘤位于胰尾部可将胰尾切除，或行体尾部切除术，多可治愈。 ⑶如果在术前、术中检查中都未发现肿瘤灶，可行盲目性胰次全切除术，因为本病有75%的肿瘤位于胰腺
血管活性肠肽瘤的病因
此综合征由Verner和Morrison于1958年首先描述，因此还被命名为Verner-Morrison综合征。血管活性肠肽（VIP）在1970年时首次从牛的小肠中被分离提纯，随后的研究证明VIP具有松弛小肠平滑肌、刺激小肠分泌和抑制胃酸分泌等多种生理功能；于是Barbezat和Grossma
关于生物活性肽的发展介绍
中国生物活性肽研究开发起步晚，研究单位少，基础和应用研究都很薄弱，处于起步阶段。 中国在生物活性肽的研究开发上，从事活性肽的研究单位也多从医药角度出发，研究力量及投入较少，限制了活性肽药食两用功能的发挥，市场上国产的活性肽药品和食品寥寥无几。但近几年研究逐步活跃起来，报道渐多，前景看好。当前生
关于肠血管活性肽的简介
肠血管活性肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)由28个氨基酸组成，主要是由肠道神经元释放，在中枢神经系统中也大量存在，为重要的脑肠肽。胰腺中也有很多VIP能神经纤维。脂肪餐和迷走神经刺激均可引起VIP的释放。另外，肠缺血也可刺激其释放。它有着广泛的生物活性，如
生物活性肽的分类相关介绍
生物活性肽的分类可按保健功能来划分。按照功能来分有生理活性肽、食品感官肽等多种 。以下是常见的几种生物活性肽的简介： 1.生理活性肽 抗菌肽 又称抗微生物肽，广泛分布于自然界，在原核生物和真核生物中都存在。如植物、微生物、昆虫和脊椎动物在微生物感染时迅速合成而得，也可采用基因克隆技术生产，
脑脊液血管活性肠肽的概述
CSF中VIP一般认为来源于中枢神经系统，由28个氨基酸组成的神经肽，具有激素和神经介质双重作用。CSF中含量高低可反映中枢神经系统的VIP能神经元的活动状况。
丙酮酸激酶活性测定
【测定原理】PK 活性测定的原理基本同PK 荧光斑点试验，主要不同的是用紫外分光光度法定量测定结果。在10 分钟内、波长340nm 下，测定孵育液中NADH 吸光度的变化，通过测定单位时间内NADH 减少的量来计算PK 的活性。由于PK 是一种变构酶，在低浓度磷酸烯醇丙酮酸（PEP）时，PK