MS培养基配制标准操作程序
实验概要建立一个MS培养基配制标准操作程序,使操作过程标准化。实验步骤1 MS培养基母液的母液的配制 由于组培的植物不同,需要配制不同的培养基,为减少工件量,可把药品配成浓缩液。有些微量元素和有机成分成分浓度极低,因此,先配制成母液的母液。建议浓度如下表: 药品名称配制的终浓度配制50ml的总质量(g)烟酸0.01g/ml0.5VB60.1g/ml5甘氨酸0.2g/ml10NaMoO4.2H2O0.05g/ml2.5CuSO4.5H2O0.05g/ml2.5KI0.1g/ml5H3BO30.062g/ml3.1MnSO4. H2O0.169g/ml8.45ZnSO4. 7H2O0.172g/ml8.6CoCl.6H2O0.05g/ml2.5VB10.1g/ml5 ......阅读全文
特殊培养基
选择性培养基 选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。 酵母菌富集培养基 葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1
显色培养基
显色培养基是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。这些相应的显示底物是由产色基团和微生物部分可代谢物质组成,在特异性酶的作用下,游离出产色基团显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种作出鉴定。优点:将菌株分离,鉴定结合在一起,无需对菌株进行分离纯化和进一
细菌培养基
Preparation of LB Plate (Dr. Chastain)prepare LB plate with or without antibioticsBacterial Culture Media Recipes (WUGSC) M9 Plate Supplement (Gottsch
酿酒酵母培养基的制备实验——SC培养基
试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或
液体培养基的控制培养基的条件介绍
(1) 控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。各大类微生物要求的适宜生长pH范围不同。如霉菌与酵母菌一般为5.0-6.0, 细菌为6.5-7.5.放线菌为7.5-8.5.培养基的pH与其C/N有极大关系。C/N高的培养基,例如培养各种真菌的培养基,经培养后其pH明显下降;相反
选择培养基和鉴别培养基的区别
鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。选择培养基:在培养基中加入抑制
关于固体培养基形式—平板培养基的简介
培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。 平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定
衣原体培养基-鸡胚培养基的配制
[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有
关于固体培养基的形式—快速制作斜面培养基和平板培养基的介绍
有一种简捷快速制备斜面培养基的方法,现介绍如下: 制作培养基斜面,传统的方法是将试管每10支为一组扎成一捆,高压灭菌后,一支一支地摆成斜面,操作比较烦琐,占用面积又多,造成诸多不便。 1、将胶合板截成长18厘米(与试管长度相等或略短)、宽9厘米(比并排5支试管直径的总和略窄)的小块备用。
天然培养基与合成培养基的区别在哪?
天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培
简介烟草培养基愈伤组织诱导培养基制备
以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NA
使用适应性培养基或条件培养基制备
(1)培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。(2)离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。(3)滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2分培养基混合使用。
合成培养基配制实验——无血清培养基的制备
实验材料ECM试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材滤膜实验步骤1. 选择适宜的培养基质(ECM),先制备成贮存干液;2. 使用前,贮存干液用高纯度的蒸馏水稀释成0.1 mg/ml 浓度的使用液;3. 使用液用0.22 μm 孔径的微孔滤膜过滤除菌;4. 用吸管吸取使用液,均匀涂于消毒灭菌的细胞培养器
培养基的配制
一、配制用水 培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的 双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基 培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。
Skirrow氏培养基
成分 蛋白胨 15.0g 胰蛋白胨(tryptone) 2.5g 酵母浸膏 5.0g 氯化钠 5.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1
无血清培养基
细胞培养(cell culture)就是从机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和增殖。体外细胞培养最常见的是合成培养基如DMEM,F12,MEM等混合一定比例的牛血清进行培养;但是大量使用牛血清制品有许多缺陷,如,动物源成分,无法用于临床研究;成分复杂
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
细菌培养基配方
1、细菌培养基配方一 牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 ,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 100毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸
培养基的配制
一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HC
培养基的灭菌
一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。 某些畏热成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽
如何选用培养基?
选择培养基没有一定标准,有几点建议可供参考: 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅文献,或在购买细胞株时咨询。本单位惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选1640;进行细胞杂交、基因转移实验,可选择I
庖肉培养基
成分 牛肉浸液 1000mL 蛋白胨 30g 酵母膏 5g 磷酸二氢钠 5g 葡萄糖 3g 可溶性淀粉 2g 碎肉渣适量 pH7.8制法 1 称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g,加蒸馏水1000mL和1mo
培养基的配制
培养基的配制:1、称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。2、加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断
无血清培养基
无血清培养基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作
大米粉培养基
制法 将不含荧光物质的籼米挑去杂质和变质米粒,磨成粗粉,分装后121℃高压灭菌20min。用途 霉菌产毒用。
卵黄琼脂培养基
成分 1 基础培养基 肉浸液 1000mL 蛋白胨 15g 氯化钠 5g 琼脂 25~30g pH7.5 2 50%葡萄糖水溶液。 3 50%卵黄盐水悬液。制法 制备基础培养基,分装每瓶100mL。121℃高压灭菌15min
什么是培养基?
培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基的制备
目的要求 1.掌握一般培养基制备的原则和要求。 2.熟悉一般培养基制备的过程。 操作步骤 一、培养基的制备原则和要求 培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择
LB培养基配制
将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
培养基灭菌方法
1.灼烧灭菌将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内,在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要