噬神经元的腺病毒载体的构建
实验概要腺病毒载体，广泛用于外源基因转移到神经胶质细胞，具有细胞毒性。利用腺病毒载体转染神经细胞已经盛行，因为腺病毒载体除了感染细胞后有限的细胞毒性，还利于长期表达转基因。主要试剂人类胚胎肾（HEK）293T细胞腺病毒转移载体质粒腺病毒包装载体PLP1，pLP2（之前），PLP / VSVGDMEM培养基青霉素，链霉素-谷氨酰胺（100X）磷酸盐缓冲液PBS（-）胎牛血清凝聚胺主要设备 10-cm的细胞培养皿50毫升锥形离心管Steriflip-GP过滤器（0.22微米） 超离心管17.0mL5％二氧化碳培养箱荧光显微镜生物安全柜离心机 实验材料2.5M氯化钙溶液：36.75克氯化钙，70毫升双蒸H 2 O，通过0.22μm滤膜过滤，体积调制100毫升2X HEPES缓冲：氯化钠280 mM，50mM肝素钠，1.5mM的Na2HPO4 (pH值7.05）实验步骤腺病毒载体的构建和浓度第1天： HEK细胞的培......阅读全文
自噬激活Hippo通路
而最早关于Hippo通路与自噬关系的论文则是2014年发表于《JEM》的一篇论文。mTORC1信号是自噬途径主要的上游抑制通路，而在TSC1缺失的细胞中，mTORC1通路则维持组成型激活状态。该项研究的研究者发现，在TSC1缺失的细胞中，不仅自噬受到抑制， Hippo通路也受到显著抑制。机制研究发现
自噬溶酶体的作用
自噬性溶酶体是一种自体吞噬泡, 作用底物是内源性的,即细胞内的蜕变、破损的某些细胞器或局部细胞质。这种溶酶体广泛存在于正常的细胞内，在细胞内起“清道夫”作用，作为细胞内细胞器和其它结构自然减员和更新的正常途径。在组织细胞受到各种理化因素伤害时，自噬性溶酶体大量增加，因此对细胞的损伤起一种保护作用。自
自噬流怎么检测
1.检测LC3II/LCI: lc3参与自噬的形成，自噬形成时，胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽，转变为(自噬体)膜型(即LC3-II)，LC3II升高代表自噬的启动；2.检测P62：P62可以通过自噬来降解，因此P62可以反映自噬的强弱。当LC3 II升高，P62同时降低，表明自噬流
细胞自噬系统介绍
自噬是近年来很热门的领域，做一下系统的介绍或讨论，内容：1） 什么是自噬？包括自噬的定义、形态学特征、分子基础、调控等2）自噬的意义自噬与细胞存活、细胞死亡、疾病、衰老等的关系3）怎么研究自噬？主要谈谈怎么证明细胞发生了自噬，即自噬的判断标准和各种研究自噬的方法及局限性。一、自噬的过程——从一张图片
细胞自噬研究策略
医学科研实验基础知识笔记（四）：细胞自噬研究策略细胞自噬是指细胞在外界环境因素的影响下， 细胞利用溶酶体降解自身受损、 变性或衰老的大分子物质以及细胞器的自我消化过程。自噬是细胞的一种自我保护机制， 广泛存在于真核细胞内， 在调节细胞生存和死亡的过程中， 起着重要的作用。当细胞发生自噬后， 在自噬相
什么是细胞自噬？
自噬（英语：Autophagy，或称自体吞噬）是一个涉及到细胞自身结构通过溶酶体机制，负责将受损的细胞器、错误折叠的蛋白及其他大分子物质等运送至溶酶体降解并再利用的进化保守过程。自噬是广泛存在于真核细胞的现象，并且可分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬三大类。这是一个受到紧密调控的步骤，此步骤是细
自噬流怎么检测
1.检测LC3II/LCI: lc3参与自噬的形成，自噬形成时，胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽，转变为(自噬体)膜型(即LC3-II)，LC3II升高代表自噬的启动；2.检测P62：P62可以通过自噬来降解，因此P62可以反映自噬的强弱。当LC3 II升高，P62同时降低，表明自噬流
什么是细胞自噬
自噬是指细胞分解细胞质等自身构成成分的现象。自噬作用是细胞加速新陈代谢，或者在饥饿时获得能量的一个重要手段。自噬在各种生命活动中发挥着重要作用，比如它可以加速细胞内的新陈代谢，或者在细胞处于饥饿状态时从分解产物中获得能量。自噬过程中，细胞需要一个特殊的“口袋”将有待分解的物质包围并隔离起来，这个叫做
自噬流怎么检测
1.检测LC3II/LCI: lc3参与自噬的形成，自噬形成时，胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽，转变为(自噬体)膜型(即LC3-II)，LC3II升高代表自噬的启动；2.检测P62：P62可以通过自噬来降解，因此P62可以反映自噬的强弱。当LC3 II升高，P62同时降低，表明自噬流
PNAS：可卡因摄入过量如何导致脑细胞死亡？
近日，来自美国约翰斯霍普金斯大学医学院的研究人员利用小鼠进行研究发现高剂量可卡因会通过触发过度自噬导致脑细胞死亡，同时他们还发现了一种小分子化合物能够改善这一情况。相关研究结果发表在国际学术期刊PNAS上。 在1990年发现脑细胞使用一氧化氮进行细胞交流之后，Solomon Snyder教授及
研究揭示TGFβ蛋白DAF7协同调控多种组织中的自噬活性
10月29日，Journal of Cell Biology 杂志在线发表了中国科学院生物物理研究所张宏课题组的研究论文“TGFβ-like DAF-7 acts as a systemic signal for autophagy regulation in C. elegans”，该文揭示了
自噬转化医学与疾病研究进展
自噬（autophagy）是继凋亡（apoptosis）之后，生命科学最热门的研究领域之一。近年来，自噬的研究成果层出不穷，成为许多科学家和各种研究基金重点关注的研究方向。2013年，国家自然科学基金批准的与自噬相关的项目接近300个。但是，有关自噬性细胞死亡和存活在疾病中的作用仍然存在争议。生
上海生科院发现诱导自噬促进脊髓损伤后轴突再生
9月16日，《美国科学院院报》（PNAS）在线发表了中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所、神经科学国家重点实验室以及中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心罗振革研究组题为《诱导自噬促进微管稳定和脊髓损伤后轴突再生》的研究论文。 中枢神经元有限的内在再生能力，环境中多种再生抑制因子的存在以
神经元细胞根据神经元的机能分类介绍
1.感觉（传入）神经元： 接受来自体内外的刺激，将神经冲动传到中枢神经。神经元的末梢，有的呈游离状，有的分化出专门接受特定刺激的细胞或组织。分布于全身。在反射弧中，一般与中间神经元连接。在最简单的反射弧中，如维持骨骼肌紧张性的肌牵张反射，也可直接在中枢内与传出神经元相突触。一般来说，传入神经元
研究揭示TGFβ蛋白DAF7协同调控多种组织中的自噬活性
10月29日，Journal of Cell Biology 杂志在线发表了中国科学院生物物理研究所张宏课题组的研究论文“TGFβ-like DAF-7 acts as a systemic signal for autophagy regulation in C. elegans”，该文揭示了
VIB研究发现修复神经元之间沟通交流的机制
2015年11月27日——VIB/鲁汶大学（KU Leuven）Patrik Verstreken教授领导的研究团队揭示了一种机制的详细细节，为神经元之间的沟通交流提供了更多的洞察。该研究阐明了受损的神经突触（synapses）——神经元之间的连接点——如何被修复以保持神经元之间的交流处于最佳水
间充质干细胞治疗脊髓小脑性共济失调机制获揭示
中国科学院广州生物医药与健康研究院李志远团队研究发现人脐带血来源间充质干细胞（hUCMSCs）可以通过mTOR靶向途径促进TFEB核转位激活自噬溶酶体功能，减少细胞内累积突变蛋白ataxin-3的含量，起到改善神经细胞功能，促进神经发生的作用。相关研究近日发表于Cell Death and D
NIH研究表明，高活性免疫与衰老性脑疾病有关
NIH/国家神经疾病与中风研究所的一项果蝇研究指出，人体的免疫系统可能在大脑老化损伤中起关键作用。研究结果基于改变Cdk5基因活性后，大脑老化过程加速，导致果蝇更早死亡，并在晚年时期患有飞行或行走障碍，以及更多的神经变性脑损伤迹象。 临床前研究表明，Cdk5是对大脑早期发育很重要的基因，
自噬受体蛋白招募自噬起始相关ULK复合物分子机制
Nat Comm 细胞自噬（Autophagy）是真核细胞中一种高度受调控的、溶酶体依赖的细胞代谢过程，对于维持细胞内稳态以及促进细胞的生长、发育和存活具有至关重要的作用。选择性自噬通过自噬受体蛋白来特异性地识别和降解特定的底物，包括蛋白聚集体、受损线粒体、外源性的入侵病原体等。选择性自噬在众
全身敲除或兴奋神经元条件敲除L2A/LAMP2a的表达
首先，作者在小鼠中进行全身敲除或兴奋神经元条件敲除L2A/LAMP2a的表达。两种小鼠均出现了行为症状，全身敲除和条件敲除的小鼠症状类似。在到达六月龄时，兴奋神经元条件敲除小鼠出现脂褐质和K63泛素化蛋白累积，进一步提示蛋白降解清除出现了问题。 进一步，作者对小鼠的不可溶组份蛋白进行了数量蛋白
科学证实:吗啡上瘾分子机制被破译
毒品成瘾的治疗尚缺乏完全有效的方式，强制戒断后复吸率很高。近日，中国科学院昆明动物研究所首次阐明，吗啡可诱导多巴胺能神经元特异性自噬，从而导致毒品成瘾。该研究为阐明阿片类毒品成瘾的分子机制以及临床治疗提供了新思路和理论依据。该研究成果近日在线发表在《自噬》期刊上。 毒品成瘾困扰人类健康，呈
蠕虫自噬肠道致衰老
在土壤和研究人员的实验室中扭动的微小线虫以内脏为食——它们自己的内脏。一项最新研究显示，消化自身肠道的习惯能帮助其繁殖，但也加速了它们的衰老。这些结果支撑了一种非正统的假设：人类和其他生物体随着年龄增长会分解，因为在它们年轻时使其受益的特征会变得有害。 【《科学》相关文章】 时间给线
蠕虫自噬肠道致衰老
线虫需要卵黄产生卵。 图片来源：JAMES KING-HOLMES/SCIENCE SOURCE 在土壤和研究人员的实验室中扭动的微小线虫以内脏为食——它们自己的内脏。一项最新研究显示，消化自身肠道的习惯能帮助其繁殖，但也加速了它们的衰老。这些结果支撑了一种非正统的假设：人类和其他生
蠕虫自噬肠道致衰老
在土壤和研究人员的实验室中扭动的微小线虫以内脏为食——它们自己的内脏。一项最新研究显示，消化自身肠道的习惯能帮助其繁殖，但也加速了它们的衰老。这些结果支撑了一种非正统的假设：人类和其他生物体随着年龄增长会分解，因为在它们年轻时使其受益的特征会变得有害。 时间给线虫带来了巨大伤害。和很多人
自[体吞]噬的概念
中文名称自[体吞]噬英文名称autophagy定 义细胞自身一部分内容物被次级溶酶体消化的过程。消化产物可作为营养物再利用，或用于细胞分化中的细胞结构重建。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生理（二级学科）
自噬信号通路相关MYCN
这个基因是myc家族的一员，编码一个具有基本螺旋-环-螺旋（bhlh）结构域的蛋白质。这种蛋白位于细胞核内，必须与另一种bhlh蛋白二聚以结合DNA。这种基因的扩增与多种肿瘤有关，尤其是神经母细胞瘤。该基因有多种编码不同亚型的选择性剪接转录变体。This gene is a member of th
关于细胞自噬的简介
细胞自噬（autophagy）一词来自希腊单词auto-，意思是“自己的”，以及phagein，意思是“吃”。所以，细胞自噬的意思就是“吃掉自己”。 细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，
关于噬菌粒的简介
噬菌粒是一类人工构建的含有单链噬菌体包装序列、复制子以及质粒复制子、克隆位点、标记基因的特殊类型的载体。它是包含了丝状噬菌体大间隔区域的质粒，是一种双链质粒，含噬菌体来源的复制子，在细菌的细胞中出现有辅助噬菌体的情况下，可被诱导成单链DNA噬菌粒，同时具有噬菌体和质粒的特征，可以像噬菌体或质粒一
请问细胞自噬是什么？
自噬（autophagy）一词来自希腊单词auto-，意思是“自己的”，以及phagein，意思是“吃”。所以，细胞自噬的意思就是“吃掉自己”。 虽然人们早就知道自噬存在，但是只有在 大隅良典的精巧实验之后，人们才意识到它的机制、懂得了它的重要性。 细胞自噬是什么？ 今年的诺贝尔生理学或医
细胞自噬的研究方法
正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有：一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor