脉冲场凝胶电泳实验
实验概要了解脉冲场凝胶电泳（PFGE）的工作原理，并学习和掌握有关的操作技术。实验原理大分子DNA(一般长度超过20kb，在某些情况下，超过40kb)在电场作用下通过孔径小于分子大小的凝胶时，将会改变无规卷曲的构象，沿电场方向伸直，与电场平行从而才能通过凝胶。此时，大分子通过凝胶的方式相同，迁移率无差别(也称“极限迁移率”)，不能分离。脉冲场凝胶电泳技术解决了这一难题，它应用于分离纯化大小在10～2000kb 之间的DNA 片段。这种电泳是在两个不同方向的电场周期性交替进行的，DNA分子在交替变换方向的电场中作出反应所需的时间显著地依赖于分子大小，DNA 越大，这种构象改变需要的时间越长，重新定向的时间也越长，于是在每个脉冲时间内可用于新方向泳动的时间越少，因而在凝胶中移动越慢。反之，较小的DNA 移动较快，于是不同大小的分子被成功分离。在许多实用的PFGE 方法中，倒......阅读全文
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题，由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进，降低了注入水的波及系数，造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器，可以用于测定硬度、弹性、断裂
琼脂糖凝胶电泳仪凝胶的制备
琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳，广泛用于核酸的研究，为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。琼脂糖凝胶是从琼脂中精制出来的白色胶状多糖，是由1，3连接的β－D吡喃半乳糖和1，4连接的3，6脱水β－D吡喃半乳糖交替而成的中性物质。琼脂糖由于氢键和其它力的作用使
油田聚合物凝胶堵剂的凝胶强度测定
油田出水是目前油田开发中存在的一个普遍问题，由于油藏的非均质性和复杂的油水关系造成注水沿井间的高渗透层或裂缝突进和指进，降低了注入水的波及系数，造成中、低渗透层动用程度较低或根本未动用。寻找适合的堵剂对提高采收率具有一定的现实意义。 质构仪作为一种物性分析仪器，可以用于测定硬度、弹性、断裂强度、拉伸
琼脂糖凝胶电泳，凝胶电泳条带
原理 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有"分子筛"和"电泳"的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网格结构，电泳分子通过时会受到阻力，大分子物质在泳动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于
凝胶渗透色谱GPC/凝胶过滤色谱GFC基础知识
凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography, GPC）是1964年，由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定，而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物（聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开），优点是：保留时间短，
凝胶色谱仪
凝胶色谱属于液相色谱，它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的，多用于高聚物的分析。它以液体做流动相，以多孔固体做固定相，其中孔是有一定尺寸限制的，而且大小不一。它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时，可占据的体积也不同。对流动相分子而言，填料孔的
凝胶色谱的原理
凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.分子筛效应：一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只
凝胶色谱的原理
凝胶色谱,又称为分子排阻色谱,其分离物质的原理为分子筛原理,且多用于分离有机大分子化合物,如蛋白质、多肽、多糖等.分子筛效应：一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时,各分子在柱内同时进行着两种不同的运动,垂直向下的移动和无定向的扩散运动.大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只
凝胶电泳实验
在优化实验条件时，应该同时用含有甘油和不含甘油的凝胶分离PCR产物，并对放射性自显影的结果进行比较。利用这两种凝胶分析同一种样品的预实验结果可以在24h之内获得。一旦实验条件确定下来，特定实验所优选的凝胶类型就可以应用到该基因座的所有样品的分析中。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康
凝胶成像概述（一）
凝胶成像定义 凝胶成像即对dna/rna/蛋白质等凝胶电泳不同染色（如eb、考马氏亮蓝、银染、sybr green）及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。凝胶成像系统的原理样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一
凝胶成像概述（二）
凝胶成像一般操作步骤1．打开凝胶成像系统开关。2．打开电脑，系统自动打开并进入成像软件。3．打开凝胶成像系统前面板，选择使用紫外透射光源或者白光透射光源，将相应光源安放到位。4．将样品放置在透射光源的样品台上。5．在成像操作界面里面选择使用Upper white光源，点击绿色（即时成像）按钮。常见问
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析（gel filtration chromatography）法又称排阻层析或分子筛方法，主要是根据蛋白质的大小和形状，即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖类物质，使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的凝胶过滤
双向凝胶电泳
双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的，原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小，在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处；第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白
凝胶成像仪
凝胶成像主要用于蛋白质、核酸凝胶成像及分析，系统提供白光和紫外光以及蓝光光源进行拍摄凝胶，由系统自带的图像捕捉软件捕捉拍摄图像，然后由系统自带的图像分析软件对拍摄的图像进行分析
凝胶渗透色谱（1）
凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography、GPC)是1964年，由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定，而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物。(聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开）基本原理分离原理凝胶具有化学惰
凝胶渗透色谱（2）
实验部分直接法：在测定淋出液浓度的同时测定其粘度或光散射，从而求出其分子量。间接法：用一组分子量不等的、单分散的试样为标准样品，分别测定它们的淋出体积和分子量，则可确定二者之间的关系。仪器GPC仪的组成：泵系统、（自动）进样系统、凝胶色谱柱、检测系统和数据采集与处理系统。2.1.1.泵系统：包括一个
凝胶渗透色谱现状
进入20世纪80年代以后，由于高效液相色谱技术的发展，微粒（粒径小于lOμm）凝胶的制成、计算机技术在凝胶渗透色谱仪上的匹配和使用，使凝胶渗透色谱的实验操作技术、数据处理、结果的记录打印更趋于仪器化和自动化，从而大大缩短了分析时间。凝胶渗透色谱法进入了高教凝胶渗透色谱发展阶段。凝胶渗透色谱的应用除
SRT凝胶色谱柱
SRT凝胶色谱柱：SRT SEC键合固定相采用ZL的表面修饰技术，通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上，键合一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备得到。工艺采用可控的化学修饰技术，因此能确保色谱柱与色谱柱之间有着可靠的重现性。SRT填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖完全，因此不仅具有优异的稳
凝胶色谱柱操作
1、 溶胀商品凝胶是干燥的颗粒，通常以40~63um的使用zui多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天，如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸，则溶涨时间可以缩短到1~2小时。凝胶的溶涨一定要完全，否则会导致色谱柱的不均匀。热溶涨法还可以杀死凝胶中产生的细菌、脱掉凝胶中的气泡。2、 装柱由于凝胶的
凝胶色谱仪
凝胶色谱属于液相色谱，它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的，多用于高聚物的分析。它以液体做流动相，以多孔固体做固定相，其中孔是有一定尺寸限制的，而且大小不一。它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时，可占据的体积也不同。对流动相分子而言，填料孔的
凝胶过滤层析实验
凝胶过滤层析（gel filtration chromatography）法又称排阻层析或分子筛方法，主要是根据蛋白质的大小和形状，即蛋白质的质量进行分离和纯化。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖类物质，使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。实验方法蛋白质的
凝胶成像系统介绍
随着分子生物学研究逐步普及,凝胶成像系统在国内的需求在不断增长不管是什么用途，凝胶成像系统的组件都是相似的。都有一个拍摄目前进口产品主要有Bio-Rad公司的产品，ChemiDoc XRS系统就是为高分辨率的化学发光和荧光成像用途设计的。该系统的特点包括：1.3兆的超级冷却CCD照相机、一个紧密
如何选择凝胶？（一）
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。测定------分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围
凝胶色谱技术概述
凝胶色谱法凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。一、基本理论
EMSA凝胶迁移（一）
实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术zui初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保
凝胶迁移实验（EMSA）
实验方法原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列
凝胶电泳实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺 双丙烯酰胺储存液过硫酸铵乙醇上样（终止）缓冲液甲酰胺EDTA溴酚蓝二甲苯腈酶和酶缓冲液PCR 产物（放射性）凝胶培养基仪器、耗材 ZapCap 过滤器108 孔深井式梳子色谱纸上样器丙烯酸防护板胶片暗盒凝胶印迹膜盖革计数器凝胶干燥系统胶片S2 型测序仪石蜡封口膜移液管剃须刀片
凝胶成像概述（二）
凝胶成像一般操作步骤 1．打开凝胶成像系统开关。 2．打开电脑，系统自动打开并进入成像软件。 3．打开凝胶成像系统前面板，选择使用紫外透射光源或者白光透射光源，将相应光源安放到位。 4．将样品放置在透射光源的样品台上。 5．在成像操作界面里面选择使用Upper wh
凝胶成像概述（一）
凝胶成像定义 凝胶成像即对dna/rna/蛋白质等凝胶电泳不同染色（如eb、考马氏亮蓝、银染、sybr green）及微孔板、平皿等非化学发光成像检测分析。 凝胶成像系统可以应用于分子量计算,密度扫描,密度定量, PCR定量等生物工程常规研究。 凝胶成像系统的原理 样
凝胶过滤层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 凝胶过滤缓冲液仪器、耗材 布氏漏斗凝胶过滤层析柱分光光度计实验步骤 1. 如果凝胶过滤的介质是干粉，则需在凝胶过滤缓冲液中完全溶胀。2. 在远离过往通道及直接光照的恒温环境，将层折柱垂直安装在稳固的实验室支架上。3. 用一注射器将凝胶过滤缓冲液从柱子的输出管注入柱