噬菌体抗体库的富集筛选
实验概要用于噬菌体抗体库富集筛选的抗原至关重要，一般来说，纯化后的可溶性蛋白纯度高，含量大，可直接包被ELISA板，是筛选特异性抗体的最佳选择。在某种情况下，需要获得针对某一特殊蛋白的单克隆抗体，也可以用抗这种蛋白的单克隆抗体捕捉抗原的方法来进行筛选。实验步骤1. 将用于筛选特异性抗体的抗原用0.1mol/L pH值8.6碳酸钠碳酸氢钠溶液做一定量稀释后包被96孔板，一般抗原浓度要求至少25μg/ml，每孔50~60μl，4℃过夜。2. 次日洗去板中未吸附的抗原，用3% BSAPBS或用4%~5%脱脂奶粉PBS于37℃封闭1h 。3. 弃封闭液，在每孔加入50~70μl噬菌体抗体库，37℃孵育2h。4. 弃孔中未结合噬菌体，用TBS/Tween 20(pH值7.5的50mmol/L TrisHCl，150mmol/L氯化钠，0.5% Tween 20)洗液洗每一孔，共洗10~20次，充分洗去非特异性吸附噬菌体。每一次清洗时，......阅读全文
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
噬菌体侵染细菌实验步骤
大致分为四步。1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几乎没有
温和噬菌体的主要应用
基因工程分子生物学研究的重要工具 ，如λ噬菌体 。
细胞化学词汇DNA噬菌体
中文名称：DNA噬菌体英文名称：DNA phage定 义：能感染细菌并在细菌内复制自身的DNA病毒。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
简述细菌噬菌体繁殖特点
1.毒性噬菌体 指在宿主菌体内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。毒性噬菌体的增殖方式是复制，其增殖过程经历吸附穿入、生物合成和成熟释放3个阶段。 进入菌细胞内的噬菌体核酸首先经早期转录产生早期蛋白质，并复制子代核酸，再进行晚期转录产生噬菌体的结构蛋白。子代噬菌体达到一定数量时，由
温和噬菌体的感染过程
这类噬菌体感染它的宿主细菌后，可把它的DNA整合到细菌染色体中，随着细菌染色体的复制而同时复制。这时不能用任何方法在细菌体内检出噬菌体颗粒的存在，细菌继续生存并进行分裂繁殖。这种携带噬菌体DNA的细菌叫溶原性细菌。在一般外界条件下，溶原性细菌只有极少数发生裂解性反应。但若环境改变，如在紫外线下，激发
噬菌体展示技术的原理
噬菌体展示技术是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下，使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达，融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性，以利于靶分子的
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
温和噬菌体的存在状态
温和噬菌体可有三种存在状态：①游离的具感染性的病毒粒子。②原噬菌体：当温和噬菌体侵入其宿主细胞后，前者的核酸附着或整合在细菌染色体上，并与之一道复制，这种处于整合态的噬菌体，称为前噬菌体( Prophage)。 ③营养噬菌体：在宿主细胞内指导特定的病毒核酸和蛋白质合成。
什么是噬菌体肽文库？
中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定 义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体，构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
噬菌体的分离和鉴定
部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤：1、噬菌体分离(1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内，放入37 ℃温箱培养24h。(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1
噬菌体效价的测定
实验方法原理 噬菌体的效价就是 1 ml 培养液中所含活噬菌体的数量。效价测定的方法，一般应用双层琼脂平板法。由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，噬菌体产生肉眼可见的噬菌斑，因此，能进行噬菌体的计数，但因噬菌斑计数方法其实际效率难以接近 100％（—般偏低，因为有少数活噬菌体可能未引起感
用人血清进行噬菌体ElISA
用人血清进行噬菌体ElISA [器材和试剂] ● 包被缓冲液 ● T ● T[，1％TritonX—100，3％ A(Sigma)] ● 兔抗人Fc—特异性IgG(Pierce)：用包 被缓冲液稀释为5．0ug/ml① ● HRP标记的抗噬
常见的温和噬菌体介绍
温和噬菌体的种类很多，常见的有大肠杆菌（E．coli）的λ、Mu-I、P1和P2噬菌体等。
关于细菌噬菌体的简介
噬菌体（bacteriophage, phage）是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。二十世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现 [3] 。作为病毒的一种，噬菌体具有病毒的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。可视为
检测噬菌体存在的方法
1、将细菌培养液涂平板，如果有噬菌斑说明有噬菌体。如果提取噬菌体的核酸物质，应该大量培养噬菌体，然后离心去除细菌碎片，转移上清后用氯仿-乙醇法即可。2、有的噬菌体可能是溶源性的，已经整合到细菌染色体上了，可以试试不同的条件把它诱导出来，像是UV照射，高温之类的。3、如果噬菌体的背景清楚的话，可以设计
关于λ噬菌体的特点介绍
λ噬菌体是长尾噬菌体科的一种温和噬菌体。λ噬菌体是双链DNA噬菌体，有直径55nm的二十面体头部，末端有细长尾丝的非收缩尾。DNA是线性分子，有黏性末端即单链延伸12个核苷酸，故感染后线性基因组可立即环化。 [2] λ DNA有一个噬菌体结合位点，可与细菌结合位点形成碱基配对，细菌结合位点位于
噬菌体展示技术的原理
噬菌体展示技术其基本原理是：将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合后，以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性，展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体，就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示库。当用一个蛋白质去筛查一个噬
PEG沉淀噬菌体的原理
PEG能够沉淀蛋白质，而噬菌体（包括病毒），外壳都含蛋白。所以利用PEG沉淀的功能，将噬菌体颗粒从溶液中沉淀下来，从而达到富集噬菌体的作用。PEG沉淀一般与PEG聚合程度，温度，浓度，有关。PEG沉淀的原理有几个假说，类似于盐析原理，但不必细追究了。
噬菌体侵染细菌的实验
噬菌体是寄生在细菌细胞中的病毒.一个典型的噬菌体的生活周期,可以分为3个阶段感染阶段,增殖阶段和成熟阶段.有关的主要内容在课本上已经介绍过了,这里再稍加详述如下.感染阶段 噬菌体侵染寄主细胞的第一步是"吸附",即噬菌体的尾部附着在细菌的细胞壁上,然后进行"侵入.先通过溶菌酶的作用在细菌的细胞壁上
噬菌体展示技术的定义
噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白基因与噬菌体特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术。该技术实现了表型与基因型的统一。随着噬菌体展示技术的进一步发展，其优越性被越来越多的实验室所认识，使得该技术的使用范围不断扩展，也使该技术得以不断的完善和发展。
噬菌体克隆的纯化实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖氯仿SMMgSO4仪器、耗材 培养箱牙签硝酸纤维素膜实验步骤 1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%顶层琼脂糖，放置10 min。 2. 通过放射自显影胶片上的杂交斑点确定阳性噬斑在原平板上的位置，用牙签轻轻插
概述噬菌体的基因重组
历史：1936年F. M. Burnet发表了噬菌体能产生突变体，其噬菌斑的外形和野生型的有明显区别，可惜的未能引起重视，以致噬菌体遗传学延迟了十年才得以建立。 1946年第11届冷泉港学术讨论会上，在宣布一基因一酶学说的胜利，及Ledernerg、Tatum细菌杂交实验报告的同时，Hersh
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
噬菌体中和试验的特点
中文名称噬菌体中和试验英文名称bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定 义一种检测低水平抗噬菌体抗体的敏感试验。即将噬菌体与特异性抗体共温育，以抑制该噬菌体感染宿主，通过观察噬菌斑数量变化，可对中和作用进行定量。应用学
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
噬菌体文库的扩增实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 MgSO4麦芽糖琼脂糖氯仿DMSOSM仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅实验步骤 1. 制备铺平板菌（1）2.5 ml 新鲜过夜培养的宿主菌液接种于250 ml 含0.2%麦芽糖和10 mmol/l MgSO4的LB培养液中。（2）在37℃恒温摇床剧烈摇荡2~4 h，
细菌噬菌体细菌防御方法
细菌防御噬菌体的主要方法是合成能够降解外来DNA的酶。这些酶被称为限制性内切酶，它们能够剪切噬菌体注入细菌细胞的病毒DNA。细菌还含有另一个防御系统，这一系统利用CRISPR序列来保留其过去曾经遇到过的病毒的基因组片段，从而使得它们能够通过RNA干扰的方式来阻断病毒的复制。这种遗传系统为细菌提供
噬菌体的发展历史简介
1915年，弗德里克· 特沃特（Frederick W.Twort）担任伦敦布朗研究所所长。特沃特在研究中力图寻找用于天花疫苗的痘苗病毒（vaccina virus）的变异株（variant ) ，这种变异株可能在活细胞外介质中复制。他在一项试验中将一部分天花疫苗接种给一个含营养琼脂的培养盘。虽
gⅥcDNA融合噬菌体ELISA
gⅥ-cDNA融合噬菌体ELISA [器材和试剂] 通用设备及试剂以及以下的设备和试剂： ● 链霉素包被的微量浓度测定板(Pierce) ● T和 2mol/L ● 生物素抗原选择出的(BAS)噬菌体和(或)免疫亲和选择出的(1AS)噬菌体