抗体产生细胞的检测—溶血空斑实验
实验材料健康小鼠试剂、试剂盒绵羊红细胞悬液Hanks液凡士林油仪器、耗材注射器平皿漏斗纱布研钵实验步骤1. 免疫动物取25%绵羊红细胞悬液1毫升,无菌操作注入小鼠腹腔中。2. 脾细胞液的制备(1)小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1~2次。(2)取出脾脏研钵中研碎,加Hanks液2~3毫升,用吸管反复吹打数次,使细胞分散。将此细胞悬液经4~8层纱布过滤,1500转/分离心5分钟,弃上清。如细胞太多,可加蒸馏水4毫升迅速混匀,半分钟后立即加入等量Hanks液混匀1000转/分离心10分钟,弃上清。(3)沉淀细胞用Hanks液洗1~2次,弃上清后,加Hanks液使总量达5毫升。用乳头吸管吹打使沉淀细胞悬起混匀,此即为50倍稀释的脾细胞。(4)取此悬液0.1毫升放另一小试管中然后加0.9毫升Hanks液使成500倍稀释的脾细胞悬液。 3. 玻片......阅读全文
抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验
实验概要本实验用溶血空斑实验进行了抗体产生细胞的检测。取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏,制成脾细胞悬液,与一定量的指示细胞(绵羊细胞)和补体结合,注入自制的小室内,经37℃孵育后,单个散在的抗体形成释放抗体,抗体与周围的绵羊红细胞(抗原)结合,并在补体参与下,使绵羊细胞溶解,结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可
抗体产生细胞的检测:溶血空斑实验
实验材料 健康小鼠试剂、试剂盒 绵羊红细胞悬液Hanks液凡士林油仪器、耗材 注射器平皿漏斗纱布研钵实验步骤 1. 免疫动物取25%绵羊红细胞悬液1毫升,无菌操作注入小鼠腹腔中。2. 脾细胞液的制备(1)小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1~2次。(
抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验
实验概要本实验用溶血空斑实验进行了抗体产生细胞的检测。取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏,制成脾细胞悬液,与一定量的指示细胞(绵羊细胞)和补体结合,注入自制的小室内,经37℃孵育后,单个散在的抗体形成释放抗体,抗体与周围的绵羊红细胞(抗原)结合,并在补体参与下,使绵羊细胞溶解,结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可
抗体产生细胞的检测—溶血空斑实验
实验材料健康小鼠试剂、试剂盒绵羊红细胞悬液Hanks液凡士林油仪器、耗材注射器平皿漏斗纱布研钵实验步骤1. 免疫动物取25%绵羊红细胞悬液1毫升,无菌操作注入小鼠腹腔中。2. 脾细胞液的制备(1)小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1~2次。(2)取出
溶血空斑实验
溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空
溶血空斑实验
实验方法原理 溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC
溶血空斑实验技术
一﹑原理 溶血空斑实验是体外检测单个抗体形成细胞(B淋巴细胞)的一种方法,即将经绵羊红细胞(SRBC)免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液,与一定量的SRBC结合,于37℃作用下,免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素,在补体的参与下,使抗体形成细胞周围的SRBC溶解,从而在每一个抗体形成细胞周围,形成
溶血空斑实验的原理
溶血空斑实验原理是将绵羊红细胞免疫的家兔或小鼠,取家兔淋巴结或小鼠脾细胞制成细胞悬液,与高浓度绵羊红细胞混合后加入琼脂糖凝胶中,其中每个释放溶血性抗体的B淋巴细胞在补体的参与下可溶解周围的绵羊红细胞,在周围形成一个可见的空斑,一个空斑代表一个抗体形成细胞,空斑的数量反映机体的体液免疫功能。
溶血空斑试验
实验概要本实验介绍了溶血空斑试验即小室液相法(Test of Plague Forming Cell)的基本原理及操作步骤。实验原理溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell,PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四
溶血空斑试验
实验概要本实验介绍了溶血空斑试验即小室液相法(Test of Plague Forming Cell)的基本原理及操作步骤。实验原理溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell,PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四
体外抗体形成细胞检查法(溶血空斑实验-PFC)
PFC测定技术又称溶血空斑试验。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。自从1963年 Jerne和Nordin首先建立PFC测定技术以来,使免疫学方法得到很大的发展。特别是间接溶血空斑测定法的建立,更扩大了本实验的应用范围。它不仅可以测定产生 IgM 类的抗体产生细胞,而且还可
体外抗体形成细胞检查法(溶血空斑实验-PFC)
PFC测定技术又称溶血空斑试验。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。自从1963年 Jerne和Nordin首先建立PFC测定技术以来,使免疫学方法得到很大的发展。特别是间接溶血空斑测定法的建立,更扩大了本实验的应用范围。它不仅可以测定产生 IgM 类的抗体产生细胞,而且还可
溶血空斑实验的操作方法
常用的为SPA-SRBC溶血空斑试验。SPA能与人及多数哺乳动物IgG的Fc段呈非特异性结合,利用这一特征,首先将SPA包被SRBC,然后进行溶血空斑测定,可提高敏感度和应用范围。 在该测试系统中,加入抗人Ig抗体,可与受检细胞产生的免疫球蛋白结合形成复合物,复合物上的Fc段可与连接在SRBC
关于溶血空斑实验的基本介绍
溶血空斑实验原理是将绵羊红细胞免疫的家兔或小鼠,取家兔淋巴结或小鼠脾细胞制成细胞悬液,与高浓度绵羊红细胞混合后加入琼脂糖凝胶中,其中每个释放溶血性抗体的B淋巴细胞在补体的参与下可溶解周围的绵羊红细胞,在周围形成一个可见的空斑,一个空斑代表一个抗体形成细胞,空斑的数量反映机体的体液免疫功能。
溶血空斑实验一个载玻片上有几个空斑
溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC 所分泌的抗体和绵羊红血球结
溶血空斑实验——小室液相法
溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。(来源:免疫学实习指导--北京大学医学部基础医学院免疫学系)实验方法原理溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体
溶血空斑形成试验
实验方法原理溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空斑试验,间接溶血空斑试验,琼脂固相法,小室液相法,单细胞层法等等。实验材料
溶血空斑形成试验
一、原理: 溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空斑试验,间接溶血空斑试验,琼脂固相法,小室液相法,单细胞层法等等。下面介
溶血空斑形成试验
实验方法原理 溶血空斑形成试验的基本原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空斑试验,间接溶血空斑试验,琼脂固相法,小室液相法,单细胞层法等等。实验材
关于溶血空斑实验的间接测试介绍
间接测试即在小鼠脾细胞和SRBC混合时,再加抗鼠Ig抗体(如兔抗鼠Ig),使抗体与细胞所产生的IgG或IgA与抗Ig抗体结合成复合物,此时能激活补体途径导致SRBC发生溶血,称间接空斑试验。 但是上述直接和间接空斑形成试验都只能检测抗红细胞抗体的产生细胞,而且需要事先免疫,难以检测人类的抗体产
关于溶血空斑实验的直接测试介绍
经典的溶血斑试验用于检测实验动物抗体形成细胞的功能,其原理是将绵羊红细胞(SRBC)免疫小鼠,4天后取出脾细胞,加入SRBC及补体,混合在温热的琼脂溶液中,浇在平皿内或玻片上,使成一蒲层,置37℃温育。由于脾细胞内的抗体生成细胞可释放抗SRBC抗体,使其周围的SRBC致敏,在补体参与下导致SRB
溶血空斑试验的原理
将SRBC免疫的小鼠脾脏(或家兔淋巴结)制成单个细胞悬液,与SRBC在琼脂糖凝胶内混合后倾注于小平皿或玻片上。脾细胞中的抗体生成细胞,释放抗SRBC抗体,使其周围的SRBC致敏,在补体参与下可将SRBC溶解,形成肉眼可见的溶血空斑。每一个空斑中央含一个抗体形成细胞,空斑数目即为抗体形成细胞数。空斑大
溶血空斑试验的概念
中文名称溶血空斑试验英文名称hemolytic plaque assay定 义一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。即将抗体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中,抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合,在补体作用下形成溶血空斑,从而进行定量计数。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫
溶血空斑试验的原理
将SRBC免疫的小鼠脾脏(或家兔淋巴结)制成单个细胞悬液,与SRBC在琼脂糖凝胶内混合后倾注于小平皿或玻片上。脾细胞中的抗体生成细胞,释放抗SRBC抗体,使其周围的SRBC致敏,在补体参与下可将SRBC溶解,形成肉眼可见的溶血空斑。每一个空斑中央含一个抗体形成细胞,空斑数目即为抗体形成细胞数。空斑大
溶血空斑试验的意义
中文名称溶血空斑试验英文名称hemolytic plaque assay定 义一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。即将抗体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中,抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合,在补体作用下形成溶血空斑,从而进行定量计数。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫
关于溶血空斑实验的操作方法介绍
常用的为SPA-SRBC溶血空斑试验。SPA能与人及多数哺乳动物IgG的Fc段呈非特异性结合,利用这一特征,首先将SPA包被SRBC,然后进行溶血空斑测定,可提高敏感度和应用范围。 在该测试系统中,加入抗人Ig抗体,可与受检细胞产生的免疫球蛋白结合形成复合物,复合物上的Fc段可与连接在SRBC
溶血空斑试验的基本介绍
溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空
关于溶血空斑试验的基本介绍
溶血空斑试验又称体外抗体形成细胞测定技术。是一种体外检测单个抗体形成细胞(浆细胞)的方法。其基本 原理是将经绵羊红细胞免疫小鼠的脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合,在补体参与下, 使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏 的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空 斑。根据所操作的方法不同可分为直接溶血空
溶血空斑试验的定义和原理
中文名称溶血空斑试验英文名称hemolytic plaque assay定 义一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。即将抗体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中,抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合,在补体作用下形成溶血空斑,从而进行定量计数。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫
溶血空斑试验——小室液相法
一、基本原理 溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC