免疫学技术:免疫血清制备方法

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时,则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。免疫血清的特异性主要取决于免疫用抗原的纯度。因此,如欲获得高特异性的免疫血清,必须予先纯化抗原。此外,抗原的剂量、免疫途径及注射抗原的时间间隔等,也是影响免疫血清效价的重要因素应予重视。 一、原理 具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗体混合物(即多克隆抗体)。另外,抗体的产生具有回忆应答的规律性,表现为......阅读全文

免疫学技术:免疫血清制备方法

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时

免疫血清制备方法

免疫血清的制备可用于:(1)制备免疫标记抗体等;(2)供特异性免疫治疗用等。实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗

免疫血清制备方法(二)

五、结果鉴定 以双相琼脂扩散试验测定所获免疫血清的抗体效价,并用琼指免疫电泳鉴定免疫血清中抗体的质量,应产生单一的沉淀弧线。鉴定方法的具体步骤参见有关部分。 六、材料 (一) 动物:健康成年家兔,雄性,体重2~3公斤。 (二) 器材:剪刀、镊子、注射器(2ml、50ml)附针头(9号、6号)、称量瓶

免疫血清制备方法(一)

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时

免疫血清的制备

实验方法原理 具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别,因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体,实际上为针对该抗原分子表面不同决定簇的抗体混合物(即多克隆抗体)。另外,抗体的产生具有回忆应答的规律性,现为初次免

免疫血清的制备实验

免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。(来源:医学基础免疫学实验指导,主编金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界图书出版社,1990)  实验方法原理具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化

抗原与免疫血清的制备

实验方法原理 动物产生抗体的量,一方面可因动物的种类、年龄、营养状况及刺激部位的感受性的不同而不同外,另方面还与抗原的种类、注射量、注射途径、注射次数以及注射的间隔时间有关。抗原量低到一定限度时,抗体不能产生或用现有方法不能测出,但超过最高限度对抗体的产生反起抑制作用。在最低限度以上,抗体根据抗原量

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实

抗原和免疫血清的制备实验

实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制

抗原和免疫血清的制备实验——抗菌血清的制备

抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践,为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后,动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。实验材料家兔试剂、试剂盒普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

免疫血清的制备及效价测定

制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体,因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。 制备的免疫血清的质量(特异性、

免疫血清的制备及效价测定

实验概要本实验制备了抗绵羊红细胞 (SRBC)的免疫血清并对其效价进行了测定。实验原理1.  制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内,由动物体内 B  细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子(完全抗原)具有多种抗原决定簇,每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B  细胞系产生该决定簇的

抗原和免疫血清制备实验—抗红细胞抗体(溶血素)制备

实验材料家兔试剂、试剂盒红细胞悬液生理盐水阿氏液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  红细胞悬液的制备(1) 采血采取的绵羊血与灭菌的保存液等量混合,置冰箱中,可保存数周,也可用抗凝方法(2) 洗涤血球先将抗凝血液离心沉淀(2000 cpm×5分钟)吸去上清。加入2~3倍的生理盐水并用毛细滴管反复吹

抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备

实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1.  弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2.  人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中

经典免疫学时期概述

  这一时期起始于18世纪末至20世纪中。其特点是人们对免疫功能的认识从人体现象的观察进入了科学实验时期。它的发展是与微生物学的发展密切相关的,并成为微生物学的一个分支。这一时期内的重要成就如下述。  1.牛痘苗的发明 继人痘苗之后,免疫学的一个重要发展首推牛痘苗的发明。它不但弥补了人痘苗的不足,并

免疫血清的定义

(1)抗毒素,将类毒素多次免疫动物(常用马)后,采取动物的免疫血清,经浓缩纯化后制得。主要用于治疗细菌外毒素所致疾病。常用的有白喉抗毒素、破伤风抗毒素。(2)抗菌血清,在本世纪40年代以前曾用抗肺炎、抗百日咳、抗炭疽等抗菌血清治疗有关疾病。自从磺胺类药物和抗生素大量应用后,已极少应用于临床治疗。但对

免疫血清的分类

免疫血清 immune serum亦称抗血清。含有抗体的血清制剂。种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。

关于免疫血清的简介

  (1)抗毒素,将类毒素多次免疫动物(常用马)后,采取动物的免疫血清,经浓缩纯化后制得。主要用于治疗细菌外毒素所致疾病。常用的有白喉抗毒素、破伤风抗毒素。  (2)抗菌血清,在本世纪40年代以前曾用抗肺炎、抗百日咳、抗炭疽等抗菌血清治疗有关疾病。自从磺胺类药物和抗生素大量应用后,已极少应用于临床治

免疫学测定方法

免疫测定法几乎可以用于所有细胞因子的检测。优点:①特异性高,使用特异的单克隆抗体,可用于单一细胞因子的检测;②影响因素相对较少且容易控制,重复性好,方法容易标准化;③操作简便、快速,无需依赖细胞株,故不需维持培养,可操作性增加,容易推广和便于普查。缺点:①所测定的只是细胞因子的蛋白含量,与其生物活性

免疫学检测方法

免疫学检测方法是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验方法。随着学科间的相互渗透,免疫学涉及的范围不断扩大,新的免疫学检测方法层出不穷。免疫学方法的应用范围亦在日益扩大,不仅成为多种临床疾病诊断的重要方法,也为众多学科的研究提供了方便。本章将从抗原、抗体、免疫细胞

转基因食品检验分析技术介绍免疫学方法

免疫学方法主要是利用抗体可以特异地与抗原分子(GMO 蛋白成分)结合,因此通过抗原抗体的特异性识别反应来进行检测,是一种特异而简便的检测程序。目前,人们发明了许多种不同的方法来检测抗体与其目标抗原的结合,酶联免疫吸附测定(ELISA)就是其中的一种方法。在酶联免疫测定的过程中,抗体上通常还连接有一种

膜分离技术中膜的制备方法

      膜分离技术中膜的制备方法包括高分子膜、无机膜和复合膜的制备方法,膜材料常用离心机进行分离提纯。一、高分子膜的制备方法:        用物理化学方法可制备分离性能良好的高分子膜。zui实用的方法是相转化法。        相转化法是用溶剂、溶胀剂与高分子膜材料制成铸膜液,刮制成膜后,通过

膜分离技术中膜的制备方法

膜分离技术中膜的制备方法包括高分子膜、无机膜和复合膜的制备方法,膜材料常用离心机进行分离提纯。一、高分子膜的制备方法:用物理化学方法可制备分离性能良好的高分子膜。最实用的方法是相转化法。相转化法是用溶剂、溶胀剂与高分子膜材料制成铸膜液,刮制成膜后,通过沉浸凝胶法、热凝胶法、溶剂蒸发法和水蒸气吸入法等

生物芯片技术的芯片制备方法

包括原位合成和预合成后点样。原位合成:适用于寡核苷酸,通过光引导蚀刻技术。已有P53、P450,BRCAI/BRCA2 等基因突变的基因芯片。预合成后点样:是将提取或合成好的多肽、蛋白、寡核苷酸、cDNA、基因组DAN等通过特定的高速点样机器人直接点在芯片上。该技术优点在于相对简易低廉,被国内外广泛

从免疫血清纯化抗体

从免疫血清纯化抗体1. 剪取一小条0.45 μm 的硝酸纤维膜,置于1.5ml eppendorf 管中,浸没于1 ml1 mg/ml 的抗原溶液中,5 min。2. 取出膜,置于滤纸上干燥。3. 将膜放置于装有1 ml Buffer A 的eppendorf 管,轻轻震荡混匀30 min。4. 移

免疫血清的概念和种类

免疫血清 immune serum亦称抗血清。含有抗体的血清制剂。种类很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。

从免疫血清纯化抗体

1. 剪取一小条0.45 μm 的硝酸纤维膜,置于1.5ml eppendorf 管中,浸没于1 ml,1 mg/ml 的抗原溶液中,5 min。2. 取出膜,置于滤纸上干燥。3. 将膜放置于装有1 ml Buffer A 的eppendorf 管,轻轻震荡混匀30 min。4. 移去Buffer

蛋白质芯片技术探针的制备方法

低密度蛋白质芯片的探针包括特定的抗原、抗体、酶、吸水或疏水物质、结合某些阳离子或阴离子的化学集团、受体和免疫复合物等具有生物活性的蛋白质。制备时常常采用直接点样法,以避免蛋白质的空间结构改变。保持它和样品的特异性结合能力。高密度蛋白质芯片一般为基因表达产物,如一个cDNA文库所产生的几乎所有蛋白质均