离子交换色谱概述
离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法，其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合，这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的，在改变pH 或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时，离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同，其与离子交换剂的结合能力也不同，所以被洗脱到溶液中的顺序也不同，从而被分离出来。 离子交换剂是由不溶于水的网状结构高分子聚合物骨架构成，骨架上有许多共价结合的带电基团，如果侧链是带正电基团，就可与带负离子相结合，称为阴离子交换剂，吸附带负电蛋白质。如果侧链是带负电的基团，则称为阳离子交换剂。强离子交换树脂在宽pH 范围内保持离子化，而弱离子交换树脂只在窄pH 值内离子化。......阅读全文
离子交换色谱概述
离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法，其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合，这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的，在改变pH 或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时，离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同，
离子交换色谱仪概述
20世纪40年代初，离子交换色谱仪用于稀土元素和裂变产物的分离，对原子能工业的发展起了重要作用。近年来随着高效液相色谱仪技术的飞速发展和各种新型离子交换材料的出现，离子交换色谱仪获得了很大发展。一、基本原理：组分在离子交换色谱仪固定相上发生反复离子交换反应，组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径
离子交换色谱仪概述
20世纪40年代初，离子交换色谱仪用于稀土元素和裂变产物的分离，对原子能工业的发展起了重要作用。近年来随着液相色谱仪技术的飞速发展和各种新型离子交换材料的出现，离子交换色谱仪获得了很大发展。一、基本原理：组分在离子交换色谱仪固定相上发生反复离子交换反应，组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电
抑制型离子交换色谱仪概述
抑制型离子交换色谱仪是由离子交换色谱仪派生出来的一种分离技术。由于离子交换色谱仪在分析无机离子时受到限制，例如对于不能采用紫外检测器的样品离子，若采用电导检测器，由于样品离子的电导信号被强电解质流动相的高背景电导信号掩没而无法检测。为此，在离子交换色谱仪的分离柱后加一根抑制柱，抑制柱中装填与分离柱电
离子交换键合相色谱仪概述
离子交换键合相是在化学键合的有机硅烷分子中引入离子交换基团而制成的固定相，离子交换键合相色谱仪是以离子交换键合相作固定相的液相色谱仪。一、分离机制：离子交换键合相色谱中，样品离子和固定相基团之间存在相互作用，不同样品离子的作用大小不同。在样品离子随流动相通过色谱柱的过程中，流动相中的离子与样品中的
离子交换键合相色谱仪流动相概述
离子交换键合相色谱仪流动相多为一定pH值的缓冲液，有机成分作改性剂。一、溶质保留机理：兼有离子交换和吸附双重机理。二、影响溶质保留值的因素： 1、流动相的pH值：（1）弱酸和弱碱的保留值与洗脱液的pH值有关。解离并参加离子交换而被分离。不解离，不参加离子交换，以分子形式几乎无保留地通过色谱柱。流动
离子交换色谱
实验方法原理离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作为固定相，依据样品所带电荷的不同，从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病毒
离子交换色谱
洗脱方式的选择,离子交换色谱洗脱方式有三种：一是改变缓冲液pH，使蛋白质从吸附状态变为解吸附状态。如在阴离子交换色谱中，通过降低流动相pH使吸附在柱子上的带负电荷的蛋白质带正电，从而达到解吸附，在阳离子交换色谱中则是通过升高流动相pH的方法达到解吸附；二是增加缓冲液的离子强度，将吸附强的分子从离子交
离子交换色谱
离子交换色谱 实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作
离子交换色谱仪的固定相和流动相概述
离子交换色谱仪以离子交换树脂为固定相，以无机酸或无机碱的水溶液为流动相，各种离子根据它们与树脂上的交换基团的交换能力不同而得到分离。一、固定相：离子交换树脂固定相上具有固定离子基团和可交换的离子基团，当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆交换。1、按结构
离子交换层析的概述
离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。 离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下，蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基
离子交换层析简要概述
离子交换层析（IEX）基于特定pH下的净电荷差异分离生物分子。蛋白电荷取决于可电离氨基酸侧链基团的数量和类型。每个蛋白具有等电点（pI），即负电荷和正电荷的总数为零的pH。在低于蛋白pI的缓冲溶液中，蛋白带正电并将结合阳离子交换树脂的带负电荷的官能团。在高于蛋白pI的缓冲液中，蛋白是带负电荷的，
高效离子交换色谱
应用离子交换的原理，采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子，这在离子色谱中应用最广泛，其主要填料类型为有机离子交换树脂，以苯乙烯二乙烯苯共聚体为骨架，在苯环上引入磺酸基，形成强酸型阳离子交换树脂，引入叔胺基而成季胺型强碱性阴离子交换树脂，此交换树脂具有大孔或薄壳型或多孔表面层型的物理结构，以便于
离子交换色谱（二）
其他 一、离子交换剂的选择 1. 剂型的选择 在决定选择离子交换剂的类别之前，先要了解所研究的生物大分子保持生物活性和可溶解性的pH范围，然后根据其等电点以及其在上述pH范围内的电泳行为观察大分子的带电情况，再据此选择合适的离子交换剂。具体方法是；在流动相pH条件下进行电泳，向阳极泳动的蛋白质，可
离子交换色谱（一）
实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作为固定相，依据样品所带电荷的不同，从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病
离子交换色谱仪离子交换介质
离子交换色谱仪离子交换介质由基质、活性基团和可交换离子组成，按基质的组成和性质可分为疏水性离子交换剂（树脂）和亲水性离子交换剂。一、疏水性离子交换剂（树脂）：疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物，在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的
离子交换纯水机概述
离子交换纯水机是通过离子交换的方法制取纯水、高纯水的装置。离子交换是一种传统的、工艺成熟的脱盐处理设备，其原理是在一定条件下，依靠离子交换剂（树脂）所具有的某种离子和预处理水中同电性的离子相互交换而达到软化、除碱、除盐等功能。用于深度脱盐处理，产水电阻率动态可达到18MΩ·cm。 自来水通
离子交换层析的基本概述
离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂；而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点，当蛋白质处于不同的pH条件下，其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后
阴离子交换膜的概述
阴离子交换膜的本质是一种碱性电解质，对阴离子具有选择透过性作用，因此还被称为离子选择透过性膜。一般以-NH3+、-NR2H+或者-PR3+等阳离子作为活性交换基团，并且在阴极产生OH-作为载流子，经过阴离子交换膜的选择透过性作用移动到阳极。阴离子交换膜具有非常广泛的应用，它是分离装置、提纯装置以及电
概述离子交换层析的洗脱
离子交换层析的洗脱会受到线性或分步盐梯度或置换展开的影响。一般最好先采用线性的盐梯度洗脱，维持梯度约10个柱体积。在最简单的情况下，梯度操作需两种缓冲液，平衡缓冲液（buffer A）和用于加载相反电荷离子所用缓冲液（buffer B）。大多数情况下，并不需要后半段的梯度，因为多数蛋白质都可以在
离子交换色谱仪离子交换树脂类型
在离子交换色谱仪离子交换树脂中，常用的是由苯乙烯聚合而成为长的链状分子，二乙烯苯把各链状分子交联成立体型网状体，在此结构中再以共价键引入不同性质的电荷基团而制成。一、阳离子交换树脂： 阳离子交换树脂的电荷基团带负电，反离子带正电，可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。
离子交换色谱仪离子交换树脂简介
离子交换色谱仪离子交换树脂是由苯乙稀和二乙烯基苯聚合而成的网状结构，不溶于水和有机溶剂，性质稳定。一、离子交换树脂的类型：1、阳离子交换树脂：可交换的离子为阳离子。应注意PH值范围，否则交换容量急剧下降。2、阴离子交换树脂：可交换的离子为阴离子。三、离子交换树脂的特性：1、交联度：表示交联剂在树脂中
离子交换色谱仪离子交换剂类型
离子交换色谱仪离子交换剂有离子交换树脂、多糖基离子交换剂和离子交换键合相等类型。一、离子交换树脂：1、凝胶型离子交换树脂：溶胀空隙。（1）强酸性阳离子交换树脂：1）活性基团：－SO3H。2）典型交换反应：RSO3H + NaCl = SO3Na + HCl3）特点：使用时不受pH值限制。（2）弱酸性
离子交换色谱仪阴离子交换树脂
离子交换色谱仪阴离子交换树脂是在基质骨架上引入季胺基[－N（CH3）3]、叔胺基[－N（CH3）2]、仲胺基[－NHCH3]和伯胺基[－NH2]制成的。阴离子交换树脂按胺基碱性强弱可分为强碱性、弱碱性和中等碱性阴离子交换树脂。一、强碱性阴离子交换树脂：强碱性阴离子交换树脂是以季胺基为交换基团的离子交
离子交换色谱仪酸性离子交换树脂
离子交换色谱仪酸性离子交换树脂有强酸性离子交换树脂、弱酸性离子交换树脂和中等酸性离子交换树脂。一、强酸性离子交换树脂：强酸性离子交换树脂一般是以磺酸基（－SO3H）为活性基团的阳离子交换树脂。含磺酸基的强酸性离子交换树脂是以苯乙烯为母体，以二乙烯苯为交联剂共聚后再经磺化引入磺酸基制成的。常用R－S
离子交换色谱仪离子交换树脂分类
离子交换色谱仪离子交换树脂由基质、活性基团和可交换离子组成，是一种与水亲和力较小的人工合成树脂，zui常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成的聚合物，在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团。离子交换树脂含有大量的活性基团，交换容量大，流速快，机械强度大，主要用于无机离子、有机酸、核苷酸和氨基酸等小
离子交换色谱仪离子交换树脂类型
在离子交换色谱仪离子交换树脂中，常用的是由苯乙烯聚合而成为长的链状分子，二乙烯苯把各链状分子交联成立体型网状体，在此结构中再以共价键引入不同性质的电荷基团而制成。一、阳离子交换树脂：阳离子交换树脂的电荷基团带负电，反离子带正电，可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物进行交换反应。按电荷基团酸性强弱可分为
离子交换色谱仪离子交换剂（一）
第一节 疏水性离子交换剂 疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物，在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。一、按引入电荷基团的性质分类：1、阳离子交换树脂：阳离子交换树脂的电荷基团带负电，反离子带正电，可与溶液中的阳离子或带正电荷化合物
高效离子交换色谱仪离子交换剂
高效离子交换色谱仪离子交换剂由基质、活性基团和可交换离子（反离子）组成，按基质的组成和性质可分为疏水性离子交换剂和亲水性离子交换剂。第一节 疏水性离子交换剂疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物，在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的。
离子交换色谱仪离子交换剂（三）
第二节 亲水性离子交换剂 亲水性离子交换剂（多糖基离子交换剂）与水亲和力较大，有纤维素离子交换剂、葡聚糖离子交换剂和琼脂糖离子交换剂等。一、纤维素离子交换剂：又称离子交换纤维素，是以微晶纤维素为基质，引入电荷基团而制成。微晶纤维素（纤维素胶或结晶纤维素）是将纤维性植物材料与无机酸捣成浆状，经处理使之