血清γ-球蛋白的提纯
实验概要应用相同浓度硫酸铵反复盐析法将血清中γ-球蛋白及α、β球蛋白分离,最后用透析法或凝胶过滤法除盐,即可得比较纯的γ-球蛋白。主要试剂1.兔血清2.PBS(磷酸盐缓冲生理盐水,Phosphate Buffer Saline)用0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.2)配制的0.9%NaCl溶液。3.pH7.2饱和硫酸胺溶液:用浓氨水将饱和硫酸胺溶液调到pH7.2。4.葡聚糖凝胶G-25。5.纳氏试剂(Nesser's reagent) 溶解碘化钾30克于蒸馏水20毫升内,再加入碘22.5克振摇使其溶解。于此碘液内加入纯汞30克,用力振摇之,待温度升高时,将烧瓶浸于冷水内,并继续摇匀,直到暗棕碘色转变为淡黄绿色为止。将上层溶液倾出,置于量筒内,并以蒸馏水少许洗涤烧瓶,将洗涤液一并倾入。吸取此配成之溶液1~2滴,加入1%可溶性淀粉溶液1毫升内,以试验有无多余的碘......阅读全文
简述血清球蛋白(G,GL0)的临床意义
(1) 升高见于: ① 感染引起机体免疫反应增强:慢性病毒性肝炎、活动性结核病、黑热病、血吸虫病、疟疾、马蜂、亚急性细菌性心内膜炎等。 ② 自身免疫性疾病时的机体免疫功能亢进:系统性红斑狼疮(SLE)、硬皮病、风湿热、类风湿性关节炎、肝硬化等。 ③ 多发性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、部分恶性肿
血清免疫球蛋白测定的抽血后注意事项
1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。 2、按压时间应充分。 各人的凝血时间有差异,有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定3
一、试剂和器材1.试剂(1)消化液30%过氧化氢与硫酸与水的比例为3:2:1,即在1 份的蒸馏水中缓慢加入2 份的硫酸,待冷却后,将其加到3 份的过氧化氢中。临用时配制。(2) 催化剂 硫酸铜(CuSO4·5H2O )与硫酸钾(K2SO4)以1 : 3 配比研磨混合。(3)40 %氢氧化钠溶液 (4
血清免疫球蛋白G亚类的注意事项
总之,对于所有患反复感染、支气管哮喘和(或)慢性阻塞性支气管炎的儿童都应考虑IgG亚类缺陷的可能性。并且,对于所有高危感染的免疫缺陷病人,如骨髓移植等病人,都需测IgG亚类水平。
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定6
VI 凝胶层析法分离纯化蛋白质一、目的了解凝胶层析的基本原理,并学会用凝胶层析分离纯化蛋白质。二、原理凝胶层析也称凝胶过滤、凝胶过滤层析、分子排阻层析和分子筛层析。凝胶是具有一定孔径的网状结构物质,凝胶层析是一种分子筛效应,主要用于分离分子大小不同的生物大分子以及测定其相对分子质量。相对分子质量小的
血液中血清蛋白和其他球蛋白的分离原理
实验原理带电质点在电场作用下,带正电荷的移向负极,带负电荷的移向正极,这种现象称为电泳。蛋白质分子具有许多可解离的酸性基团和碱性基团,在一定的pH条件下,它会解离而带电,在某一pH下,蛋白质分子中所带的正电荷数恰好等于负电荷数,即分子静电荷等于零。此时蛋白质分子在电场中不移动,溶液的这一PH值称为该
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定1
血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律,经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织,也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品,有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。一、血液样品(一)采血测
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定2
二、组织样品在生化实验中,经常利用离体组织研究各种物质代谢途径和酶系的作用。或者从组织中分离、纯化核酸、酶以及某些有意义的代谢物质进行研究。但是,在生物组织中,因含有大量的催化活性物质,离体组织的采集必需在冰冷条件下进行,并日需尽快完成测定。否则其所含物质的量和生物活性都将发生变化。一般采用断头法处
简述血清免疫球蛋白G(IgG)的临床意义
(1)升高: ①结缔组织病:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、硬皮病、Sjö;gren综合征(斯约格伦氏综合征、干燥综合征)等。 ②IgG型多发性骨髓瘤、原发性单克隆丙种球蛋白血症。 ③肝脏病:慢性病毒性活动性肝炎、隐慝性肝硬化、狼疮样肝炎等。 ④传染病:结核、麻风、黑热病、传染性
血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定(凝胶层析法)1
目的要求1.了解蛋白质分离提纯的总体思路。2.掌握盐析法、分子筛层析法、离子交换层析等实验原理及操作技术。 实验原理 血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类:清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白,其中γ-球蛋白含量约占16%,100ml血清中约含1.2g左右。
血清免疫球蛋白的提取分离、纯化及鉴定5
(五)操作1.直接测定法在紫外分光光度计上,将未知的蛋白质溶液小心盛于石英比色皿中,以生理盐水为对照,测得280nm 和260nm 两种波长的吸光度。将280nm 及260nm 波长处测得的吸光度按下列公式计算蛋白质浓度。C = 1.45A280 — 0.74A260式中C:蛋白质质量浓度(mg/m
简述血清免疫球蛋白G(IgG)的正常值
免疫比浊法、单向免疫扩散法: 脐带: 7.6-17g/L (760-1700mg/dl)。 新生儿: 7-14.8g/L (700-1480mg/dl)。 0.5-6个月:3-10g/L (300-1000mg/dl)。 6个月-2岁:5-12g/L (500-1200mg/dl)。
血清免疫球蛋白测定的抽血前注意事项
1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 3、抽血时 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难; 有晕血史者请提前说明,另作特别安排
血清白蛋白和球蛋白的分析测定-盐析法
【目的与原理]】掌握血清白蛋白和球蛋白测定的原理和方法,并用盐析法测定水产动物血清中白蛋白和球蛋白的含量。血清中含有多种不同成分的蛋白质,主要为白蛋白和球蛋白。用盐析法沉淀血清中球蛋白,用双缩脲法测定上清液中白蛋白,同时测定血清总蛋白。血清球蛋白的量从两者的差值求得。【[试剂与器材】试剂: 1、
血清免疫球蛋白(Immunoglobulin,IgG)的分离制备—盐析法
(一)原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称IgG)的主要成分之一,分子量约为15万~16万,沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种,要从血浆中分离出IgG,首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序,使IgG在样品中比例大为
血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定(凝胶层析法)2
(5)20%磺基水杨酸溶液(6)奈氏(Nessler)试剂应用液贮存液;称取碘化钾(KI)7.58g于250ml三角烧瓶中,用蒸馏水5ml溶解,再加入碘(I2) 5.5g溶解,加7~7.5gHg用力振摇10min(此时产生高热,须冷却),直至棕红色的碘转变成带绿色的碘化汞钾液为止,过滤上清液倾入
试剂提纯的方法介绍
由于化学试剂品种多,每种试剂不可能同时都具有多种品级和规格。在实际工作中,有时候不可能得到所需纯度或品级的试剂。因此,如何提纯试剂,对用户来说也十分重要。试剂提纯的方法很多,对于不同的试剂,应选择合适的提纯方法。目前,常用的有以下几种:蒸馏 对于易挥发的液体或固体试剂,如各种常用的无机酸、有机溶剂等
分离提纯的方法分类
分离提纯的方法不拘泥于物理变化还是化学变化。在可能的条件下使样品中的杂质或使样品中各种成分分离开来的变化都可以使用。常用的分离提纯的方法有以下几种:1.分级结晶法。这种方法常用加热蒸发溶液,控制溶液的密度,使其中一部分溶质结晶析出。经反复的操作可以达到分离提纯的目的。2.分步沉淀法。这种方法常选用适
萃取与提纯的区别
萃取又称溶剂萃取或液液萃取(以区别于固液萃取,即浸取),亦称抽提(通用于石油炼制工业),是一种用液态的萃取剂处理与之不互溶的双组分或多组分溶液,实现组分分离的传质分离过程,是一种广泛应用的单元操作.利用相似相溶原理,萃取有两种方式:液-液萃取,用选定的溶剂分离液体混合物中某种组分,溶剂必须与被萃取的
试剂的提纯方法介绍
①蒸馏。对于易挥发的试剂,如常用的无机酸,有机溶剂等是最常用的提纯方法。根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。②升华。对于某些易升华的试剂,如碘、萘等,此法最简便。③重结晶。适用于大多数固体试剂的提纯,其关键是选择好合适的溶剂。④溶剂萃取。无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中,均可达到提纯的目的。⑤离子
物质分离提纯的原则
物质分离提纯的原则在进行物质的分离提纯时,选择试剂和实验措施应遵循以下四个原则:1、不增(不能引入新杂质)。2、不减(不减少被提纯试剂)。3、易分离。4、易复原。
稀土提纯的方法介绍
除Pm以外的16个稀土元素都可以提纯到6N(99.9999%)的纯度。由稀土精矿分解后所得到的混合稀土化合物中,分离提取出单一纯稀土元素,在化学工艺上是比较复杂和困难的。其主要原因有二个,一是镧系元素之间的物理性质和化学性质十分相似,多数稀土离子半径居于相邻两元素之间,非常相近,在水溶液中都是稳定的
提纯的方法有哪些
常见提纯方法 过滤 利用物质的溶解性差距,将液体和不溶于液体的固体分离开来的方法。 结晶 利用溶剂对被提纯物质及杂质的溶解度不同,可以使被提纯物质从过饱和溶液中析出,而让杂质全部或大部分仍留在溶液中,从而达到提纯的目的。 蒸馏 利用互溶的液体混合物中各组分的沸点不同,给液体混合物加热
分析工作试剂的提纯
在分析工作中遇到所用试剂纯度和杂质含量达不到要求时,要采取对试剂进行提纯,尤其是用量较多的试剂如各种酸的提纯。本节只介绍蒸馏法提纯。①盐酸的提纯用硬质玻璃或石英蒸馏器,用高纯水(电阻率〉3MΩ・cm)将优级纯盐酸(或分析纯)按盐酸:水=1 : 1的比例将1.5L放入2L蒸馏器中,用可调变压器调节加热
萃取与提纯的区别!
萃取又称溶剂萃取或液液萃取(以区别于固液萃取,即浸取),亦称抽提(通用于石油炼制工业),是一种用液态的萃取剂处理与之不互溶的双组分或多组分溶液,实现组分分离的传质分离过程,是一种广泛应用的单元操作。 利用相似相溶原理,萃取有两种方式: 液-液萃取,用选定的溶剂分离液体混合物中某种组分,溶剂必须与被
石墨的提纯方法介绍
石墨深加工产业的前提是提纯,石墨提纯是一个复杂的物化过程,其提纯方法主要有浮选法、碱酸法、氢氟酸法、氯化焙烧法、高温法
血清β2微球蛋白测定方法与参考值
【测定方法】 β2m测定过去以RIA法为主,20世纪80年代以后有EIA法、免疫浊度分析等方法。 【参考值】 1.28~1.95mg/L。
免疫学实验血清免疫球蛋白测定介绍
血清免疫球蛋白测定介绍: 免疫球蛋白(Ig)具有抗体活性,能与相应抗原专一结合,是体内普遍存在的一类蛋白质。血清免疫球蛋白测定正常值: IgG 7.6-16.6g/L;IgA 0.71-3.35g/L;IgM 0.48-2.12g/L;IgD 0.01-0.04g/L;IgE 0.001-0.0
生化检测项目血清球蛋白(G,GL0)介绍
血清球蛋白(G,GL0)介绍: 血清球蛋白是多种蛋白质的混合物,包括含量较多具有防御功能的免疫球单板和补体、多种糖蛋白、金属结合蛋白、多种脂蛋白、酶类等。球蛋白的含量一般有总蛋白减去白蛋白得到。血清球蛋白(G,GL0)正常值: 乙醛酸比色法:20-30g/L (2.0-3.0g/dl)。血清球蛋
临床化学检查方法介绍血清结合球蛋白介绍
血清结合球蛋白介绍: 触珠蛋白又称结合珠蛋白,是肝脏合成的一种α2球蛋白,约占血浆总蛋白的1%,能与血浆中的血红蛋白结合形成稳定的复合物。当发生溶血时,血浆中游离血红蛋白增多,与之结合的珠蛋白增多,而血浆触珠蛋白降低,这是一个很敏感的血管内溶血的指标。血清结合球蛋白正常值: