基本方案2RNA抽提和标记
试剂、试剂盒TRIzol 试剂PBS氣仿乙醇乙酸钠引物Superscript Ⅱ RNase H反转录酶10 X low-T dNTP 混合物EDTATE 缓冲液仪器、耗材RNeasy Maxi 试剂盒组织匀浆机圆底离心管圆锥底离心管水平离心机薄壁 PCR 管热循环仪荧光扫描仪实验步骤展......阅读全文
RNA－抽提中自备有机溶液的配制及保存问题
看了离心机的配平讨论帖，才决定发起该帖的。该帖的问题也比较简单，但人人都会遇到，所以帖之。实验者，5 成用心，3+ 成用脑，2- 成用手是也。假定你抽提 RNA 时使用到的有机试剂 - 氯仿、异丙醇、无水乙醇 - 都是国产的 (这是完全可以使用的)。我的问题是：你采取了什么措施来降低或者杜绝 RNa
RTPCR实验方法大全(抽提RNA，RT，PCR)4
3． 由于与反义RNA探针杂交的样品RNA仅为该RNA分子的部分片段，因此，部分降解的RNA样品仍可进行分析。4． 步骤较少，耗时短。与Northern杂交相比，省去了转膜和洗膜的过程。5． RNA-RNA杂交体稳定性高，无探针自身复性问题，无须封闭。6． 一个杂交体系中可同时进行多个探针杂交，无竞
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4. 配制的溶液应尽可能的用0.1% DEPC，在37℃处理12hr以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制，然后经 0.22μm滤膜过滤除菌。5. 操作人员戴一次性口罩、帽子、手套，实验过程中手套要勤换。6. 设置RNA操作专用实验室，所有器
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可能问题出在标本的保存：一般四小时之内就应处理，分离出细胞说的是套式PCR,可以在你的第一次PCR两个引物内,再设计一对引物进行第二次PCR就行了如果你的第一次PCR刚好包括目的片段,那只好设计个更长的了第二次的引物设计要求可以低一点以50μl体系为例引物各1μl第一次PCR产物5μl二次PCR和巢
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同，所以可以通过选择溶剂，使得目的蛋白质溶解度大，而其他杂蛋白质溶解度小，然后经过离心，可以去除大多数杂蛋白质。方法：溶剂的选择是抽提的关键，由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸，所以可
乙醇固定样品DNA－抽提和直接PCR
实验概要本实验从乙醇浸泡的鱼苗中提取DNA，并利用直接PCR进行了鉴定。实验原理在实际的研究工作中，野外取样的地点一旦较为偏远，受条件的限制，很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻；另外，对一些稀有物种和濒危种，鲜活样品的采集十分困难，一般为了解决这些问题，常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品，再对样
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同，所以可以通过选择溶剂，使得目的蛋白质溶解度大，而其他杂蛋白质溶解度小，然后经过离心，可以去除大多数杂蛋白质。方法：溶剂的选择是抽提的关键，由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸，所以可
植物总DNA抽提方法和优缺点
1、植物DNA的CTAB提取法：经典方法。效果较好，污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法：较为简易，提取的为全基因组，但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法：4、PCR研究的快速提取法：以上两者方法简单，快速，但污染多，不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法：多
关于沥青抽提仪的基本信息介绍
沥青抽提仪，从沥青混合料中抽提沥青并确定沥青的含量的仪器。 一、沥青抽提仪的主要特点： ● 使用洗净室和旋转筛桶洗提沥青 ● 使用高性能离心分离机分离填充料、沥青和溶剂 ● 加上蒸馏单元，可以分离沥青和溶剂 ● 干燥矿粉和填充料，反复利用溶剂 二、沥青抽提仪的技术参数： 每天抽提
抽提萃取法展望
展望编辑萃取作为分离和提纯物质的重要单元过程，今后还会得到进一步的发展，其主要发展方向是：（1）研究新的萃取体系和新的萃取工艺；（2）合成和筛选高效萃取剂；（3）研究与发展新型萃取设备，重点应放在设备的自动化、连续化上；（4）开展萃取机理及理论的研究。 [2]
抽提萃取的特点
提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取。不过，一般有机溶剂亲水性越大，与水作两相萃取的效果就越不好，因为能使较多的亲水性杂质伴随而出，对有效成分进一步精制影响很大。
CTAB法抽提核酸
CTAB 法 ①取0. 2g 各中药材样品分别用液氮( Ⅰ) 、玻璃砂( Ⅱ) 、氧化铝( Ⅲ) 研磨。②加入56 ℃ 10 倍预热的缓冲液C 于56 ℃温育30 min , 离心, 取上清液加入等体积氯仿- 异戊醇(24∶1) 抽提(室温, 不能低于15 ℃, 否则CTAB 会沉淀) , 10 0
醇化办法核酸抽提
醇化办法核酸抽提 PC 抽提/醇沉淀办法，是一个永不陈旧办法。牢稳、靠得住、经济、便捷。PC 抽提可以彻底去除氨基酸，醇沉淀可以去除盐，对于普通的整洁的样品(杂质为氨基酸)，该办法足以取得高品质的核酸。固然每每PC 抽提都会亏损一小批核酸(由于没可能将水相所有移取)，以及低液体浓度核酸的
抽提萃取的分类
萃取的机理既有物理的溶解作用，又有化学的配合作用，是一个复杂的物理溶解过程 。一般而言，萃取那些简单的不带电荷的共价分子时为物理溶解过程。但在大多数情况下，被萃取物与有机相中一种或多种组分发生化学变化，生成新的化学物种后被萃入有机相，这便属于化学过程。按照萃取机理的不同，可分为五种类型： （1
裂解办法抽提核酸
裂解办法抽提核酸含蛋白酶的裂解办法，还是可以觉得是抽提基因组DNA 的首选。裂解涵盖膜蛋白的游离和与基因组DNA 衔接接的氨基酸的游离。蛋白酶的效用是使氨基酸变小，因而对氨基酸的游离有很大的增进效用；同时，很大的基因组DNA 是很容易“缠”住大分子的物品的，氨基酸被蛋白酶克化变小后，则不由得易被基因
抽提萃取的概念
利用化合物在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。经过反复多次萃取，将绝大部分的化合物提取出来。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙
蛋白抽提指南（TRIZOL）
在用酒精沉淀出DNA（DNA抽提中的步骤一）后剩余的苯酚—乙醇上清中可以抽提出蛋白。沉淀的蛋白可通过蛋白[质]印迹法对样品中某一特殊的蛋白质进行分析。试剂所需，但没有随同提供的物品：* 异丙醇* 0.3M盐酸胍(用95%酒精配制)* 无水乙醇* 1% SDS1.蛋白质的沉淀用异丙醇从苯酚—乙醇上清中
DNA抽提指南(TRIZOL)
按照RNA 分离操作方案在完全移去水样层后，匀浆中的DNA 存在于中间层和苯酚层中也可以被分离出来。在沉淀和多次洗脱后，DNA 溶解在8 mM NaOH中。用TRIZOL试剂从组织和培养细胞中完全回收的DNA 可以用来做样品中DNA 含量的测定。同时抽提的基因组DNA 可以用于对Northern a
细菌的核酸抽提
DNA Extraction· DNA Extraction from Bacteria (Julie B. Wolf,UMBC)Phenol/chloroform method· DNA Extraction From Bacteria (Triton Method
酵母遗传学方法2：蛋白质的抽提
酵母蛋白质的抽提此法抽提的酵母蛋白适用于SDS凝胶电泳和Western印迹分析。1．从OD600＝2的细胞培养物中抽提酵母蛋白质。培养物的一种简单制备方法是将细胞接种到5ml YPD中，过夜培养后获得指数培养物（OD600＝0.5～2.0）。2．在水浴上把OD600＝2的细胞培养物转到含有2ml的5
罗氏FFPET组织样本抽提RNA试剂盒实验结果分析
High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理，在柱上直接进行高效DNase消化，在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。图1：抽提获得宽泛的RNA片段范围，FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp 使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um
RNA标记
RNA labeling (Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes 32P-pCp 3' End-labeling
RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RN
关于沥青快速抽提仪的基本信息介绍
沥青快速抽提仪，抽提时间(包括干燥)：35分钟，加上蒸馏单元，可以分离沥青和溶剂。 一、注意事项： 1、应选择平整、稳固、通风的场地安装本机； 2、要保持机器清洁，溶液严禁进入电机，以免造成损坏。 3、出现异常声响或其他故障应先切断电源后进行检查。 4、试验完成后，应先进行清洁工作，以
质粒抽提的基本原理及操作流程
质粒抽提的基本原理及操作流程 ⒈质粒抽提基本原理 在其中采用几种水溶液及其硅酸化学纤维膜（超滤膜柱）。 水溶液Ⅰ：50 mM果糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA，pH 8.0；水溶液Ⅱ：0.2 N NaOH / 1%SDS； 水溶液Ⅲ：3 M 醋酸钾/ 2 M
脂肪抽提仪操作须知
传统的脂肪提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成，利用的是溶剂回流和虹吸的原理。但是这一仪器有一弊端，各部分连接处容易漏气，且工作效率不高。今天小编要给大家介绍一下脂肪抽提仪，其根据索氏抽提原理，用重量测定方法来测定脂肪含量，常被用于食品、油密封圈受乙醚变形泄露的问题。脂肪抽提仪在给人们
全自动核酸抽提仪
全自动核酸抽提仪是一种用于基础医学、临床医学领域的分析仪器，于2016年10月25日启用。 技术指标 1.采用QIAGEN硅胶膜离心柱技术,2.针对多种生物样本（包括全血、血浆、血清、尿液、粪便、细胞和FFPE组织或新鲜组织等），可以实现对基因组DNA，病毒核酸，质粒DNA，microRNA
核酸抽提经验及原理
1、核酸抽提原理 简单地讲，核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐
关于全自动沥青含量快速抽提仪的基本介绍
全自动沥青含量快速抽提仪，是一种用于鉴定沥青含量的仪器。 全自动沥青含量快速抽提仪集沥青和溶剂回收为一体，整个工作过程采用全自动控制，具有功能齐全，工艺先进，自动化程度高，操作简便等特点。 全自动沥青含量快速抽提仪必需置于有顶面防护的房间或棚子中，距离墙面100cm。仪器底座放置好后，应该校
麦胚抽提物的概念
中文名称麦胚抽提物英文名称wheat-germ extract定 义用于测定信使核糖核酸(mRNA)活性的一种体外翻译分析系统。系从小麦胚中制备的无细胞抽提物，须用RNA酶去除其中内源的mRNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）