放射免疫分析法的建立
一、放射免疫分析的基本试剂 (一)标准品 标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液,用于制作标准曲线。 (二)标记物 标记抗原应具备:①比放射性高,以保证方法的灵敏度;②免疫活性好;③所用的核素的半衰期尽可能长,标记一次可较长时间使用,这对来之不易的抗原尤其重要;④标记简便、易防护。 要准确测量B与F的放射性,必须有足够的放射性强度。所选用的标记抗原的量,在使用125I时达5000~15000cpm。 (三)抗体 应选择特异性高、亲和力强及滴度好的抗体,用于放射免疫测定。 根据稀释曲线,选择适当的稀释度,一般以结合率为50%作为抗血清的稀释度。 (四)B......阅读全文
关于放射免疫分析法的基本信息介绍
1960年美国化学家R.S.耶洛和S.A.贝尔森提出此法,耶洛因此于1977年获得诺贝尔生理学或医学奖。 她从小酷爱自然科学。在大学里,她热衷于物理学,却致力於医学研究,她工作於纽约市布隆克斯区退伍军人医院,致力于「胜太荷尔蒙的放射免疫分析」。居里夫人自传和核子物理学家美籍意大利人费米的讲演,
实际生活中放射免疫分析法的应用
此法用于在内分泌学中测定胰岛素、生长激素、甲状旁腺激素、血管紧张素、催乳素、黄体化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鉴别、诊断、研究激素的生理和药理作用,目前较多用于研究激素与受体结合的机理。在传染病学方面广泛用于乙型肝炎抗原的亚型分类测定。在临床免疫学上测定免疫球蛋白 G、免疫球蛋白E及抗脱
免疫放射分析法与放射免疫分析法的主要区别
免疫放射分析法标记抗体,放射免疫分析法标记抗原。此外,待测抗原是与过量(放免为限量)抗体结合
放射免疫分析法原理及操作注意事项
放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。一、竞争性RIA,又称传统RIA主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag +已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物AgAb+未知抗原与抗体复合物A
放射免疫分析(RIA)中影响标准曲线建立的因素(二)
(七)其它试剂盒必须在有效期内使用,不同批号的试剂不得混用。试剂盒从冰箱取出后,应平衡至室温后使用。加样前必须彻底颠倒混匀所有试剂,特别是分离剂。所有冻干品复溶10-15min后方可使用。二、加样过程(一)人员操作人员上岗前要经过基础理论和基本操作技术培训,包括通过加样一致性考核,加样误差要0.99
放射免疫分析(RIA)中影响标准曲线建立的因素(一)
放射免疫分析(RIA)是由美国生物学家Yalow和Berson于1959年创建的一种体外放射分析技术,该技术有其结果可靠。简便易行,成本低廉,高灵敏度,高特异性的优点。其超微量测定可达ng至pg水平,目前可测物质已达300余种,对临床的诊断和治疗起着积极而重要的作用。在实际工作实践中,标准曲线的制做
放射免疫分析法测定重组人白细胞介素2
白细胞介素-2(interleukin rhlL-2,IL-2)主要由活化的T淋巴细胞分泌的一种糖蛋白,是调节机体免疫功能最主要的淋巴因子之一。天然IL-2含有糖基,基因重组IL-2不含糖基,由133个氨基酸组成,相对分子质量为15KD。IL-2在机体应答,免疫调节和抗肿瘤免疫中具有十分重要的作
基因活性同位素分析实验——人生长激素的放射免疫分析法
实验材料hGH表达质粒试剂、试剂盒洗涤液亲和素包被珠仪器、耗材试管γ计数仪实验步骤1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。2. 加100 μl 培养液或标准品至12 mm×75 mm 圆底试管中。加入100 μl 125I-标记的抗体溶液,混合。加入1颗亲和素包被
用色谱分析法建立兽药残留分析方法的基本步骤
近20年来,兽药(包括药物添加剂)在畜牧业中的应用日益广泛,但是兽药的使用无疑会导致动物体内药物的滞留或蓄积,并以残留的方式进入人体及生态系统。兽药残留对人类及环境的危害主要是慢性、远期和累积性的,如致癌、发育毒性、体内蓄积、免疫抑制、致敏和诱导耐药菌株等。动物性食品中的兽药残留已成为公认的农业和环
放射免疫法的简介
放射免疫法是利用同位素标记的与未标记的抗原,同抗体发生竞争性抑制反应的方法,研究机体对抗原物质反应的发生、发展和转化规律。美国女免疫学家雅洛,因创立了放射免疫法而荣获1977年诺贝尔生理学及医学奖。雅洛1921年生于纽约。父母都是犹太人,她从小酷爱自然科学。在大学里,她热衷于物理学,却致力於医学研究
放射免疫显象的概述
放射免疫显像(radioimmunoimaging,RII)是将针对肿瘤相关抗原的特异性抗体用放射性核素标记后注入人体,随血液流达肿瘤组织,与肿瘤的相关抗原结合,从而使肿瘤组织局部放射性浓聚超过正常组织,然后用体外显像技术获得肿瘤的阳性显像图。放射性核素标记的抗肿瘤及其相关抗原的抗体,用作生物导
放射免疫法的简介
放射免疫法是利用同位素标记的与未标记的抗原,同抗体发生竞争性抑制反应的方法,研究机体对抗原物质反应的发生、发展和转化规律。美国女免疫学家雅洛,因创立了放射免疫法而荣获1977年诺贝尔生理学及医学奖。雅洛1921年生于纽约。父母都是犹太人,她从小酷爱自然科学。在大学里,她热衷于物理学,却致力於医学
兴奋剂促红细胞生成素免疫检测方法的研究——免疫测定法
就临床应用而言,EPO 的测定主要经历了三个阶段:1、生物体内测定法;2、生物体外测定法;3、免疫测定法。其中后期发展起来的免疫测定法是目前应用最广泛的临床检测 EPO 的方法。实验方法原理免疫测定法以抗原、抗体反应的特异性和亲和性为基础,具有快速、灵敏、简易的特点。放射免疫法(RIA)是其中发展较
放射免疫分析的原理
A的基本原理为:放射性同位素标记的抗原(简称“标记抗原”)和非标记抗原(标准抗原或待测抗原)同时与数量有限的特异性抗体之间发生竞争性结合(抗原-抗体反应)。由于标记抗原与待测抗原的免疫活性完全相同,对特异性抗体具有同样的亲和力,当标记抗原和抗体为数量恒定时,待测抗原和标记抗原的总量大于抗体上的有
放射免疫分析的介绍
放射免疫技术为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体反应的特异性相结合的体外测定超微量(10-9~10-15g)物质的新技术。广义来说,凡是应用放射性同位素标记的抗原或抗体,通过免疫反应测定的技术,都可称为放射免疫技术,经典的放射免疫技术是标记抗原与未标抗原竞争有限量的抗体,然后通
放射免疫法的反应原理
放射免疫法是利用同位素标记的与未标记的抗原,同抗体发生竞争性抑制反应的方法,研究机体对抗原物质反应的发生、发展和转化规律。美国女免疫学家雅洛,因创立了放射免疫法而荣获1977年诺贝尔生理学及医学奖。 先把名字拆开来看一看,放射--免疫--测定法,这里头有两个葫芦,第一是放射,也就是有放射性的东
放射免疫分析试剂
1、标准品 标准品是放射免疫分析法定量的依据,由于以标准品的量用来表示被涮物质的量,故标准品与被测物质应当化学结构一致并具有相同免疫活性。标准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外,还应具备稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求,将标准品用缓冲
放射免疫标记技术
一、放射免疫标记技术放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合,以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法,由于此项技术具有灵敏度高 (可检测出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物质,特异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少
放射免疫电泳的定义
中文名称放射免疫电泳英文名称radioimmunoelectrophoresis定 义抗原或抗体带放射性标记的一种免疫电泳,以提高检测的灵敏度。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
放射免疫测定的方法介绍
放射免疫测定是利用放射性同位素的高度灵敏性、精确性与 抗原抗体反应的特异性相结合而创建的一种 在液相内微量物质的定量测定方法。
放射免疫测定的实验特点
放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)是利用放射性核素的测量方法与免疫反应的基本原理相结合的一种放射性核素体外检测法。该法有灵敏度高、特异性强、精确度佳及样品用量少等优点,因而发展迅速。这种测试技术不仅普遍用于测定具有抗原性的蛋白质、酶和多肽激素,而且越来越广泛地用于测定许多本身无
放射免疫治疗的方法介绍
中文名称放射免疫治疗英文名称radio-immunotherapy定 义应用放射性核素标记的单克隆抗体治疗肿瘤的方法。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),肿瘤免疫(三级学科)
放射免疫分析的标记方法
125I 标记化合物的制备方法可分为直接标记和间接标记两类方法。(1)直接标记法最常用于肽类、蛋白质和酶的碘化标记,其原理是采用化学或酶促氧化反应直接将125I结合于被标记物分子中酪氨酸残基或组胺残基上。其特点是标记方法操作简便,容易将较多的125I结合到被标记分子上,得到比放射性较高的标记物。但该
放射免疫测定技术的原理
放射免疫技术是基于竞争性结合反应原理的放射免疫分析。它是以放射核素标记抗原(*Ag)与反应系统中未标记的抗原(Ag)竞争特异性抗体(Ab)的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。用反应式表示为: 式中,*Ag 为同位素标记的抗原,与未标记的抗原 Ag 有相同的免疫活性,两者以竞争性的方式与特
放射免疫分析的常用方法
放射免疫分析常用的有液相法和固相法两种: (1)液相法: 将待检标本(例如含胰岛素抗原)与定时的同位素标记的胰岛素(抗原)和定时的抗胰岛素抗体混合,经一定作用时间后,分离收集抗原抗体复合物及游离的抗原,测定这两部分的放射活性,计算结合率。在反应系统中,待检标本的胰岛素抗原与同位素标记的胰岛素
放射免疫分析的原理(三)
RIA法的影响因素 pH和离子强度;反应温度,温度一般为37℃,也有45℃,室温,4℃ 冰箱;反应时间,操作中的注意事项:戴手套、防护镜等,将试剂盒从冰箱中取出,室温下放置30 min方可使用。 (1)编号:第一排是标准管:根据标准品浓度由低到高A,B,C,D,E,F,G……;第二排是被测样
放射免疫测定的技术特点
放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA)是利用放射性核素的测量方法与免疫反应的基本原理相结合的一种放射性核素体外检测法。该法有灵敏度高、特异性强、精确度佳及样品用量少等优点,因而发展迅速。这种测试技术不仅普遍用于测定具有抗原性的蛋白质、酶和多肽激素,而且越来越广泛地用于测定许多本身无
放射免疫法的应用领域
放射免疫法包括两个方面的技术:第一是生物学方面的。它利用特殊抗体的反应,甄别所给定的有机物质;第二是物理学方面的。它将有放射性的原子引入有机物质中,给这些有机物质打上记号。放射免疫法,是一种灵敏度高、较简便的测量法,几乎可测定生物体内任何物质,包括生物体本身分泌的各种激素,病人口服或注射的各种药
放射免疫分析的常用方法
(1)液相法:将待检标本(例如含胰岛素抗原)与定时的同位素标记的胰岛素(抗原)和定时的抗胰岛素抗体混合,经一定作用时间后,分离收集抗原抗体复合物及游离的抗原,测定这两部分的放射活性,计算结合率。医学/教育网搜集整理在反应系统中,待检标本的胰岛素抗原与同位素标记的胰岛素竞争夺战 性与胰岛素抗体
放射免疫显象的检查过程
针对肿瘤相关抗原的特异性抗体用放射性核素标记后注入人体,随血液流达肿瘤组织,与肿瘤的相关抗原结合,从而使肿瘤组织局部放射性浓聚超过正常组织,然后用体外显像技术获得肿瘤的阳性显像图。