鞭毛染色实验——硝酸银染色法

细菌的鞭毛很纤细,其直径通常为 0.01 ~0.02 μm, 所以,除了很少数能形成鞭毛束(由多根鞭毛构成)的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外,一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到,而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛,必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多,本实验介绍硝酸银染色法和改良的 Leifson 氏染色法,前一种方法更容易掌握,但染色剂配制后保存期较短。实验方法原理鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。实验材料苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒硝酸银鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤1. 菌种的准备 要求用活跃生长期菌种作鞭毛染色和运动性的观察。对于冰箱保存的菌种通常要连续移种 1~2 次,然后可选用下列方法接种培养作染色用菌种:1.1 取新配制的营养琼脂斜面(......阅读全文

支原体的检测实验_荧光染色法

实验方法原理荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1.  标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已

蛋白质凝胶染色法实验(二)

关键步骤通常如下所述。(1) 固定凝胶,以固定蛋白质条带,并移除凝胶中的干扰物质, 如 S D S 、缓冲液和盐,这些物质会结合银并造成背景染色。(2) 用能够结合蛋白质并提高银结合能力的物质, 或是能够干扰剩余未结合的银造成的背景染色的物质来孵育凝胶。总之,这些各种各样的方法都和敏化作用有关。(3

蛋白质凝胶染色法实验(一)

总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析,则首选不会引入共价蛋白

蛋白质凝胶染色法实验(三)

尼罗红蛋白质凝胶染色剂尼罗红 (Nile red) 是一种吩囉嗪酮类染料, 当其从水转入到疏水环境,如 S D S 微粒或蛋白质-S D S 复合物中时,便显示出强烈的荧光增强作用。尼 罗 红 不 会 与 S D S 单体发生显著作用》利用这一特点开发出了一种适合 S D S 凝胶的迅速

蛋白质凝胶染色法实验3

糖蛋白的检测1. 通用糖蛋白检测糖 基 化 是 真 核 细 胞 中 最 常 见 的 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 。寡 糖 通 常 连 接 于 天 冬 酰 胺 侧 链(iV-连 接 糖 基 化 ) 或 丝 氨 酸 和 苏 氨 酸 羟 基 侧 链 (〇 连 接 糖 基 化)。凝 胶 中 蛋 白 质

蛋白质凝胶染色法实验2

2. 总蛋白质荧光法染色荧光染色法结合了检测灵敏度 (可与银染法媲美) 与染色流程简便性 (与考马斯亮蓝染 色 或 Z n 2+ 反染法相同),且其线性定量范围较比色法大 10〜100 倍 。检测依赖于仪器,需要一个单色激发光源、能将波长较长的发射光从波长较短 (也更亮)的激发光中分离出来的选择性光

蛋白质凝胶染色法实验(五)

磷 蛋 白 的 检 测作为基本的细胞信号机制, 指定氨基酸残基的可逆磷酸化作用的重要性已无需争辩。当前磷蛋白染料具有受ZL保护的构型,即磷酸基结合部分共价连接于荧光团。检测的方式是选择性结合磷酸化的氨基酸,但是没有荧光增强作用。从某种程度上讲, 许多可溶的荧光复合物都可作为总蛋白质染色剂

蛋白质凝胶染色法实验(四)

(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸进行简单的凝胶脱色。利用基于微波炉的方案可以加快染色过程的进行。 SYPRO R uby 蛋白质凝胶染料具有相对较高的消光系数和量子产率,因此它十分亮眼, 化学稳定性和光稳定性都很高。光谱的激发可借助紫外线或是蓝光光源;

各种组织特殊染色法—纤维素染色法

纤维素又称纤维蛋白,在正常的情况下,它是血液内的纤维蛋白原分子聚合而形成的一种特殊蛋白质。正常的组织是见不到纤维素的。但是,当组织受损,血管内皮受到了较为严重的损害,血管通透性随之升高,则可导致大量纤维蛋白的漏出。纤维素性炎症就是以纤维素渗出为主[6]的一种抗损害的症状。在HE感染时于镜下可见到大量

鞭毛染色液的配制方法

鞭毛染色液   A液:单宁酸 5g  FeCl3 1.5g  蒸馏水 100ml  福尔马林(15%) 2.0ml  NaOH(1%) 1.0ml  配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。  B液:AgNO3 2g  蒸馏水 100ml  待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余的90

细菌的鞭毛染色(Flagella-stain)

实验器材1.活材料培养12-16h的水稻黄单胞菌(Xanthomonas oryzae),粘质赛氏杆菌(Serratia marcescens)或假单细胞菌(Pseudomonas sp.)斜面菌种。2.染色液和试剂硝酸银染色液、Leifson染色液、香柏油、二甲苯。3.器材载玻片、擦镜纸、吸水纸、

细菌鞭毛染色方法及其应用

 细菌鞭毛纤细,直径只有10~30nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态。由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述。一、细菌鞭毛染色方法  目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂的不同,可分为碱性复红法、副品红法、结

细菌鞭毛染色方法及其应用

  细菌鞭毛纤细,直径只有10~30nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态。由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述。一、细菌鞭毛染色方法  目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂的不同,可分为碱性复红法、副品红法、

细菌鞭毛染色方法及其应用

细菌鞭毛纤细,直径只有10~30nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态。由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述。 一、细菌鞭毛染色方法   目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂

姐妹染色单体分化染色法

1. 实验原理 姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处理技术。1973年Latt在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromode Oxyurdine,BrdU),用Hoechst 3

革兰氏染色法的染色原理

革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由

瑞氏染色法:染色原理

 既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态

瑞氏染色法染色原理

瑞氏染色法染色原理:    为了观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。瑞氏染料:    是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。染色原理:   是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理的吸附作用,又有化学的

细菌芽孢染色实验_改良的SchaefferFulton-氏染色法

实验方法原理用着色力强的染色剂孔雀缘或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内卡进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。实验材料蜡样芽孢杆菌(约2d 营

关于PI单染色法的实验原理介绍

  1、PI单染色法— 细胞核的改变:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。研究表明,用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色,其DNA可染性降低。许多学者把这种DNA可染性的降低认为是凋亡细胞的标志之一。  2、PI单染色法— 光散射特性:凋亡细胞形态上

关于PI单染色法的实验步骤介绍

  1、PI单染色法— 收集细胞{数目约(1~ 5)×106个/mL},500 ~ 1000 r/min离心5min,弃去培养液。  2、PI单染色法— 3ml PBS洗涤1次。  3、PI单染色法— 离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1—2小时。  4、PI单染色法— 离心弃去固定

红墨水染色法测定种子活性实验

实验方法原理生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的细胞原生质膜丧失这种能力,于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞,而胚乳细胞全部被红墨水染成红色,那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞?所以染色机理不但与质膜透性有关,而且还与细胞(胚细胞

红墨水染色法测定种子活性实验

实验方法原理 生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的细胞原生质膜丧失这种能力,于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞,而胚乳细胞全部被红墨水染成红色,那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞?所以染色机理不但与质膜透性有关,而且还与细胞(胚细

红墨水染色法测定种子活性实验

实验方法原理:生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的细胞原生质膜丧失这种能力,于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞,而胚乳细胞全部被红墨水染成红色,那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞?所以染色机理不但与质膜透性有关,而且还与细胞(胚细

瑞特染色法

为发观察细胞内部结构,识别各种细胞及其异常变化,血涂片必须嘲行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。目前常用瑞特染色法。  (1)瑞特染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝。美蓝容易氧化为一、二、三甲

细菌抗酸染色法

细菌抗酸染色可以应用于(1)不易于其他染色料的细菌进行染色(2)细菌的形态分析。实验方法原理结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。实验材料结核病人痰试剂、试剂盒抗

细菌抗酸染色法

1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。 2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。 3、方法(1)取洁

细菌抗酸染色法

1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。 2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。 3、方法(1)取洁

细菌抗酸染色法

1、原理与应用结核分枝杆菌对苯胺染料一般不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,经此染色后,结核分枝杆菌及其他分枝杆菌呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。2、材料(1)结核病人痰(2)抗酸染色液(3)玻片、片夹、滤纸片、竹签、空平皿、污物盆。3、方法(1)取洁净的

吉姆萨染色法

吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更不清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液,按瑞特染色法染10min.或先用瑞特染色法染色后,再用稀释吉姆萨复染。