改进的间接酶联免疫法检测磺胺类药物
实验概要磺胺类药物是抗菌药,被广泛应用于动物和人。各种检测磺胺类药物残留的方法已经被应用。本试验利用酶联免疫吸附方法,检测磺胺类药物的浓度,为实际应用提供参考。本实验用四只兔子制备抗体,兔子被TS-LPH和TS-BSA免疫,间接ELISA检测血清,在每两只兔子上,使用TS-OV作为诱导原,产生高滴度蛋白。然后用间接竞争ELISA检测血清。实验原理62.5mgTS,34.5mgN-羟基琥珀酰亚胺酯和45.3mg 1,3-二环己基碳二亚胺在1.5ml的干燥的N,N-二甲基酰胺中反应18h, 4oC,通过滤过作用移除生成的二环乙基脲沉淀物,得到滤液。滤液被加到含有65mgLPH 2ml的PBS中,用NaOH调节PH到7.6。这个混合液在4oC,搅拌24h。通过TLC检测磺胺药有没有聚合现象。因为低碱性自由的氨基磺酸簇(例如,磺胺噻唑pka是2.36),尤其赖氨酸的氨基簇(pka10.28)。可能是每一种氨基酸形成酰胺的主要原因。24h......阅读全文
细胞免疫化学:免疫酶标技术
1) 直接法1.标本固定。2.PBS洗涤2×3分钟。3.1% H2O2(或1% H2O2 甲醇)抑制内源性过氧化物,室温10~20分钟。4.正常血清(1:10)孵育,室温20分钟。5.滴加酶标记的抗体37℃1小时或4℃过夜。6.PBS洗涤3×3分钟。7.DAB+H2O2显色5~10分钟,镜下控制染色
免疫酶染色试验_免疫印迹法
免疫印迹法 (以检测流行性出血热病毒结构蛋白和 NP 核蛋白为例说明)实验方法原理免疫印迹法 是将电泳与免疫酶染色结合起来的一种方法。它先经电泳 (SDS--PAGE)将病毒结构蛋白进行分离,通过转印将被分离的各区带原位转移到硝酸纤维素膜 (nitrocellulose membrane, NC 膜
免疫资料——免疫学常用简称介绍
1:抗体查询常用名词 Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reacts Host Species (宿主):Host in which the antibody was generated Applicati
发生自身免疫的自身免疫病
上述针对自身的免疫应答,均不需破坏原有的自身耐受性。因自身耐受性被破坏而引起的自身免疫病有 3种类型:①由针对自身红细胞抗原决定簇的抗体引起的自身免疫病,如自身免疫性溶血性贫血。疾病表现为红细胞被破坏和贫血;②由针对自身特殊组织成分的抗体(例如甲状腺抗体、胃粘膜抗体)引起的自身免疫病。同一患者可出现
Nature免疫学:踩住免疫的刹车
以色列特拉维夫大学的研究人员发现了一个强有力的机制,可以阻止白血细胞胡作非为。 免疫系统是一把双刃剑。虽然它的主要作用是对抗感染,但当它过度活跃时会导致过敏和自身免疫性疾病等问题。例如,负责抗寄生虫的免疫系统部分是通过释放称作为嗜酸性粒细胞的白血细胞进入到血液中来发挥作用。而嗜酸性粒细胞水
NK免疫细胞免疫疗法有哪些优势
细胞免疫疗法过程是通过患者体内不成熟的免疫细胞(采血),在实验室中进行活化培养使其具有高效识别和杀灭肿瘤细胞的能力后,再回输患者体内。患者只需配合做采血与回输血两个步骤,无需住院。港} 安 .健. 康表示疗法优点凸显在:通过采集人体自身免疫细胞,经由体外培养使其数量成千上万倍增多,进而使免疫细胞的靶
免疫资料——免疫学常用简称介绍
1:抗体查询常用名词Reactivity (物种与抗体反应):Species with which the antibody reactsHost Species (宿主):Host in which the antibody was generatedApplications(应用) :Speci
免疫学实验免疫学实验细胞免疫检查介绍介绍
隐球菌病胶乳凝集试验介绍: 胶乳凝集试验检测新生隐球菌荚膜多糖抗原,是一种简便、快速、有效诊断隐球菌感染的实验室方法。它以胶乳颗粒为载体,表面连接有抗新生隐球菌抗体,形成致敏胶乳悬液, 如标本(血清、胸腔积液、支气管肺泡灌洗液或脑脊液)中含有一定量的隐球菌荚膜多糖抗原,则可产生肉眼可见的凝
特异性免疫的细胞免疫的介绍
病原菌侵入机体后主要停留在宿主细胞内者,称为胞内菌感染.例如结核杆菌、麻风杆菌、布氏杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、军团菌等,这些细菌可抵抗吞噬细胞的杀菌作用,宿主对胞内菌主要靠细胞免疫发挥防御功能。参与细胞免疫的T细胞主要是TD(CD4+)细胞和TC(CD8+)细胞。此外,分布在粘膜、皮下组织和小肠
狂犬病基础免疫阶段的免疫程序
第0天、第7天和第21天(或第28天)分别接种1剂,共接种3剂。
PNAS:以免疫之矛,攻免疫之盾
自噬是细胞抵御病原体感染的重要程序,近来科学家们发现居然有细菌能够利用自噬建立自己的补给线,这种细菌就是引发人类蜱传病anaplasmosis的Anaplasmaphagocytophilum,Ap。 研究人员指出,Ap菌所分泌的蛋白能与白细胞合成的蛋白相结合,在细胞内形成类似自噬体的小囊
免疫学实验感染免疫检测介绍
感染免疫检测介绍: 人的免疫力随结核分支杆菌或其成分在体内存在而存在,故被称为感染免疫,或称有菌免疫,一旦体内结核分支杆菌或其成分全部消失,免疫力也随之消失。因此要进行感染免疫检测。 感染免疫检测正常值: 各项的检测结果呈阴性。 感染免疫检测临床意义: 异常结果:一
酶免疫分析及酶联免疫吸附实验
这篇简短的通讯回顾了了EIA和ELISA的历史背景,这两种分析方法是由瑞典斯德哥尔摩大学的Perlmann, Engvall教授以及荷兰的Schuurs和vanWeemen教授独立而同时创造完成的。 当今,在全球医学实验室里广泛应用的全自动分析仪每日可以检测大量的病人标本,其中很多仪器都是运用酶标记
关于病毒免疫的特异性免疫介绍
抗病毒的特异性免疫因有包膜病毒和无包膜病毒而异。有些病毒能迅速引起细胞破坏,释放病毒颗粒,称为细胞破坏型感染,有些病毒感染不引起细胞破坏称为细胞非破坏型感染,根据病毒感染类型的不同,在特异性体液免疫和细胞免疫的侧重性也不相同。 (一)体液免疫1.中和病毒作用 ;病毒的表面抗原刺激机体产生特异性
粘膜免疫系统的细胞免疫简介
粘膜免疫系统的细胞免疫包括上皮淋巴细胞、粘膜固有层免疫细胞、T细胞及K细胞免疫等。上皮内淋巴细胞(IEL)是体内最大的淋巴细胞群。由于离肠腔很近而成为粘膜免疫系统中首先与细菌、食物抗原接触的部位。IEL中,90%是CD3+T细胞,少于6%是分泌抗体的B细胞,此外还存在极少量的非T非B的裸细胞(n
单向定量免疫电泳(火箭免疫电泳)
实验原理单向定量免疫电泳又称火箭电泳(rocket immunoelectrophoresis)。在琼脂内掺入适量的抗体,在电场作用下,定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体,形成抗原—抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动,遇到琼脂内沉淀的抗原—抗体复合物,抗原量的增加造成抗原过
免疫学实验免疫学检测介绍
免疫学检测介绍: 免疫学检测是机体识别“自身”与“非己”抗原,对自身抗体形成天然免疫耐受,对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能的检测。正常情况下,这种生理功能对机体有益,可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用。在一定条件下,当免疫功能失调时,也会对机体产生有害的反应和结果,
关于体液免疫的免疫异同的相关介绍
指B细胞在T细胞辅助下,接受抗原刺激后形成效应B细胞和记忆细胞。效应B细胞产生的具有专一性的抗体 与相应抗原特异性结合后完成的免疫反应。体液免疫的关键过程是产生高效而短命的效应B细胞,由效应B细胞分泌抗体清除抗原。产生寿命长的记忆细胞,在血液和淋巴中循环,随时“监察”,如有同样抗原再度入侵,立即
荧光免疫分析微流控免疫芯片改善
微流控免疫芯片是在20世纪90年代出现的芯片集成毛细管电泳技术基础上发展起来的,随后微流控芯片技术在很多领域得到了迅速发展。这一被称为“芯片上实验室”的微分析系统具有高效性、设计容易、用样量少、可以进行批量分析以及小型化和自动化等特点。尽管这一技术仍处于初步发展阶段,但它已经推动传统的分析化学发
免疫荧光和免疫电镜有何异同?
相同点:两者都是应用免疫组织化学的原理,标记并检查组织中的目的蛋白(抗原)。 不同点:免疫荧光技术是用带有荧光的抗体去标记和检测目的蛋白(抗原),标记后用荧光显微镜观察。属于光镜、细胞水平的观测;免疫电镜技术,是使用带有过氧化物酶或金颗粒的抗体去标记组织中目的蛋白,进而制成电镜标本,最终用电子
免疫球蛋白M的免疫功能介绍
抗传染免疫作用IgM是血管内主要的抗传染性免疫物质。可通过激活补体系统发挥溶菌、溶细胞及中和病毒等免疫作用。由于IgM为五聚体结构,从理论上讲,它和相应抗原的结合价应为10价,但往往可能由于空间位置的影响,只表现为5价。尽管如此,IgM还是有较多的结合价能与相应抗原多点结合,故其凝集作用及在补体参与
免疫学实验血清免疫蛋白电泳介绍
血清免疫蛋白电泳介绍: 免疫球蛋白是一类有抗体性的球蛋白,是机体特异性体液免疫反应的物质基础与执行单位。它的主要功能是与入侵的病原微生物发生免疫反应(调理、中和、制动、促进吞噬或溶细胞反应),保护机体免受病原体的侵害;清除体内自身抗原物质,参与免疫调控,保持机体内环境稳定。在外加直流电源的作用下,
免疫细胞化学和免疫荧光实验
载玻片/盖玻片处理聚醚酰亚胺或多聚赖氨酸在室温下包被盖玻片1小时。无菌水冲洗盖玻片(3次 ,每次5分钟)。可将盖玻片干完全干燥,并在紫外光下消毒至少4小时。在玻片上种植细胞,或准备细胞离心涂片器,或做好涂抹准备。磷酸盐缓冲液( PBS )进行简短的冲洗。第一步:细胞固定用预冷的甲醇、丙酮( 1-10
伴随免疫须与带虫免疫的区别
所谓"带虫免疫",是指人感染疟原虫后产生的免疫力,能抵抗同种疟原虫的再感染,而同时其血液内又有低水平的原虫血症,此免疫状态称带虫免疫.
免疫诊断——化学发光免疫分析技术
第一节 化学发光免疫分析技术概述免疫学是生命科学和医学中一门重要的基础和前沿学科,以免疫学理论和原理为基础的免疫学检验在临床疾病的预防、诊断、治疗及预后评估中发挥重要作用。免疫学检验是依据抗原与抗体特异性反应原理,借助于各种敏感的标记、示踪(放射性核素、荧光素、酶、镧系元素、发光物质、胶体金等)技术
固有免疫与适应性免疫的关系
相同点固有免疫和适应性免疫是相辅相成的、密不可分的。固有免疫往往是适应性免疫的先决条件,如树突状细胞和吞噬细胞吞噬病原生物实际上是一个加工和提呈抗原的过程,为适应性免疫应答的识别准备了条件。适应性免疫应答的效应分子可大大促进固有免疫应答,如抗体可促进吞噬细胞的吞噬能力,称为调理吞噬,或促进NK细胞的
关于免疫耐受的免疫因素分析介绍
① 免疫耐受— 动物的年龄:在胚胎期建立免疫耐受性最易,新生期次之,成年期比较困难。这可能与机体在各时期的免疫系统成熟程度有关; ② 免疫耐受— 免疫反应性的强弱:免疫反应性强的个体不易产生免疫耐受性,有免疫缺陷的动物,不管是自发的还是使用免疫抑制剂,都很容易诱发免疫耐受性; ③ 免疫耐受—
免疫学技术:免疫血清制备方法
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
免疫印迹技术和免疫斑点技术
免疫印迹技术又称Western印迹法,它将凝胶电泳与固相免疫结合,首先通过蛋白质电泳技术将需要区分的蛋白质转移至固相载体如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技术进行测定。该法能分离分子大小不同的蛋白质并确定其分子质量,常用于检测多种病毒抗体或抗原。免疫印迹技术又称Western印迹法,它将凝胶电泳
异相酶免疫试验和均相酶免疫试验
Ag为待测抗原,AgAb-E为结合标记物,Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失,即结合标记物(AgAb-E)无酶活性,游离标记物(Ab-E)有酶活性; (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E