离子交换层析纯化超氧化物歧化酶

实验概要本实验利用超氧化物歧化酶的解离性质,在一定缓冲液条件下与离子交换纤维素吸附和解吸的能力不同于溶液中杂蛋白,进而除去杂蛋白。主要试剂1. DE-322. 缓冲液Ⅰ:2.5mmol/L K2HPO4-KH2PO4(pH7.6)3. 缓冲液Ⅱ:200mmol/L K2HPO4-KH2PO4(pH7.6)主要设备1. 层析柱(2.5cm × 25cm)2. 部分收集器3. 梯度洗脱仪4. 紫外分光光度计5. 试管、透析袋实验步骤1. DEAE-纤维素的预处理 1) 称取5gDE-32,撒在盛有75ml 0.5mol/L HCl的烧杯中,室温放置30min,不时轻轻搅拌; 2) 将糊状物移入3号砂芯漏斗中,用蒸馏水淋洗.如此重复,每加一次去离子水,浸泡一段时间,再进行抽滤,至洗涤液pH等于4即可(pH试纸试); 3) 将糊状物移入烧杯中,加入75ml 0.5m......阅读全文

离子交换色谱(一)

实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因(CM、SP、Q、DEAE等)键合于一定的惰性载体(纤维素、交联葡聚糖,交联琼脂糖等)之上,并以此作为固定相,依据样品所带电荷的不同,从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病

离子交换色谱概述

  离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合,这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的,在改变pH 或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时,离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同,

高效离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量

  高效离子交换色谱仪离子交换树脂的交换容量是指离子交换树脂能提供交换离子的量,是表征离子交换树脂活性基团数量或交换能力的重要参数。一般情况下,交联度越低,活性基团数量越多,交换容量越大。通常以每毫克或每毫升树脂中含有可解离基团的毫克当量数(meq/mg或meq/mL)表示。一、理论交换容量:   

高效离子交换色谱仪凝胶型离子交换树脂特点

高效离子交换色谱仪凝胶型离子交换树脂由苯乙烯或丙烯酸与交联剂二乙烯苯聚合而成,适用于无机小分子的分离。一、凝胶型树脂呈透明或半透明状,吸水后形成微细的孔隙。均孔型树脂主要是凝胶型阴离子交换树脂,孔径均匀,交换容量大,机械强度高。二、凝胶型树脂水化后处在溶胀状态,交联链之间的距离拉长,形成2~3nm空

高效离子交换色谱仪离子交换树脂的基本结构

       高效离子交换色谱仪离子交换树脂由固体载体、活性基团和可交换离子组成。一、固体载体:        为不溶性的三维空间的高分子网状骨架,具有良好的亲水性、水不溶性、较好的化学稳定性和连接较多的活性基团。        常用的载体:  1、化学合成载体:如聚苯乙烯树脂等。  2、天然材料制

高效离子交换色谱仪弱碱性阴离子交换树脂

高效离子交换色谱仪弱碱性阴离子交换树脂是以叔胺基、仲胺基和伯胺基为交换基团的离子交换树脂。一、特点:弱碱性基团在水中解离程度很小,仅在中性和酸性介质中才显示离子交换功能,即交换容量受溶液pH影响较大,pH值越小,离子交换能力越大。弱碱性基团与OHˉ结合力很强,易再生为羟型且耗碱量少。二、应用:常用3

离子交换色谱仪弱碱性阴离子交换树脂介绍

离子交换色谱仪弱碱性阴离子交换树脂是以叔胺基、仲胺基和伯胺基为交换基团的离子交换树脂。一、特点:弱碱性基团在水中解离程度很小,仅在中性和酸性介质中才显示离子交换功能,即交换容量受溶液pH影响较大,pH值越小,离子交换能力越大。弱碱性基团与OHˉ结合力很强,易再生为羟型且耗碱量少。二、应用:常用330

离子交换色谱仪离子交换树脂按骨架结构分类

离子交换色谱仪离子交换树脂按骨架结构可为凝胶型离子交换树脂和大孔型离子交换树脂。一、凝胶型离子交换树脂:由苯乙烯或丙烯酸与交联剂二乙烯苯聚合而成。1、特点:(1)凝胶型树脂呈透明或半透明状,吸水后形成微细的孔隙。 均孔型树脂主要是凝胶型阴离子交换树脂,孔径均匀,交换容量大,机械强度高。(2)凝胶型

离子交换色谱仪离子交换剂的基本性质

离子交换色谱仪离子交换剂又称离子交换介质,通常是一种不溶性的高分子化合物,有树脂、纤维素、葡聚糖和琼脂糖等。离子交换剂的基本性质如下:一、含可交换离子。二、洗脱的可能性取决于交换反应的平衡常数。三、吸附的蛋白质可以通过改变pH值,使蛋白质分子电性发生改变而洗脱下来。四、不同蛋白质形成的离子键数目不同

离子交换色谱仪离子交换树脂按基质结构分类

离子交换色谱仪离子交换树脂由基质、活性基团和可交换离子(反离子)组成,按基质结构可分为凝胶型离子交换树脂和大孔型离子交换树脂。合成离子交换树脂时,通过高分子化学加聚反应先合成基质,然后在基质上引入功能基团。若合成过程中加入致孔剂,可得大孔型离子交换树脂,否则为凝胶型离子交换树脂。一、凝胶型离子交换树

离子交换色谱仪强酸性阳离子交换树脂

离子交换色谱仪强酸性阳离子交换树脂一般是以磺酸基(-SO3H)为活性基团的离子交换树脂。含磺酸基的强酸性阳离子交换树脂是以苯乙烯为母体,以二乙烯苯为交联剂共聚后再经磺化引入磺酸基制成的。常用R-SO3H表示,其中R表示树脂的骨架。一、特点:强酸性树脂化学性质稳定,耐强酸、强碱、氧化剂和还原剂,不溶于

影响离子交换色谱仪离子交换速度的因素

影响离子交换色谱仪离子交换速度的因素有树脂颗粒大小、树脂交联度、离子化合价、离子大小、溶液浓度、温度和搅拌速度等。一、树脂颗粒大小:树脂颗粒越小,交换速度越快。二、树脂交联度:树脂交联度越小,交换速度越快。三、离子化合价:离子化合价越高,交换速度越快。四、离子大小:离子越小,交换速度越快。五、溶液浓

离子交换剂的分类和常用离子交换剂功能介绍

离子交换剂分为无机质和有机质两类。无机质主要是沸石,有机质有磺化煤和离子交换树脂。沸石有天然沸石和合成沸石。天然沸石是最早应用的无机离子交换剂,是含有水的钠、钙以及钡、锶、钾等硅铝酸的盐类。色浅,具玻璃光泽,是阳离子交换剂。除天然产品外,也有人工制成的合成沸石。它的交换容量低,在酸中不稳定,不能作氢

怎么判断离子交换膜是阳还是阴离子交换膜

离子交换膜的选择要根据问题的目的判断,如该题由铬酸钾溶液电解制重铬酸钾,阳极水电离出来的氢氧根放电,然后氢离子与铬酸根反应生成重铬酸根,钾离子有剩余,阴极氢离子放电,氢氧根有剩余,根据电荷守恒,阳极剩余的钾离子需通过阳离子交换膜由阳极移向阴极,选阳离子交换膜。

离子交换树脂基体组成

  离子交换树脂的基体主要有苯乙烯和丙烯酸(酯)两大类,它们分别与交联剂二乙烯苯产生聚合反应,形成具有长分子主链及交联横链的网络骨架结构的聚合物。苯乙烯系树脂是先使用的,丙烯酸系树脂则用得较后。  这两类树脂的吸附性能都很好,但有不同特点。丙烯酸系树脂能交换吸附大多数离子型色素,脱色容量大,而且吸附

分离方法之离子交换

离子交换这是以离子交换树脂上的可交换离子与液相中离子间发生交换为基础的分离方法。离子交换树脂是一种具有网状结构和可电离的活性基团的难溶性高分子电解质,可分为阳离子交换树脂、阴离子交换树脂、两性离子交换树脂、螯合树脂和氧化还原树脂等。

离子交换柱的概念

离子交换柱是指用来进行离子交换反应的柱状压力容器,是管柱法离子交换的交换设备。在实验室、工业中常被使用。按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种,在使用范围上可分为实验室用离子交换柱、工业用离子交换柱。

离子交换剂是什么?

离子交换剂指的是含有若干离子基团的不溶性高分子物质,是通过在不溶性高分子物质(母体) 上引入若干可解离基团(活性基团) 而制成。根据活性基团的性质不同,离子剂可分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。根据母体的不同,离子交换剂可分为离子交换树脂、离子交换纤维素和离子交换凝胶等。

离子交换柱的概念

离子交换柱是指用来进行离子交换反应的柱状压力容器,是管柱法离子交换的交换设备。采用圆筒形交换柱,溶液从柱的一端通入,与柱内呈密实状态的固定离子交换树脂层或流动状态离子交换树脂床充分接触,进行离子交换。若交换后的溶液已达到预定要求,或离子交换树脂已呈“饱和状态”,就从生产线上切断柱交换,在同一柱中或其

离子交换色谱的应用

  离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离,在生物化学领域得到了广泛的应用。

离子交换柱的分类

  离子交换柱(混床)的分类:混床按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种。  1、体外再生混床适合小流量、对环保有严格要求的企业。但由于体外再生式混床配套设备多,操作复杂,现在已很少使用。  2、体内再生混床和阴树脂外移再生混床适合大流量,有专门的水处理操作人员及废水处

离子交换法

  离子交换法是根据发酵产物的酸碱度、极性和分子大小而进行的分离纯化技术。目前,常用的离子交换剂是离子交换树脂,它上面有许多孔隙。离子交换树脂可分为两个组成部分:一部分是不能移动的高分子基团,构成了树脂的骨架;另一部分是可移动的离子,构成了树脂的活性基团,离子能够在骨架中进出。大多数发酵产物都具有酸

离子交换柱的分类

混床按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种。体外再生混床:适合小流量、对环保有严格要求的企业。但由于体外再生式混床配套设备多,操作复杂,已很少使用。体内再生混床:适合大流量,有专门的水处理操作人员及废水处理的场合。体内再生混床在运行及整个再生过程均在混床内进行,再生时树

什么是离子交换树脂?

离子交换树脂,是带有官能团(有交换离子的活性基团)、具有网状结构、不溶性的高分子化合物。通常是球形颗粒物。离子交换树脂的全名称由分类名称、骨架(或基因)名称、基本名称组成。孔隙结构分为凝胶型和大孔型两种,凡具有物理孔结构的称大孔型树脂,在全名称前加“大孔”。分类属酸性的应在名称前加“阳”,分类属碱性

离子交换膜的作用

离子交换膜可装配成电渗析器而用于苦咸水的淡化和盐溶液的浓缩。电渗析装置的淡化程度可达一次蒸馏水纯度。也可应用于甘油、聚乙二醇的除盐,分离各种离子与放射性元素、同位素,分级分离氨基酸等。此外,在有机和无机化合物的纯化、原子能工业中放射性废液的处理与核燃料的制备,以及燃料电池隔膜与离子选择性电极中,也都

离子交换层析简要概述

  离子交换层析(IEX)基于特定pH下的净电荷差异分离生物分子。蛋白电荷取决于可电离氨基酸侧链基团的数量和类型。每个蛋白具有等电点(pI),即负电荷和正电荷的总数为零的pH。在低于蛋白pI的缓冲溶液中,蛋白带正电并将结合阳离子交换树脂的带负电荷的官能团。在高于蛋白pI的缓冲液中,蛋白是带负电荷的,

离子交换树脂的性质

 1)多孔性 树脂为疏松的,多孔的网络物质,而活性基团一般都处以树脂网孔内,外来离子必须进入网孔内才能进行离子交换。   2)不溶性 树脂在水中及稀酸、稀碱和一般有机溶剂中都不溶解,以维持其立体网状结构。   3)稳定性 离子交换树脂具有强稳定的化学性质,母体本身不与酸、碱起作用。例如强酸型阳离

离子交换色谱的原理

  离子交换是利用一种不溶性高分子化合物,它的分子中具有解离性基团(交换基),在水溶液中能与溶液中的其他阳离子或阴离子起交换作用。此种交换反应都是可逆的,一般也都是遵循化学平衡的规律。虽然交换反应都是平衡反应,但在色谱柱上进行时,由于连续添加新的交换溶液,平衡不断按正反应方向进行,直至完全,因此可以

离子交换色谱的应用

离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。

离子交换技术的应用

EDI技术在国外广泛的应用有十几年的时间,大多用于制药行业、微电子行业、发电工业和实验室。在表面清洗、表面涂装、电解工业和化工工业的应用也日趋广泛。在我国应用时间只有2-3年,主要用于医药和微电子工业的超纯水的处理,而在发电行业化学水处理系统中的应用刚刚兴起。