简介烟草培养基愈伤组织诱导培养基制备

以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水,加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0。加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化,然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。 烟草叶片愈伤组织诱导取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种5小片,一共接种6瓶。接种后的三角平置于24条件下黑暗培......阅读全文

简介烟草培养基愈伤组织诱导培养基制备

  以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NA

愈伤组织的诱导形成和形态发生

从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。1、起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核

胡萝卜愈伤组织诱导标准操作程序

实验概要诱导胡萝卜愈伤组织实验材料胡萝卜直根实验步骤1. 用清水洗净胡萝卜直根,用小刀削去表皮和顶部。2. 将其在75%的酒精中消毒5min.3. 50%的次氯酸钠消毒30min,120rpm。4. 无菌水漂洗5遍,再用无菌水浸泡30min.5. 最后用无菌水漂洗3遍..6. 消毒好的胡萝卜直根,切

影响花药培养的主要因素

花药培养是用植物组织培养技术,把发育到一定阶段的花药,通过无菌操作技术,接种在人工培养基上,以改变花药内花粉粒的发育程序,诱导其分化,并连续进行有丝分裂,形成细胞团,进而形成一团无分化的薄壁组织——愈伤组织,或分化成胚状体,随后使愈伤组织分化成完整的植株。影响花药培养的因素包括以下5个方面。1、基本

简介器官分化及植株再生培养和愈伤组织诱导的总体情况

  1、器官分化及植株再生培养  将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照,温度20-22℃条件下培养3周,统计愈伤组织再生植株情况。  2、愈伤组织诱导的总体情况  烟草愈伤组织诱导培养4周后,愈伤组织基本形成,即排除因生长时间不够而未形成愈伤的情况。具体情况见表一中所示。6瓶培养

愈伤组织的分化

一、目的要求了解愈伤组织再分化原理,学习诱导愈伤组织分化的方法。二、基本原理愈伤组织在离体培养过程中,组织和细胞的潜在发育能力可以在某种程度上得到表达,伴随着反复的细胞分裂,又开始新的分化。将脱分化的细胞团或组织经重新分化而产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官的一种现象,称为再分化。在一定的培养

愈伤组织的概念

愈伤组织(callus)是指原植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。

植物愈伤组织在诱导成株培养方向的应用

由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液(1~10%)、次氯酸钠溶液(0.5~10%)、升汞溶液(0.01%)、乙醇(70%)或过氧化氢(3~10%)等处理后,再用无菌水反复冲洗至净,然后在无菌室内,将所取的组织迅速培养在固体培养基上。在适宜的条件下,受

愈伤组织的形成过程

从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核酸的

植物愈伤组织的培养

愈伤组织是指切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块。愈伤组织培养不仅是一种植物快繁的新手段,同时也是植物改良,种质保存和有用化合物生产的理想途径。 愈伤组织   一、无菌播种 (一)实践目的 学习利用植物种子的胚轴进行愈伤组

植物愈伤组织培养

无菌播种(一)实践目的学习利用植物种子的胚轴进行愈伤组织培养的方法,主要是种子的无菌接种技术。(二)实践地点和时间植物组培室、建议4学时(三)实践用具与材料超净工作台、手术剪、枪状镊、酒精灯、酒精瓶、纱布、高压灭菌锅、电子天平、盛物篮、植物种子、70%酒精、0.1%升汞、ZT、2,4—D、大量元素、

愈伤组织的种类划分

愈伤组织的培养分为继代培养和分化培养。继承培养在外植体上形成以后,愈伤组织的继代培养在已充分发育,但没有出现老化现象之前,应及时从外植体上分离下来,转入继代培养基上进行继代培养。分离是必要的措施,继代培养时若连同外植体就会影响愈伤组织的产量和质量,可能是由于残存的外植体在死亡过程中会产生某些有毒物质

酵母菌培养技术需要什么仪器设备

一般用PDA(土豆和糖)培养基在28-35度培养.发面用的干酵母中就有酵母菌. 培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素.按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马

胚状体的诱导条件

诱导胚状体需要的条件,因植物种类、部位和培养时组织细胞所处状况的不同而异。可有几种情况:①胚状体的产生不需要任何激素和细胞分裂素的,如烟草,曼陀罗和水稻等的花药培养,莳罗和茴香的子房培养,四季橘愈伤组织和欧芹叶柄的愈伤组织培养。②培养中需要生长素或细胞分裂素或二者的组合,如石龙芮的下胚轴,檀香和石刁

愈伤组织与试管苗培养

愈伤组织的培养   一般来说,从接种外植体到出现愈伤组织,需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后,由于培养基中的营养成分已接近耗尽,必须更换培养基,进行继代

愈伤组织的培养形成过程

从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。 起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核酸

胡萝卜愈伤组织的建立

一、 材料和设备 超净工作台或者无菌接种室 培养基 N 6 +2 mg/L 2,4-D 带有吸水纸的成套的培养皿,无菌水 解剖刀、枪型镊子、刀片 无病虫的胡萝卜直根数十个 消毒剂  0.2%的升汞溶液 70%酒精、95%酒精及70%的酒精棉球

什么是植物的愈伤组织

愈伤组织(callus)原指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织.它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞.在植物体的创伤部分,愈伤组织可帮助伤口愈合;在嫁接中,可促使砧木与接穗愈合,并由新生的维管组织使砧木和接穗沟通;在扦插中,从伤口愈伤组织可分化出不定根或不定芽

植物的愈伤组织是什么

愈伤组织是一团没有分化的可持续旺盛分裂的细胞团,是组织培养中的一种组织形态。接种外植体在愈伤组织诱导培养基上,经过一段时间的培养即可形成无序结构的愈伤组织块。所有植物都有被诱导产生愈伤组织的潜能,但是不同植物种类诱导形成愈伤组织的难易程度差别很大,且所需激素浓度等诱导条件也存在差异。

愈伤组织的功能用途

在离体培养中,接受各种因素的作用,细胞都会分裂进入脱分化,经持续分裂增生成细胞团,进一步发展成为不受亲本植株影响的愈伤组织。愈伤组织培养作为一种最常培养形式,除茎尖分生组织培养和一部分器官培养以外,其他几种培养形式最终都要愈伤组织才能产生再生植株,而且,愈伤组织还常常是悬浮培养的细胞和原生质体的。因

一文了解愈伤组织

  愈伤组织(callus)是指原植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。在植物体的创伤部分,愈伤组织可帮助伤口愈合;在嫁接中,可促使砧木与接穗愈合,并由新生的维管组织使砧木和接穗沟通;在扦插中,从伤口愈伤组织可分化出不定根或

愈伤组织的主要类型介绍

紧密型(compact):愈伤组织内无大的细胞间隙,细胞间被果胶质紧密结合,不易形成良好的悬浮系统。松脆型(friable):愈伤组织内有大量大的细胞间隙,细胞排列无次序,容易分散成单细胞或少数几个细胞组成的小细胞团,是进行悬浮培养的最合适的材料。两类愈伤组织通过激素调节可互相转变。其方法是:加入高

根癌农杆菌介导的植物转化-叶盘转化法

一、原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应,向植物受伤组织集中。经共培养后,受伤部位的化学诱导物透过农杆菌的细胞膜使Ti质粒上的Vir基因活化。Vir基因产物使Ti质粒上的T-DNA进入植物细胞,并整合到植物核基因组中。插入在T-DNA左右边

愈伤组织和试管苗的培养

一、愈伤组织的培养 一般来说,从接种外植体到出现愈伤组织,需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后,由于培养基中的营养成分已接近耗尽,必须更换培养基,进行继代培养。二

胚性愈伤组织的主要类型

根据组织学观察、外观特征及其再生性、再生方式等,愈伤组织分成两大类:胚性愈伤组织(embryonic callus,EC)和非胚性愈伤组织(non-embryonic callus,NEC)。一般胚性愈伤组织质地较坚实,颜色有乳白色或黄色,表面具球形颗粒,其生长缓慢;从细胞学来看,胚性愈伤组织由等直

植物细胞的脱分化和分化培养

一、实验原理 分化了的植物根、茎、叶细胞往往具有全能性,在一定条件下进行离体培养,给于一定的营养与激素,可以脱分化为愈伤组织,由愈伤组织制备成细胞悬浮液,在一定的条件下经振荡培养,逐渐形成具有两极性的胚状体,经过进一步的分化培养,给于不同的营养和激素成分,又可以生出完整的

烟草转化实验流程

实验概要烟草细胞农杆菌转化实验实验材料烟草细胞:BY-2实验步骤1. BY-2 细胞培养BY -2 细胞悬浮培养在摇床上,避光,温度260 C,转速130r pm,每7天将 1m l 细胞转入20m l新鲜的液体培养基中继续培养。BY -2 愈伤组织生长在固体培养基上,每3-4周继代一次。转基因的悬

植物组织培养中愈伤组织的形成和形态发生

在植物组织培养中,主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生,使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞,通过脱分化形成愈伤组织,并由愈伤组织再分化形成植物体。愈伤组织的形成 从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细

叶盘转化法

实验概要本实验介绍了根癌农杆菌介导的植物转化-叶盘转化法的原理及操作步骤。了解根癌农杆菌介导的植物基因转化的方法和用途,掌握叶盘转化法的基本原理和操作。实验原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应,向植物受伤组织集中。经共培养后,受伤部位的化学

关于体细胞杂交的基本内容介绍

  植物体细胞杂交是在原生质体培养技术的基础上,借用动物细胞融合方法发展起来的一门新型生物技术。植物体细胞杂交的过程包括原生质体的制备,原生质体融合的诱导,杂种细胞的筛选和培养,以及杂种植株的再生与鉴定等环节。下面以烟草和大豆的体细胞杂交为例,简要介绍植物体细胞杂交的过程。  原生质体制备选取烟草植