过氧化物酶抗过氧化物酶复合物(PAP)的制备实验
实验概要本实验制备了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP)。主要试剂1. HRP和兔(或羊)抗HRP:抗HRP用HRP免疫兔(或羊)获得2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液3. 0.1mol/LHCl4. 0.01mol/LHCl5. 饱和硫酸铵溶液6. 0.01mol/L NaOH7. 60%甘油主要设备1. 高速离心机2. 小烧杯3. 电磁搅拌器4. 冰箱5. 透析袋实验步骤1. 取兔(或羊)抗HRP血清5ml,16000r/min离心20min,去沉淀;2. 于收集的上清中加入HRP(2mg/ml)溶液1ml,室温缓慢搅拌1h,同上离心;3. 沉淀物用冷生理盐水洗涤3次,弃上清;4. 于沉淀中加入HRP(2mg/ml)溶液4ml,混匀后,移至小烧杯;5. 边搅拌边加入0.1mol/LHCl(约10滴),再用0.01mol/LHCl调pH值至2.4左右;6. 待沉淀完全溶解,溶液变清时,立......阅读全文
乳过氧化物酶的检测
鉴于其重要的应用价值,因此测定LP 活性尤为重要。目前,国内外有关LP 检测方法的研究较多,大多是基于颜色反应,利用酶促反应原理,借助分光光度计测定酶活大小 。苯胺类检测LP 活性以苯胺类为底物测定过氧化物酶活性,其原理为在过氧化物酶存在时,H2O2 可使苯胺发生氧化聚合反应,产物为棕褐色物质。该物
乳过氧化物酶法(LPO)
本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点是标记率较低,一般为20~40%。 1.原理此法是利用乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)有促进微量过氧化氢对125I-的氧化作用,生成125I+,并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。 2.方法以标记蛋白质抗原为例。 (1
豆壳过氧化物酶的性质
豆壳过氧化物酶的优良性质如下:(1)热稳定性好:在 pH2.5-12.0 之间都较稳定,75℃保温 60 分钟剩余酶活力为 68%,失活温度为 90.5℃,而辣根过氧化物酶(HRP)的失活温度为 81.5℃。(2)作用 pH 范围宽:从 pH2.5-10.0 均具有催化活性,这样可以在较宽的 pH
谷胱甘肽过氧化物酶的简介
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的组成成分,它能催化GSH变为GSSG,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,同时促进H2O2的分解,从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力
过氧化物酶的形态结构
过氧化物酶体(peroxisome)又称微体(microbody), 过氧化物酶体在1954年被发现时,由于不知道这种颗粒的功能,将它称为微体(microbody)。过氧化物酶体与溶酶体不同,过氧化物酶体不是来自内质网和高尔基体,因此它不属于内膜系统的膜结合细胞器。过氧化物酶体普遍存在于真核生物的各
抗甲状腺过氧化物酶抗体
TPOA是主要的甲状腺组织自身抗体,是甲状腺激素合成过程的关键酶,与甲状腺组织免疫性损伤密切相关。主要包括甲状腺刺激性抗体(TS-Ab)和甲状腺刺激阻滞性抗体(TSB-Ab)。 TPOA直接对抗甲状腺过氧化物酶(TPO),TPO在生物合成T3和T4过程中催化甲状腺球蛋白酪氨酸的碘化,近来的研究
乳过氧化物酶的检测
鉴于其重要的应用价值,因此测定LP 活性尤为重要。目前,国内外有关LP 检测方法的研究较多,大多是基于颜色反应,利用酶促反应原理,借助分光光度计测定酶活大小。苯胺类检测LP 活性以苯胺类为底物测定过氧化物酶活性,其原理为在过氧化物酶存在时,H2O2 可使苯胺发生氧化聚合反应,产物为棕褐色物质。该物质
过氧化物酶的形态结构
过氧化物酶体(peroxisome)又称微体(microbody), 过氧化物酶体在1954年被发现时,由于不知道这种颗粒的功能,将它称为微体(microbody)。 过氧化物酶体与溶酶体不同,过氧化物酶体不是来自内质网和高尔基体,因此它不属于内膜系统的膜结合细胞器。过氧化物酶体普遍存在于真核
过氧化物酶染色实验原理
过氧化物酶是广泛存在于生物体中的一类酶,大部分含有血红素,是一种结合蛋白。它可以催化H2O2或相关有机过氧化合物与有机、无机化合物的氧化反应。血细胞所含过氧化物酶主要为髓过氧化物酶(MPO),MPO是一类糖蛋白,是人类中性粒细胞含量最多的蛋白质,约占细胞干重的3%~5%.用MPOPHMPZE探针
过氧化物酶(POX)染色意义
POX主要存在于粒细胞系,除原粒细胞外,随细胞成熟,POX阳性反应增强(嗜碱性粒细胞反应阴性)。单核细胞系从幼单核细胞起呈弱阳性反应,淋巴细胞系、红细胞系及巨核细胞系则任何阶段均呈阴性反应。本染色法最主要用于鉴别急性白血病细胞类型,急性粒细胞性白血病呈强阳性,单核细胞性白血病呈弱阳性,急性淋巴细
豆壳过氧化物酶的性质
豆壳过氧化物酶(Soybean hull peroxidase,SHP,EC1.11.1.7)作为一种新型的氧化还原酶,其特殊的理化性质已受到重视。SHP 在食品、医药、环保和化工等行业中已初露锋芒。就目前的实际应用来看,SHP独特的稳定性和优良的反应性已使其成为同类酶中“惟我独尊”的一员:欧洲面包
简述过氧化物酶的应用
如过氧化氢酶便是过氧化物酶的一种。过氧化氢酶可与葡萄糖氧化酶配合使用,脱除蛋清中的葡萄糖,代替了传统的自然发酵的方法,从而提高产品质量,缩短生产周期。 在医学上,也可作为工具酶,用于检验尿糖和血糖。 现代医学上认为机体衰老与氧化有关,例如染色体、酶等的氧化。所以,一些有还原性功能的物质可以在
过氧化物酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾ABTSH2O2 溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃ 时,在 414 nm 处,ε414=24.6×103 l/(mmol· mm)。必须注意,1 mol H2O2 形成 2 mol 氧化的 ABTS(Szuto
过氧化物酶染色的原理
粒细胞和单核细胞胞浆内含过氧化物酶,能借助受体(联苯胺)脱氢催化过氧化化氢而释放新生氧。受体被氧化成联苯胺蓝,再与亚硝基铁氰化钠结合成稳定的蓝色颗粒而沉淀于胞浆内。
谷胱甘肽过氧化物酶的组成
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的组成成分,它能催化GSH变为GSSG,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,同时促进H2O2的分解,从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力
过氧化物酶的化学信息
过氧化酶的化学信息中文同义词过氧化酶;过氧化物酶;辣根过氧化物酶标记的重组蛋白G;乳过氧化物酶;过氧化物;辣根过氧化物酶;VI-A型;过氧化物酶,从山葵所得;过氧化物酶(辣根)(+4℃)英文同义词IUB: 1.11.1.7;HRP;HORSERADISH PEROXIDASE;EC 1.11.1.7
过氧化物酶染色(Washburn法)
1. 实验原理粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶,pox能分解H2O2释放出新生氧,使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝,后者与亚硝基铁氰化钠结合,再进一步氧化形成稳定的蓝色物质,沉淀于酶活性的细胞质内。2. 标本采集2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性
过氧化物酶的形态结构
过氧化物酶体(peroxisome)又称微体(microbody), 过氧化物酶体在1954年被发现时,由于不知道这种颗粒的功能,将它称为微体(microbody)。过氧化物酶体与溶酶体不同,过氧化物酶体不是来自内质网和高尔基体,因此它不属于内膜系统的膜结合细胞器。过氧化物酶体普遍存在于真核生物的各
免疫酶标技术—PAP法过氧化物酶抗过氧化物酶抗体复合物
实验方法原理PAP 的基本原量是在间接法的基础上,即在加完酶标二抗以后,再加一个PAP 复合物(过氧化物酶一抗过氧化物酶抗体复合物)。PAP 复合物为由3 个酶分子和2个抗酶抗体亚单位构成的复环形复合物,其稳定性很强,冲洗时不会脱落。在这种方法中,PAP 复合物中的抗酶抗体与特异性一抗必须来自同一种
乳过氧化物酶的结构特点
LP是由一条多肤链构成的,包括612个氨基酸残基,分子量大约是78kD,等电点为9.6,是一种碱性蛋白,也是一种糖蛋白。它含有一个血红素和大约10%的碳水化合物,其催化活性中心的血红素是一个原叶琳ix,通过一个酷键共价连接到多肤链上构成的。LP中铁含量是0.07%,铁是血红素的一部分,每个LP分子对
过氧化物酶的基本情况
过氧化物酶是过氧化物酶体的标志酶,是其一类氧化还原酶,它们能催化很多反应。过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于载体的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢,氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用。
豆壳过氧化物酶作为标记酶
在1966年,Avrameans等把辣根过氧化物酶与人血清清蛋白交联后,制成“血清清蛋白-HRP”酶标记物和与抗人血清清蛋白抗体交联制成的“抗血清清蛋白-HRP”酶标记物,在免疫电泳和免疫扩散试验中,分别检测抗清蛋白抗体和清蛋白。1971年,Engvall等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体吸
乳过氧化物酶的基本结构
LP是由一条多肤链构成的,包括612个氨基酸残基,分子量大约是78kD,等电点为9.6,是一种碱性蛋白,也是一种糖蛋白。它含有一个血红素和大约10%的碳水化合物,其催化活性中心的血红素是一个原叶琳ix,通过一个酷键共价连接到多肤链上构成的。LP中铁含量是0.07%,铁是血红素的一部分,每个LP分子对
过氧化物酶的基本信息
过氧化物酶是过氧化物酶体的标志酶,是其一类氧化还原酶,它们能催化很多反应。过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于载体的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢,氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用。
简述髓过氧化物酶的应用
如过氧化氢酶便是过氧化物酶的一种。过氧化氢酶可与葡萄糖氧化酶配合使用,脱除蛋清中的葡萄糖,代替了传统的自然发酵的方法,从而提高产品质量,缩短生产周期。 在医学上,也可作为工具酶,用于检验尿糖和血糖。 现代医学上认为机体衰老与氧化有关,例如染色体、酶等的氧化。所以,一些有还原性功能的物质可以在
过氧化物酶的基本信息
过氧化物酶是过氧化物酶体的标志酶,是其一类氧化还原酶,它们能催化很多反应。过氧化物酶是以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于载体的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢,氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用。
过氧化物酶的酶体结构
过氧化物酶体是由一层单位膜包裹的囊泡,直径约为0.5~1.0μm,通常比线粒体小。普遍存在于真核生物的各类细胞中,在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化氢水解。过氧化氢(H2O2)是氧化酶催化的氧化还原反应中产生的细胞毒性物质,氧化酶和过氧化氢酶都存在
关于髓过氧化物酶的简介
过氧化物酶是氧化还原酶的一种。分布在乳汁、白细胞、血小板等体液或细胞中,该酶的辅基亦为血红素,以H2O2为电子受体催化底物氧化的酶,它催化H2O2直接氧化酚类或胺类化合物,如谷胱甘肽过氧化物酶、嗜酸性粒细胞过氧化物酶和甲状腺过氧化物酶等,具有消除过氧化氢和酚类胺类毒性的双重作用,反应如下:R+H
髓过氧化物酶的功能反应
过氧化物酶体的功能:(1)使毒性物质失活这种作用是过氧化氢酶利用过氧化氢氧化各种底物, 如酚、甲酸、甲醛和乙醇等,氧化的结果使这些有毒性的物质变成无毒性的物质,能有效分解甲醛、甲苯。同时也使H2O2进一步转变成无毒的H2O。这种解毒作用对于肝、肾特别重要, 例如人们饮入的乙醇几乎有一半是以这种方式被
过氧化物酶的化学反应
过氧化物酶体是由一层单位膜包裹的囊泡,直径约为0.5~1.0μm,通常比线粒体小。普遍存在于真核生物的各类细胞中,在肝细胞和肾细胞中数量特别多。过氧化物酶体的标志酶是过氧化氢酶,它的作用主要是将过氧化氢水解。过氧化氢(H2O2)是氧化酶催化的氧化还原反应中产生的细胞毒性物质,氧化酶和过氧化氢酶都