噬菌体抗体库的菌落筛选法
实验概要本实验介绍了噬菌体抗体库的菌落筛选操作流程。实验步骤1. 将每轮筛选洗脱的噬菌体用来感染新鲜的XLIBlu菌，以10μl、20μl等不同量菌液涂于LB氨苄青霉素平皿，37℃ 4~5h。2. 事先将硝酸纤维素膜在5mmol/L的IPTG溶液中浸泡10min，在超净台中晾干后，铺在上述涂有细菌的平皿中，注意膜面与平皿中培养基界面应无气泡。3. 置30℃过夜培养，一般约15~16h。4. 作好标记，轻轻地将硝酸纤维素膜揭开，用氯仿熏蒸固定15min。5. 将膜置于溶菌酶缓冲液中(50mmol/L Tris pH值8.0，150mmol/L NaCl，5mmol/L MgCl2，BSA 3g，溶菌酶40mg，100U DNAase)，每张膜用20~25ml缓冲液，置平皿于小型摇床中，室温阻断1h。6. 换上述新鲜阻断缓冲液，室温反应1h。7. 对硝酸纤维素膜进行免疫酶染，方法如常规方法，根据实验需要可选择以下几种策略： ......阅读全文
什么是噬菌体展示技术？
噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白基因与噬菌体特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术。该技术实现了表型与基因型的统一。随着噬菌体展示技术的进一步发展，其优越性被越来越多的实验室所认识，使得该技术的使用范围不断扩展，也使该技术得以不断的完善和发展。
细菌噬菌体细菌防御方法
细菌防御噬菌体的主要方法是合成能够降解外来DNA的酶。这些酶被称为限制性内切酶，它们能够剪切噬菌体注入细菌细胞的病毒DNA。细菌还含有另一个防御系统，这一系统利用CRISPR序列来保留其过去曾经遇到过的病毒的基因组片段，从而使得它们能够通过RNA干扰的方式来阻断病毒的复制。这种遗传系统为细菌提供
噬菌体克隆的纯化实验
噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称，作为病毒的一种，噬菌体具有病毒特有的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已知的噬菌体都是在细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身
Nature捕捉噬菌体感染特写
科学家们发现了，某种类型的病毒在感染过程中会暂时形成一种管状结构传递它的DNA，而在完成任务后则会将这一管状结构溶解。这项研究工作发表在12月15日的《自然》(Nature)杂志上。 在新文章中，研究人员揭示了phiX174病毒攻击大肠杆菌的机制。由于phiX174病毒能够感染细菌，它实质
噬菌体文库的扩增实验
文库一旦包装就应该尽快进行扩增，它可以大大增加文库的拷贝数，但在扩增时由于克隆的生长速率不同，文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。文库一旦包装就应该尽快进行扩增，它可以大大增加文库的拷贝数，但
噬菌体侵染实验的原理
原理：T2噬菌体侵染细菌后，在自身遗传物质的控制下，利用细菌体内的物质合成T2噬菌体自身的组成成分，从而进行大量繁殖。
噬菌体展示技术的原理
噬菌体展示技术其基本原理是：将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合后，以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性，展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体，就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示库。当用一个蛋白质去筛查一个噬
噬菌体侵染细菌的实验
噬菌体是寄生在细菌细胞中的病毒.一个典型的噬菌体的生活周期,可以分为3个阶段感染阶段,增殖阶段和成熟阶段.有关的主要内容在课本上已经介绍过了,这里再稍加详述如下.感染阶段 噬菌体侵染寄主细胞的第一步是"吸附",即噬菌体的尾部附着在细菌的细胞壁上,然后进行"侵入.先通过溶菌酶的作用在细菌的细胞壁上
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
噬菌体的分离和鉴定
部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤：1、噬菌体分离(1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内，放入37 ℃温箱培养24h。(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1
温和噬菌体的主要应用
基因工程分子生物学研究的重要工具 ，如λ噬菌体 。
噬菌体侵染细菌实验步骤
大致分为四步。1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几乎没有
温和噬菌体的影响因素
决定噬菌体状态的因素很多，除细菌与噬菌体本身的遗传特性外，其中最重要的包括温度、宿主生理状况、菌种及每个细菌所接受的噬菌体数目等。例如用紫外线照射或丝裂霉素C处理，或提高温度，都可诱发溶源性细菌中的原噬菌体转变成烈性噬菌体而导致宿主细胞裂解。但是，从分子水平来看，是因为各种外因，引起了噬菌体CI蛋白
关于λ噬菌体的基本介绍
λ噬菌体是一种温和噬菌体，它通过尾管将基因组DNA注入大肠杆菌，其蛋白质外壳留在菌外。进入细菌后的DNA以两端12bp互补单链黏性末端连成双链环状，能以两种不同的方式增殖。 1951年J. Lederberg的妻子Esther Lederberg证明了J. Lederberg和Tatum用来杂
温和噬菌体的存在状态
温和噬菌体可有三种存在状态：①游离的具感染性的病毒粒子。②原噬菌体：当温和噬菌体侵入其宿主细胞后，前者的核酸附着或整合在细菌染色体上，并与之一道复制，这种处于整合态的噬菌体，称为前噬菌体( Prophage)。 ③营养噬菌体：在宿主细胞内指导特定的病毒核酸和蛋白质合成。
常见的温和噬菌体介绍
温和噬菌体的种类很多，常见的有大肠杆菌（E．coli）的λ、Mu-I、P1和P2噬菌体等。
温和噬菌体的感染过程
这类噬菌体感染它的宿主细菌后，可把它的DNA整合到细菌染色体中，随着细菌染色体的复制而同时复制。这时不能用任何方法在细菌体内检出噬菌体颗粒的存在，细菌继续生存并进行分裂繁殖。这种携带噬菌体DNA的细菌叫溶原性细菌。在一般外界条件下，溶原性细菌只有极少数发生裂解性反应。但若环境改变，如在紫外线下，激发
关于细菌噬菌体的简介
噬菌体（bacteriophage, phage）是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。二十世纪初在葡萄球菌和志贺菌中首先发现 [3] 。作为病毒的一种，噬菌体具有病毒的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。可视为
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
简述细菌噬菌体繁殖特点
1.毒性噬菌体 指在宿主菌体内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。毒性噬菌体的增殖方式是复制，其增殖过程经历吸附穿入、生物合成和成熟释放3个阶段。 进入菌细胞内的噬菌体核酸首先经早期转录产生早期蛋白质，并复制子代核酸，再进行晚期转录产生噬菌体的结构蛋白。子代噬菌体达到一定数量时，由
温和噬菌体的治愈现象
溶原状态通常十分稳定，能经历许多代。但在某些条件如紫外线、X线、致癌剂、突变剂等作用下，可中断溶原状态而进入溶菌性周期，这称为前噬菌体的诱导与切离（excision），发生率为10-2-10-5。极少数溶源性细菌中的前噬菌体离开细菌基因组后，不进入溶菌性周期，这个现象被形象地称之为“治愈”。
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
血清学筛选噬菌体
1. 准备 NZY agar plates（至少用前 24 小时倒好） ，用前在37℃培养箱中烘烤1-2 小时以去除水滴。2. 将过夜培养的 XL1-blueMRF' 细菌 2000 转/ 分，离心10 分钟，将细菌溶解在10mMMgSO4 中，调整细菌浓度为 OD600=0.5。3. 融化
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
简述细菌噬菌体的应用
作为分子生物学研究的试验工具 噬菌体是遗传调控、复制、转录与翻译等方面的生物学基础研究和基因工程中的重要材料或工具。遗传学中的转导作用就是以噬菌体作为媒介，在2株细菌间传递遗传物质。 用于细菌的鉴定和分型 噬菌体只能侵染相应的细菌，具有高度的特异性，可用于细菌鉴定。同时，噬菌体具有型的特异
噬菌体的发展历史简介
1915年，弗德里克· 特沃特（Frederick W.Twort）担任伦敦布朗研究所所长。特沃特在研究中力图寻找用于天花疫苗的痘苗病毒（vaccina virus）的变异株（variant ) ，这种变异株可能在活细胞外介质中复制。他在一项试验中将一部分天花疫苗接种给一个含营养琼脂的培养盘。虽
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤，分别是：1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌，再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质，s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心，分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35，而沉淀中几
噬菌体裂菌的原理
噬菌体吸附在目标细胞表面，破坏其膜结构，使细胞裂解死亡。（噬菌体是病毒，无细胞结构。）
关于λ噬菌体的特点介绍
λ噬菌体是长尾噬菌体科的一种温和噬菌体。λ噬菌体是双链DNA噬菌体，有直径55nm的二十面体头部，末端有细长尾丝的非收缩尾。DNA是线性分子，有黏性末端即单链延伸12个核苷酸，故感染后线性基因组可立即环化。 [2] λ DNA有一个噬菌体结合位点，可与细菌结合位点形成碱基配对，细菌结合位点位于