微量柱法纯化DNA片段
实验概要目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术,回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。目前待回收的片断主要有酶切片断和各种PCR片断;回收的介质主要有琼脂糖和PAGE;回收的方法主要有树脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮冻冻融回收及透析袋大量回收等,下面分别介绍树脂、微量柱及液氮冻冻融回收技术。本方法具有操作简单的特点,特别适合于PCR片段、酶切片段等的回收。主要试剂PCR片断纯化试剂盒 80%异丙醇 微量柱主要设备离心机 电泳议 电泳槽 取液器 微量真空装置 抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中。2. 离心管在-20℃冷却5-10分钟。3. 将微量柱下套上一Epphendof管,将冷却的胶条装进微量柱中,4℃ 12000rpm离心10分钟。4. 弃微量柱,用酚/氯仿、氯仿抽提Epphendof......阅读全文
预柱和保护柱是什么
预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,保护柱就可以报废了。至于色谱柱的冲洗,
预柱和保护柱是什么
预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,保护柱就可以报废了。至于色谱柱的冲洗,
提高色谱柱柱效的方法
色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标,混合物能否在色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下,色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。 (1)降低移动相的流速
如何保护色谱柱柱效
1.色谱柱断裂 熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许破裂它就会断裂。聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。zui后在薄弱处发生断裂。通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成出现薄弱处。通常锋利的尖或边划管线时会造
影响色谱柱柱效的原因
.色谱柱破裂 熔融石英毛细管柱的聚酰亚胺涂层如有少许破裂它就会断裂,聚酰亚胺涂层保护着脆弱的熔融石英毛细管,柱箱连续地加热和冷却,柱箱风扇的震动,把色谱柱绕在圆形柱架上都会对毛细管造成应力,zui后在很小的弱点处会破裂,聚酰亚胺涂层形成的划痕或磨损处会造成弱点,当利刃或薄片触及毛细管时常会造成
预柱和保护柱是什么
预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,保护柱就可以报废了。至于色谱柱的冲洗,
提高色谱柱柱效的方法
(1)降低移动相的流速,但会使分析时间延长。 (2)减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。 (3)减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。 (4)选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。 (5)适当提高柱温,可降低移
教你如何提高色谱柱柱效
色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标,混合物能否在色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。那么,如何有效地提高色谱柱的柱效呢? 在一定的色谱操作条件下,色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多,或塔
柱色谱和色谱柱的区别
简单的说色谱柱是一种硬件,而柱色谱则是一种技术,柱色谱法,又称层析法,是一种以分配平衡为机理的分配方法。柱色谱概念: 柱色谱是在一根玻璃管或金属管中进行的色谱技术,将吸附剂填充到管中而使之成为柱状,这样的管状柱称为吸附色谱柱。使用吸附色谱柱分离混合物的方法,称为吸附柱色谱。这种方法可以用来
液相色谱柱保护柱选择
在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。来自于色谱系统的污染主要指,HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒,以及流动相系统过滤不完全残留的固体颗粒。来自于样品的污染主要指,未完全溶解的样品或者已完全溶解的样品进入色谱系统中,由于样
预柱和保护柱是什么
预柱和保护柱是不一样的。保护柱位置在柱前进样阀后主要是做样是过滤一下样品的污染物。预柱的位置是在泵后,主要做样是饱和流动相和过滤流动相的做样,现在很少使用预柱。保护柱的损坏有几个方面一、造成样品峰型变坏,这基本是冲洗不好的。二、造成柱效下降,一般造成下降30%,保护柱就可以报废了。至于色谱柱的冲洗,
色谱柱柱压高的问题
1、柱子有没有堵还不好说,因为不同的设备具体copy压力也不一样。压力是纯乙腈
色谱柱,更换新柱的标准
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。色谱工作者常会碰到这样的问题,什么时候该换色谱柱了,色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?确定表明一支色谱柱应该
如何保护色谱柱柱效
1.色谱柱断裂熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许破裂它就会断裂。聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。最后在薄弱处发生断裂。通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成出现薄弱处。通常锋利的尖或边划管线时会造成划痕。色谱柱挂
影响色谱柱柱效的原因
1.色谱柱破裂 熔融石英毛细管柱的聚酰亚胺涂层如有少许破裂它就会断裂,聚酰亚胺涂层保护着脆弱的熔融石英毛细管,柱箱连续地加热和冷却,柱箱风扇的震动,把色谱柱绕在圆形柱架上都会对毛细管造成应力,最后在很小的弱点处会破裂,聚酰亚胺涂层形成的划痕或磨损处会造成弱点,当利刃或薄片触及毛细管时常会造
如何判断色谱柱柱效降低?
判断色谱柱柱效下降可以通过以下几个途径: 1.看峰分离度怎么样,分离度直接关系测试结果准确性,可以判断柱效是知否下降,柱效下降分离度一般会变差。 2.通过谱图峰型的变化,是否有严重前伸和拖尾现象,道峰型是否规则来看,如果峰型很差了,柱效已经下降了,可以及时采用乙腈和专甲醇等溶剂进行修复。
制备色谱柱如何测柱效?
可以选择几种物质,苯,甲苯,萘、蒽等的衍生物上柱,流动相一般用65-80%的甲醇/水,测定后根据保留时间计算塔板数。由于制备色谱的管路死体积一般比较大,很难得到和供应商相同的柱效。建议在制备柱开始使用时在自己的色谱上测一下柱效,然后定期检测柱效进行以进行比较。
微量移液器的应用特点
1. 精准度高。2. 适用液体种类广。3. 操作简单。
微量色谱仪类型
微量色谱仪类型有多种。1、按流动相物理状态可分:微量气相色谱仪和微量液相色谱仪。2、按色谱柱形状可分:填充柱微量色谱仪和毛细管微量色谱仪。3、按结构可分:台式微量色谱仪和落地式微量色谱仪。4、按固定相物理状态可分:微量气液色谱仪、微量气固色谱仪、微量液液色谱仪和微量液固色谱仪。5、按用途可分:生物微
微量移液器的应用范围
多适用于医学实验室、生物技术实验室、食品实验室、药学和化学实验室、环境实验室等。在医学临床实验室主要应用于样品制备阶段,实现精准的液体配比转移。
微量移液器的应用特点
微量移液器是用来量取0.1µl~10ml液体体积的精密仪器,是生物、化学和临床实验等分析过程中样本采集和移取的必备工具。
微量注射泵的结构
注射泵是生命科学研究中常见的用于长时间进行均匀微量注射的仪器,在实验中合理使用微量注射泵可以大大减轻工作人员的劳动强度,同时精确地控制各种试剂的使用量。存在的问题国内外的微量注射泵普遍存在精度不够和成本较高的难点,不同厂商使用的容器互不兼容,导致只能使用同一厂商的注射器。电位计是控制注射精度的核心部
微量移液器的技术特点
1. 精准度高。2. 适用液体种类广。3. 操作简单。
微量移液器的发展历史
1960年,德国人施米茨(Hanns Schmitz)发明了移液器。艾本德(Eppendorf)公司的创始人奈希勒(Heinrich Netheler)继承了ZL权,并于20世纪60年代开始了移液器的商业生产。吉尔森(Warren Gilson)和拉迪(Henry Lardy)共同发明了可调的移液器
微量移液器规范操作流程
1. 微量移液器的选择:根据需求选择相应的微量移液器。通常情况下选择35%~100%范围进行操作,选择这个量程对操作者的操作技巧依赖较少,同时可保证移液的准确性和精度 。2. 量程的调节:遵循由大到小原则,当由大量程调至小量程时,通过调节按钮迅速调至需要量程,在接近理想值时,将微量移液器横放调至预
微量移液器的工作原理
气垫式活塞移液器:内置活塞系统,活塞的移动距离是由调节轮控制螺杆结构实现的,推动按钮带动推动杆使活塞向下移动,排除活塞腔内的气体。松手后,活塞在复位弹簧的作用下恢复原位,从而完成吸液。排液时,再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度,从而实现
关于微量移液器的简介
微量移液器是用来量取0.1µl~10ml液体体积的精密仪器,是生物、化学和临床实验等分析过程中样本采集和移取的必备工具。 1960年,德国人施米茨(Hanns Schmitz)发明了移液器。艾本德(Eppendorf)公司的创始人奈希勒(Heinrich Netheler)继承了专利权,并于2
微量移液器的原理简介
微量移液器是一种在一定容量范围内可随意调节的精密取液装置(俗称枪),基本原理是依靠装置内活塞的上下移动,气活塞的移动距离是由调节轮控制螺杆结构实现的,推动按钮带动推动杆使活塞向下移动,排除活塞腔内的气体。松手后,活塞在复位弹簧的作用下恢复原位,从而完成一次吸液过程。
微量移液器漏气检修步骤
微量移液器是科研和实验室必备的实验设备之一,可分为单道和多道移液器,也可分为手动和电动移液器。很多使用者可能都遇到过移液器漏气的现象,一支移液器价格也不便宜,那么如何查找漏气的办法呢?下面就跟大家一起分享一下。主要分为以下步骤:找出漏气的吸头。如何验证吸头是否漏气,其实很简单,装上吸头后,将吸头插入
微量移液器日常维护方法
1. 定期清洁移液器,用酒精棉擦拭手柄、弹射器及白套筒外部,降低对样品产生污染的可能性。2. 严禁用气垫式活塞移液器吸取强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。在吸取高挥发、高腐蚀液体后,应将整支移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁,并在晾干后安装使用。3. 严禁用移液器吹打混匀液