环状沉淀反应实验

环状沉淀反应广泛应用于法医学的血迹鉴别和食物掺假的测定。通常这些可疑材料作为抗原,用标准抗血清加以鉴定。它具有用材少的优点,例如衣服等物品上的血迹用生理盐水洗下就可作为抗原进行检查。实验方法原理可溶性抗原例如细菌的提取物,血清、病毒溶液等与相应抗体反应,在有电解质的情况下,会产生细微的沉淀称为沉淀反应。沉淀反应与凝集反应的原理基本相同,所不同的是使用的抗原是可溶性的,正因为是可溶性抗原,其单个抗原分子体积小,在单位体积的溶液内所含抗原量多,其总反应面积大,出现反应所需要的抗体量多,因此,试验时是稀释抗原,而不是稀释抗体。引起沉淀反应的抗原称为沉淀原,相应抗体称为沉淀素。环状沉淀反应是使抗原与抗体在沉淀管内形成交界面,然后在此交界面处出现一环状的乳白色沉淀物(图 1)。出现此环状反应的抗原最高稀释度即为沉淀素的效价。图 1 环状沉淀试验A. 有沉淀环的阳性管;B. 阴性管 Ag:抗原;Ab:抗体实验材料马血清(抗原)兔抗马免疫血清......阅读全文

沉淀反应的检查过程

  沉淀反应分两个阶段,第一阶段发生抗原抗体特异性结合,第二阶段形成可见的免疫复合物。经典的沉淀反应在第二阶段观察或测量沉淀线或沉淀环等来判定结果,称为终点法;而快速免疫浊度法则在第一阶段测定免疫复合物形成的速率,称为速率法。

沉淀反应的定义和阶段

沉淀反应的定义:沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在特定条件下发生特异性结合时出现的沉淀现象。沉淀反应分两个阶段:第一阶段为抗原抗体发生特异性结合,几秒到几十秒即可完成,出现可溶性小的复合物,肉眼不可见;第二阶段为形成可见的免疫复合物,约需几十分钟到数小时才能完成,如沉淀线、沉淀环。

化学沉淀现象的反应简介

根据同离子效应,水中的镁离子和氢氧根离子,不论它们来自同一化合物或不同的化合物,只要离子浓度的乘积超过氢氧化镁的溶度积,它们就结合为氢氧化镁沉淀。

沉淀反应的临床意义

  异常结果:当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。沉淀反应技术由于特异性很强,而被广泛应用于鉴定混合物中蛋白质组分,鉴定菌型,诊断疾病以及在法医上鉴定血迹等。如检查梅毒抗体的康氏反应。  需要检查的人群:受相关病毒感染者,或者抵抗力低人

沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)

一、     概述 可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀

沉淀[反应]的概念和机理

中文名称沉淀[反应]英文名称precipitation定  义可溶性抗原(细菌培养滤液、细胞或组织的侵出液、血清蛋白等)与相应抗体在一定条件下出现沉淀物的现象。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

什么是免疫沉淀反应?

免疫沉淀反应(Immunoprecipitation)主要用于抗原或者抗体的定性检测。其原理是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下,按适当比例所形成的可见沉淀物现象。据此现象设计的沉淀实验主要包括絮状沉淀试验,环状沉淀试验和凝胶内的沉淀试验。凝胶内的沉淀试验依所用的实验方法又可分为免疫扩散实

沉淀DNA的实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 乙酸钠乙醇仪器、耗材 EP管低温离心机移液器-70度冰箱实验步骤 酶切前确定待切样品的浓度, 并选择合适的限制性内切酶和配套Buffer。2. 在离心管中加入如下成分:10×Buffer   1μl待切样品   xμl酶      0.5-1μl————————————

免疫沉淀实验

基本方案 制备抗体Sepharose 偶联物 抗Ig血清免疫沉淀放射性标记抗原 免疫沉淀放射性标记抗原             实验材料

免疫沉淀实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 裂解缓冲液稀释缓冲液SDSTrisTSA仪器、耗材 转子离心机实验步骤 1.  表面标记或生物合成标记的细胞在裂解缓冲液中于4℃放置1 h 后,再于4℃3 000 g 离心10 min 除去细胞核,然后将所得上清在10000 g 离心1 min。 2.  一次性对上清进

沉淀DNA的实验

乙醇沉淀法             实验方法原理 DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体

蛋白质沉淀反应的几个反应现象

蛋白质沉淀反应有两种反应现象:(1)盐析:在蛋白质水溶液中加入足量的盐类(如硫酸铵),可析出沉淀,稀释后能溶解并仍保持原来的性质,不影响蛋白质的活性。这是一个可逆的过程,可用于蛋白质的分离与提纯。(2)变性:在重金属盐、强酸、强碱、加热、紫外线等作用下,引起蛋白质某些理性质改变和生物学功能丧失。这是

蛋白质沉淀反应的几个反应现象

蛋白质沉淀反应有两种反应现象:(1)盐析:在蛋白质水溶液中加入足量的盐类(如硫酸铵),可析出沉淀,稀释后能溶解并仍保持原来的性质,不影响蛋白质的活性。这是一个可逆的过程,可用于蛋白质的分离与提纯。(2)变性:在重金属盐、强酸、强碱、加热、紫外线等作用下,引起蛋白质某些理性质改变和生物学功能丧失。这是

快速血浆反应素环状卡片实验正常参考值及临床意义

中文名称:快速血浆反应素环状卡片实验 英文名称:Rapid Plasma Reagin Circle Card Test  (RPR) 正常参考值:阴性 临床意义: 一般正常人为阴性,滴度≥1:4提示梅毒感染。以下情况下可出现生物学假阳性:如麻疹、水痘、病毒性肝炎、肺炎、活动性肺结核

什么是快速血浆反应素环状卡片试验

  快速血浆反应素环状卡片试验是一种梅毒血清学检测的非特异性反应。用于检测病人血清中有无抗类脂抗原的反应素,常用于梅毒病人筛选和流行病学调查。

快速血浆反应素环状卡片试验的介绍

  快速血浆反应素环状卡片试验是一种梅毒血清学检测的非特异性反应。用于检测病人血清中有无抗类脂抗原的反应素,常用于梅毒病人筛选和流行病学调查。

快速血浆反应素环状卡片试验的原理

  用业经处理的活性炭颗粒(约3~5μm)吸附VDRL抗原。此颗粒抗原一旦与血清中的梅毒反应素结合便形成黑色凝块,肉眼即可识别。

环状化合物的环化及开环反应

生成环状结构的有机反应称为环化反应、关环反应、成环反应,打开环状结构的反应则称开环反应。典型的环化反应有:关环复分解反应Nazarov环化反应Ruzicka大环合成Dieckmann缩合反应Wenker合成典型的开环反应有:开环聚合反应—聚合反应的大类开环复分解聚合环状化合物

关于抗原–抗体反应的类型—沉淀反应的介绍

  沉淀反应,可溶性抗原(如血清蛋白、细菌培养滤液、细菌浸出液和组织浸出液等)与相应的抗体在有电解质存在的条件下结合,可形成肉眼可见的沉淀物。沉淀反应由于特异性很强,所以被用来鉴定混合物中的蛋白质组分、菌型,诊断疾病以及在法医学上鉴定血迹等。沉淀反应还可分为环状沉淀反应(对抗原的定性测定)、絮状沉淀

沉淀反应在医学检验中应用

免疫浊度法主要用于血液、体液中蛋白质的测定。稳定性好,敏感度高(达ng/L),精确度高(CV<5%),简便快速,易于自动化,无放射性核素污染,适合于大批量标本的检测。免疫固定电泳技术在临床应用较广。最大的优势是分辨力强,敏感度高,结果易于分析,现最常用于血清中M蛋白的鉴定与分型。

临床化学检查方法介绍沉淀反应

沉淀反应介绍:  免疫沉淀反应(Immunoprecipitation)主要用于抗原或者抗体的定性检测。其原理是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下,按适当比例所形成的可见沉淀物现象。据此现象设计的沉淀实验主要包括絮状沉淀试验,环状沉淀试验和凝胶内的沉淀试验。凝胶内的沉淀试验依所用的实验方法

沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)(1)

一、 概述可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素(pre

沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)(2)

2.取试管5支(5mm×50mm)置于试管架上,编号。第1、2试管内加炭疽沉淀血清,第3、4试管内加正常血清,第5管内加待检抗原,分别用毛细滴管加至4mm~5mm。3.第1、4、5试管轻轻叠加等量缓冲液,第2、3试管轻轻叠加等量待检抗原。为防止上下两界面破坏,可将小试管从试管架取出,微倾斜,沿试管壁

包涵体沉淀溶解实验

试剂、试剂盒缓冲液 AN-十二烷基肌氨酸钠(SKL)考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液快速蛋白质斑点印迹试验用试剂仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)分子量标准参照物实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)分子量标准参照物试剂缓冲液 AN-十二烷基

蛋白共沉淀检测实验

用蛋白A/G-琼脂糖 备择 用GST融合蛋白             实验方法原理实验材料 全细胞抽提物 试剂、试剂盒 抗体 免疫共沉淀缓冲液

包涵体沉淀溶解实验

            试剂、试剂盒 缓冲液 A N-十二烷基肌氨酸钠(SKL) 考马斯亮蓝(CBB) 染色液 脱色液 快速蛋白质斑点印迹试验用试剂

蛋白共沉淀检测实验

实验方法原理 实验材料 全细胞抽提物试剂、试剂盒 抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液(用于 SDS-PAGE 胶)仪器、耗材 20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤 1. 在冰上将以下组分加入离心管,双份:0.5~1 mg 全细胞抽提物1 μg 抗

包涵体沉淀溶解实验

试剂、试剂盒 缓冲液 AN-十二烷基肌氨酸钠(SKL)考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液 快速蛋白质斑点印迹试验用试剂仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)分子量标准参照物实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶(10%)分子量标准参照物试剂缓冲液 AN-

三氯乙酸沉淀实验

试剂、试剂盒 丙酮分子量标准TCA+DOC加与不加2-巯基乙醇的样品缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管实验步骤 材料与设备丙酮(Aldrich Chemical Co.Inc.)注:保存于室温。不能放入冰箱。聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)注:1. 用前将离心管洗干净。2. 分析极少量蛋白质(

三氯乙酸沉淀实验

            实验方法原理 1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白质分子量的增