流动相和流量的选择
ESI和APCI分析常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液,如甲酸铵、乙酸铵等。HPLC分析中常用的磷酸缓冲液以及一些离子对试剂如三氟乙酸等要尽量避免使用,不得已时也要尽量使用低浓度。 流量的大小对LC-MS成功的联机分析十分重要。要从所用柱子的内径、柱分离效果、流动相的组成等不同角度加以通盘考虑。即使是有气体辅助设置的ESI和APCI接口也仍是在较小的流量下可获得较高的离子化效率,所以在条件允许的情况下最好采用内径小的柱子。从保证良好分离的角度考虑,0.3mm内径的液相柱在10μl/min左右的流量下可得到良好分离,1.0mm的内径,要求30-60μl/min的流量,2.1mm的内径要求200-500μl/min的流量,而4.6mm的内径则在>700μl/min的流量下方可保证其分离度。采用2.1mm内径的柱子,用300-400μl/min的......阅读全文
液相色谱流动相的几点注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去
液相色谱流动相的脱气的相关事项
液相色谱流动相的脱气的相关事项 HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起
液相流动相未平衡好会怎么样
未平衡好有两种可能。一个是基线不稳。色谱峰是在基线的基础上进行积分,如果基线不稳,那么直接会影响到色谱峰的峰面积。含量计算是根据峰面积进行的计算。所以基线不稳,定量有可能不准。一个是出峰位置漂移。色谱柱虽然不长,但是其中的孔径很多,填料的粒径也很小。有可能没有完全被流动相填满。再加上流动相当中如果有
液相流动相怎样将乙腈换成甲醇
直接将色谱纯乙腈脱气换上就行 甲醇和乙腈混溶 没关系的直接换过来就行了,冲柱子的时候多用几个梯度,延长一点冲住时间就好了可以直接接上柱子 用100%的乙腈冲一段时间后再慢慢变化到50%的乙腈
液相色谱流动相过滤的注意事项
用滤膜过滤时,特别要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液,严禁用于有机溶剂,否则滤膜会被溶解!溶有滤膜的溶剂不得用于HPLC。注意:对于混合流动相,只要含有机相,有机相滤膜过滤。B. 如何使用溶剂过滤
液相色谱流动相的优化组合方法
液相色谱应用广泛的是反相色谱,其流动相的优化组合直接关系到分离效果。八十年代二元流动相组成优化依赖于容量因子(k’)的对数值与极性溶剂的摩尔分数关系,根据两者线性关系,可以估算溶质的保留值。曾有人确定过14种二元溶剂系统的容量因子与流动相的关系。Scott,Snyder和Soczeuinski的色谱
流动相极性对液相色谱分离的影响
这个是根据药典上面的注释来的,具体影响只能说是,对填料的吸附能力有所控制,有很多样品在正向的时候分离效果好,有的则是相反的,这个是不一定的,具体的影响很小,只是针对于有没有利于分离的效果
可以用DMSO做为液相流动相吗
可以,但是很多柱子不兼容的,会破坏固定相,需要先看说明书。
气相色谱法用得流动相是什么
气相色谱法用得流动相是气体,一般有氮气,氦气,氢气等,而液相色谱法流动相是液体,一般有乙腈,甲醇,水(反相),正乙烷,乙醇,异丙醇(正相)等。
液相色谱流动相的几点注意事项
一、 流动相溶剂的选择1.所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。2.溶剂应当不干扰检测器的工作,溶剂应与检测器匹配,选择不影响检测器正常工作应选择在测定波长范围内无吸收的流动相。3.在制备分离中, 溶剂应当易于除去
液相色谱柱流动相的流速的选择
因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1mL/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8mL/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方
常用的气相色谱流动相和固定相
极性比较相近的几种物质的混合物,是极性大还是极性小?可能要用极性柱子。 极性比较相近的几种物质的混合物用梯度洗脱试试。气相的流动相主要就是氮气或者氦气。极性相近的混合物那也得具体对象具体分析啊,现在柱子多的是,不同的目标物可以选用不同的色谱柱。
高效液相色谱流动相的注意事项
一、普通C8及C18反相色谱柱当色谱柱使用较长时间之后,就可能发生柱压升高、分离度不好、柱效降低、峰形不好等情况,这时就需要根据故障原因对色谱柱进行清堵与再生,以延长色谱柱的使用寿命。具体原因及处理方法如下:1)筛板堵塞与柱头塌陷主要现象有柱压严重升高或不稳定、色谱峰拖尾、色谱峰变宽、色谱峰分叉、秃
流动相跑干了怎么办
1.换上足量新的流动相或超纯水;2.拧开排气阀,开大流速进行排气,如果泵不能吸液,可以拧开出口单向阀的出口螺丝,直至有液体流出再拧紧(建议用注射器把溶剂过滤头到比例阀入口那段管路的气泡抽光,免得柱塞杆长时间干跑而损坏柱塞杆);3.把柱子换成双通,不接流通池,拧紧排气阀,开大流速把系统管路里的气泡冲走
流动相跑干了怎么办
首先要解决气泡问题。气泡最难排除是检测器里的气泡,还有柱子里也有气泡了。排除柱子里的气泡最把柱子立起来,从下向上冲洗,(也就是常说的反冲)排除检测器里的气泡麻烦,因为有时气泡在里面可能长时间冲洗也出不来的,这时你可以通过变换流动相和流速的办法,比如把柱拿掉,再用水相,水相和乙腈混合,或水与甲醇混合,
反向色谱流动相的pH值
在以反相液相分离极性和离子型化合物时常采用缓冲溶液作为流动相。缓冲溶液应具有足够高的离子强度,这样可以避免出现不对称峰和峰分裂。 缓冲液应具有以下特征: 1 在pH=2~8之间要有足够大的缓冲容量; 2与检测器匹配; 3可以与为了改善分离添加的有机溶剂混溶; 4 能
怎么区分固定相和流动相?
在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。
什么是流动相和固定相
固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。拿液相来举例,如上图。流动相是配置出来的液体溶剂,泵是心脏,负责抽取流动相,推动系统的。然后流动相带着进样器注入的样品,流过色谱柱。所以说流动相是载体。色谱柱里的填料是固定相,就是固体的多孔颗粒。样品开始的时候是混合在一
什么是流动相和固定相
固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。拿液相来举例,如上图。流动相是配置出来的液体溶剂,泵是心脏,负责抽取流动相,推动系统的。然后流动相带着进样器注入的样品,流过色谱柱。所以说流动相是载体。色谱柱里的填料是固定相,就是固体的多孔颗粒。样品开始的时候是混合在一
HPLC色谱流动相的脱气方法
HPLC系统的管路流体如有气泡生成,会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰有的甚至影响HPLC的灵敏度.如今在使用HPLC时为防止气泡生成,主要是对色谱流动相做脱气处理,其主要的方法如下:1.吹氦脱气法使用在液体中比空气溶解度低的氦气,在0.1Mpa压力下,以约60ml/min流速通入流动相10-15min
手性柱分析流动相方法优化
手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用zui多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,不过正庚烷比正己
什么是固定相和流动相?
在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。
什么是固定相与流动相
在色谱法中,是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同以使组分分离的方法。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相,流动相中携带了( 溶解)待测的药物。固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。在气相里就是栽气,在液相里
关于流动相的疑问解答(二)
化学试剂存放知识总结 化学试剂存放要依据物质自身的物理性质和化学性质,降低或杜绝物质变性、自然损耗,方便试剂取用是我们的总原则。因此我们要考虑试剂瓶瓶质、瓶口、瓶塞、瓶体颜色、防护性试剂与环境措施等诸多方面的问题。 试剂瓶对化学试剂的使用要求 1.对试剂瓶瓶质要求
什么是固定相与流动相
在色谱法中,是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同以使组分分离的方法。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相,流动相中携带了( 溶解)待测的药物。固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。在气相里就是栽气,在液相里
流动相跑完了,怎么办
用纯甲醇冲,可以恢复的。把柱子拆了,用高流速冲,然后上柱子,用正常流速多冲会
关于流动相的使用须知介绍
1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。 2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。
手性分析之流动相方法优化
1、 流动相 手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用最多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,不过
流动相跑干了怎么办
首先要解决气泡问题。气泡最难排除是检测器里的气泡,还有柱子里也有气泡了。排除柱子里的气泡最把柱子立起来,从下向上冲洗,(也就是常说的反冲)排除检测器里的气泡麻烦,因为有时气泡在里面可能长时间冲洗也出不来的,这时你可以通过变换流动相和流速的办法,比如把柱拿掉,再用水相,水相和乙腈混合,或水与甲醇混合,
流动相在线脱气机特点说明
流动相在线脱气机可以连续不断地从流动相中除去溶解的气体,消除流动相的不稳定因素和降低基线漂移及噪音,从而消除了对电化学、荧光和紫外检测氧的干扰。流动相在线脱气机有二路、三路和四路三种型号。 流动相在线脱气机采用Teflon AF脱气膜管,在保证同样脱气效果的基础上,脱气效率超过传统PTF