福林酚法定量测定蛋白质
实验概要本实验用福林酚法(Folin—酚试剂法)测定了蛋白质的含量。实验原理Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法。以后在生物化学领域得到广泛的应用。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这个方法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时较长,要严格控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。凡干扰双缩脲反应的基团,如 -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2以及Tris缓冲液、蔗糖、硫酸铵、巯基化合物均可干扰Folin—酚反应,而且对后者的影响还要大得多。此外,酚类、柠檬酸对此反应也有干扰作用。Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠组成。蛋白质中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物。乙......阅读全文
微量紫外应用
核酸分析:260/280nm 比值 (光学参比320nm) 测定核酸纯度•蛋白质分析:- 福林酚法(Lowry)- 双缩脲法(Biuret)- 考马斯亮蓝法(Bradford)- 二喹啉酸法(BCA)•动力学测试,如酶活性的测定•标准比色皿或者低至 1μL样品量的超微量测试
植物RNA的制备实验——酚/SDS法
由于RNA的种类来源很多,因而提取制备方法各异,一般有苯酚法,去污剂法和盐酸胍法,其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,向水相加冷乙醇后, RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质,且获得生物活性的RNA。实验材料RNA试剂、试剂盒TELi
Folin酚法的用途和功效
Folin-酚法(Lowry法)最灵敏的蛋白质测定方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。
关于Folin酚法的相关介绍
Folin-酚法(Lowry法)最灵敏的蛋白质测定方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。
概述Folin酚法的实验原理
这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(可订购),逐渐被考马斯亮兰法所取代。 此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在
碱性卵白酶活力测定方法
酶活力是指酶催化某些化学反映的能力。酶活力的巨细可以用在一定条件下它所催化的某一化学反映的速率来表现。测定酶活力现实就是测定被酶所催化的化学反映的速率。酶促反映的速率可以用单元时间内反映底物的淘汰量或产物的增加量来表现,为了敏捷起见,通常是测定单元时间内产物的天生量。由于酶促反映速率可随时间的推移而
LoWry法对可溶性蛋白含量检测原理
LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸,使
猴头菌颗粒的含量测定
多糖对照品溶液的制备 精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖适量,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml含无水葡萄糖100μg)。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml,各加水至2.0ml,分别加入预先用冰水冷却的蒽酮溶液4ml
猴头菌颗粒的含量测定与规格
含量测定 多糖对照品溶液的制备 精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖适量,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml含无水葡萄糖100μg)。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml,各加水至2.0ml,分别加入预先用冰水冷却的蒽
使用紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量分析
目的:建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法:采用Folin酚法,样品经福林试剂显色反应后,紫外可见分光光度计测定其总酚含量。结果:总酚在2.03~8.04μg·mL-1内线性良好,r=0.9997,且平均回收率为102.42%,RSD=2.64%(n=5)。结论:该方法准确,简便,重现性好,专属
紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量
目的:建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法:采用Folin酚法,样品经福林试剂显色反应后,紫外可见分光光度计测定其总酚含量。结果:总酚在2.03~8.04μg·mL-1内线性良好,r=0.9997,且平均回收率为102.42%,RSD=2.64%(n=5)。结论:该方法准确,简便,重现性好,
紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量
目的:建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法:采用Folin酚法,样品经福林试剂显色反应后,紫外可见分光光度计测定其总酚含量。结果:总酚在2.03~8.04μg·mL-1内线性良好,r=0.9997,且平均回收率为102.42%,RSD=2.64%(n=5)。结论:该方法准确,简便,重现性好,专属
紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚含量
目的:建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。 方法:采用Folin酚法,样品经福林试剂显色反应后,紫外可见分光光度计测定其总酚含量。 结果:总酚在2.03~8.04μg·mL-1内线性良好,r=0.9997,且平均回收率为102.42%,RSD=2.64%(n=5)。 结论:该方法准确
盐酸地匹福林的基本性状
本品为白色或类白色结晶性粉末;无臭;有引湿性;与日光或空气接触易变质本品在水中极易溶解,在乙醇中易溶,在乙酸乙酯中极微溶解,在石油醚中几乎不溶熔点本品的熔点(通则0612)为161~166℃,熔距在2℃以内。
盐酸地匹福林的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品约10mg,加氢氧化钠试液10ml使溶解,溶液缓缓呈淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365πm)下观察,呈黄色荧光(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集335图)一致(4)本品显氯化物的
盐酸地匹福林滴眼液的检查方法
pH值应为3.5~5.0(通则0631)。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液取本品,即得。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中含10g的溶液。对照品溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见盐酸地匹福林有关物质项下。限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,其中与
关于盐酸地匹福林滴眼液的简介
盐酸地匹福林滴眼液,适应症为治疗开角型青光眼、高眼压症、色素性青光眼、新生血管性青光眼和手术时止血,以及与麻醉剂合用以延长麻醉时间。也可用于散瞳和患者瞳孔散大的鉴别诊断。对闭角型青光眼虹膜切除后的残余性青光眼有效。对其他类型的继发性开角型青光眼和青光眼睫状体炎综合症也有效。
盐酸地匹福林的鉴别方法
(1)取本品约10mg,加氢氧化钠试液10ml使溶解,溶液缓缓呈淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365πm)下观察,呈黄色荧光。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集335图)一致。(4)本品显氯化物
盐酸地匹福林的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。对照品溶液取盐酸地匹福林对照品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,分别
关于新福林的基本信息介绍
新福林是一种化学药品,临床上用于感染中毒性及过敏性休克、室上性心动过速,防治全身麻醉及腰麻时的低血压、散瞳检查。 配合地塞米松,洁霉素可缓解和治疗鼻炎。 【药物名称】:新福林 【别名】:苯福林;苯肾上腺素;新福林;新交感酚;新辛内弗林,去氧肾上腺素 【用量用法】 肌注:每次5~10mg,1
蛋白质定量检测方法——酚试剂法
取6支试管分别标号,前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,最后一支试管加待测蛋白质溶液,不加标准蛋白溶液,在室温下放置30分钟,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。优点:灵敏度高,对水溶性蛋白质含量的测定很有效。缺点:①费时,要精确控制操作时间;
关于Folin酚法应用试剂的介绍
试剂 (1)试剂甲(A,B): (A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。 (B) 0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。
Folin酚法的实验操作方法
标准曲线测定取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/L)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。再逐管加入
蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法(Lowry法)操作方法
1.标准曲线的测定:取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。
劳里法的概念
中文名称劳里法英文名称Lowry method定 义劳里(O.H.Lowry)于1951年建立的方法,即将蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基与福林酚试剂的呈色反应以及肽键与铜离子的双缩脲反应相结合的蛋白质定量比色法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
植物体内可溶性蛋白质含量的测定:LoWry法(劳里法)
【原理】 LoWry法是双缩脲法(BIureT)和福林酚法(FolIn-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和
关于地匹福林的基本信息介绍
地匹福林(Dipivefrin)是一种化学品,别名:4-(1-羟基-2-甲胺基乙基)-1,2-苯二酚双(2,2-二甲基丙酸)酯,化学式为分子式:C19H29NO5,分子量为351.43700,沸点473.7℃。地匹福林临床上主要用于治疗各型青光眼,控制慢性开角型青光眼的眼内压。 1、基本信息:
盐酸地匹福林的类别及贮藏方法
类别眼科用药贮藏遮光,密封,在干燥处保存。
盐酸地匹福林滴眼液的鉴别方法
(1)取本品约5m1,加氢氧化钠试液2ml,放置数分钟,溶液显淡黄色,将此溶液置紫外光灯(365nm)下观察,显黄色荧光。(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
关于盐酸地匹福林滴眼液的使用禁忌
禁忌:未经手术的闭角型青光眼禁用。甲状腺功能亢进、高血压、冠状动脉供血不全、心律不齐、糖尿病等患者禁用。对本品过敏者禁用。 注意事项:无晶体的病人应用肾上腺素30%出现黄斑水肿。 孕妇及哺乳期妇女用药:由于妊娠期及哺乳期使用本品的安全性尚未确立,孕妇或哺乳期妇女应权衡利弊,在医生指导下方可使