脂肪酶活性测定方法

方法:1、粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。2、实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。3、酸价的测定酸价是指中和1 mol游离脂肪酸所需NaOH的毫克数, 它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价, 参照文献[ 3, 4 ]中所使用的方法, 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液, 摇匀, 终止反应, 并加入2滴酚酞指示剂, 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色, 在30 s内不消失为终点, 记录消耗的NaOH溶液毫升数(V ) 。用同样的方法测定空白值, 每个试验重复两次, 以平均值作为测定结果。酸价按下式计算:X = C (V - V0 ) ×40 /M式......阅读全文

酶活性和质量测定方法及其评价

酶测定包括酶量测定和酶活性测定。酶在体液中含量极微,因此临床上大都采用酶活性测定,以酶活性间接表示酶量。酶活性的概念:酶活性指酶催化反应的能力即酶促反应速度。反应速度是指在规定条件下单位时间内底物的减少量或产物的生成量。1.酶活性测定方法(1)按反应时间分类法1)定时法:(两点法) 通过测定酶反应开

酶活性测定的常见方法总结

(1)定时法:(两点法)通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,通过加入强酸、强碱、蛋白医学教育网整理沉淀剂等,使反应完全停止(也叫中止反应法)。加入试剂进入化学反应呈色测出

关于溶酶体酶活性的测定方法介绍

  溶酶体贮积症的诊断是通过酶活性测定或测代谢产物进行的。过去测酶活性的方法与步骤比较复杂,底物用量较大。1980年后荷兰 Erasmus大学遗传代谢病试验室应用微量酶活性测定法获得成功。它使用了新的人工合成底物,提高了实验的灵敏度及准确性, 简化了实验步骤。1990年中国医学科学院基础医学研究所医

β葡萄糖苷酶活性测定方法

 β-葡萄糖苷酶的活性测定方法很多,常见反应底物有对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(pNPG)、纤维二糖、水杨苷等。由于酶与pNPG作用产生的对硝基苯可用分光光度法在400 nm处测定, 方法简单、反应快速、反应活性大,所以大多数实验采用pNPG作为底物的分光光度法测定酶活性。由于测定葡萄糖含量的方法很多

β葡萄糖苷酶活性测定方法

β-葡萄糖苷酶的活性测定方法很多,常见反应底物有对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(pNPG)、纤维二糖、水杨苷等。由于酶与pNPG作用产生的对硝基苯可用分光光度法在400 nm处测定, 方法简单、反应快速、反应活性大,所以大多数实验采用pNPG作为底物的分光光度法测定酶活性。由于测定葡萄糖含量的方法很多,

细胞活性测定

1. 4细胞活性测定原理:根据活细胞线粒体内的脱氢酶可将试剂中的有效成分转变为有颜色的Formazan,并可被酶标仪检测,间接反应活细胞数量。对于细胞增殖、凋亡、生长受抑等可通过细胞数量间接得知的生物学改变,采用细胞活性测定可以提供可应用和参考的数据。应用:用于生物活性因子的活性检测、大规模药物筛选

PPO活性测定

一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.

PPO活性测定

一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.

PPO活性测定

一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.

PPO活性测定

分光光度法             实验方法原理 PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO

脂肪酶的生产制备方法

脂肪酶的制备方法有提取法、化学合成法和微生物发酵法。提取法资源有限、工艺复杂、产量低;化学合成法成本太高;微生物发酵法的应用前景要远远大于提取法和化学合成法,它不受环境影响,资源丰富,产酶周期短,产物较单纯且成本低,生产上易于管理。商品化脂肪酶主要来源于各种细菌、酵母和真菌等微生物的发酵,有些霉菌可

新药活性一测便知新生物学活性测定方法介绍

  近年来,抗体药物的接连上市和重磅销售引发国内外抗体类生物治疗药物的研发热潮。活性测定是对药物的有效成分和含量以及药物效价的测定,是确保抗体类药物有效性的重要质控指标。现阶段抗体药物的活性分析方法主要是体外( in vitro) 检测,主要有基于细胞、转基因细胞以及新技术应用三方面对抗体药物活性测

酶活性测定的常见方法有哪些?

  (1)定时法:(两点法)  通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。  酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,通过加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等,使反应完全停止(也叫中止反应法)。加入试剂进入化学反应呈色测出底

多酚氧化酶的活性测定方法

常用检压法和分光光度法。前者应用多酚氧化酶(PPO)可催化儿茶素等底物在有氧条件下的氧化还原反应,根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比这一原理,用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法设备简便,但操作复杂,误差较大。后者利用邻苯二酚和D-儿茶素在PPO催化下

酶活性测定法的常用方法介绍

  常用的测定方法有取样法和连续法。  取样法是在酶反应开始后不同的时间,从反应系统中取出一定量的反应液,并用适当方法停止其反应,再根据产物和底物在化学性质上的差别进行分析,求得单位时间内酶促反应的变化量。  连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上的不同,在反应过程中对反应系统添加酶的变性剂以终止

活性炭的吸附能力的测定方法

活性炭是一种优良的吸附剂,为黑色多孔固体,孔隙结构发达,改良后具有巨大的比表面积,一般可高达1000 ̄3000m2·g-1,对气体、溶液中的无机或有机物质及胶体颗粒等都有很强的吸附能力。活性炭对有机物的吸附与活性炭本身的性质、有机物性质、吸附条件都有关系,具体包括活性炭的比表面积。能有效地吸附气体、

角蛋白酶的活性测定方法

活性测定方法角蛋白不溶于水及大部分有机溶剂,使得角蛋白酶活性测定比一般蛋白酶困难。常用测定角蛋白酶的原理是以底物水解后释放的氨基酸的量来确定角蛋白酶的活性。目前测定角蛋白酶的方法主要有三种。一种是直接用角蛋白粉作为底物进行测定,涂国全等(1998)曾以羽毛粉作为测定角蛋白酶的底物。第二种是使用经过修

关于血浆肾素活性测定的方法介绍

  ①基础状态:受试者进普通饮食,采血前卧床过夜或卧位1.5~2h后再采血,以EDTA-Na2抗凝。  ②激发状态(速尿+立位):在基础状态下采血后,给受试者注射呋塞米(速尿),按0.7mg/kg体重比例,最大剂量不超过50mg,保持立位,活动2h(暂禁食、禁水),2h后采血,抗凝剂同前。

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

转氨酶活性的测定

(一)原理转氨酶是体内重要的一类酶。转氨酶催化α–氨基酸的α–氨基与α–酮酸的α–酮基之间的相互转化,从而生成一种新的氨基酸与一种新的酮酸,这种作用称为转氨基作用。它在生物体内蛋白质的合成、分解等中间代谢过程中,在糖、脂及蛋白质三大物质代谢的相互联系、相互制约及相互转变上都起着很重要的作用。在动物机

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

转氨酶活性的测定

实验概要本实验介绍了转氨酶活性测定的原理及方法等。实验原理转氨酶是体内重要的一类酶。转氨酶催化α–氨基酸的α–氨基与α–酮酸的α–酮基之间的相互转化,从而生成一种新的氨基酸与一种新的酮酸,这种作用称为转氨基作用。它在生物体内蛋白质的合成、分解等中间代谢过程中,在糖、脂及蛋白质三大物质代谢的相互联系、

趋化活性测定法测定细胞因子活性

  具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微

趋化活性测定法测定细胞因子活性

  具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微

活性炭水分测定仪使用方法:

水分测定仪为电容式数字显示水份测定仪,采用插入被测物的方法测定活性炭的含水量。操作简单、测试迅速、读数直观、携带方便。主要用于收贮袋包监测,是检验活性炭、煤炭水分的理想设备。大点是方便快捷经济。 水分测定仪性能:1.测量品种和范围:(及其它颗粒状品种)活性炭颗粒及粉末测量范围:5-20%2.精度:0

临床化学检查方法血浆凝血因子Ⅴ活性测定

血浆凝血因子Ⅴ活性测定介绍:  血浆凝血因子Ⅴ活性测定是对人体内血浆凝血因子Ⅴ,即促凝血球蛋白原进行活性测定,是判断肝病患者预后的良好指标。血浆凝血因子Ⅴ活性测定正常值:  正常值 2-4mg/mL。血浆凝血因子Ⅴ活性测定临床意义:  异常结果:凝血因子Ⅴ活性是判断非对乙酰氨基酚诱导的暴发性肝功能衰

临床化学检查方法介绍血浆蛋白C活性测定

血浆蛋白C活性测定介绍:  血浆蛋白C活性测定(pc)是对血浆中的血蛋白进行C活性的测定。血浆蛋白C活性测定正常值:  102.5%±20.1%。血浆蛋白C活性测定临床意义:  异常结果:C活性减低。  常见于先天性PC缺陷,根据C活性测定A和PC,抗体可分为Ⅰ型(PC:Ag与PC:A均减低)和Ⅱ型

抗坏血酸氧化酶活性常用的测定方法

  酶活性以酶活单位(酶活单位为lmin氧化1 g还原性抗坏血酸的酶量)表示,即酶活单位/g鲜重。常用的测定方法是碘量法,这是一种经典的方法,所用仪器简单,准确性高;二是分光光度法,这种方法灵敏度和准确性高,重演性好,用途广,选择性好;三是氧电极分析法,该法灵敏度高,准确性好,但是氧电极对温度变化非

临床化学检查方法介绍凝血因子活性测定

凝血因子活性测定介绍:  凝血因子活性测定是对人体内的各种凝血因子进行活性测定,凝血因子在血液凝固过程中,起着非常重要的作用,测定各个凝血因子的活性,有助于判断血友病的类型,血友病的轻重程度以及某些病理情况下的凝血状况。凝血因子活性测定正常值:  因子Ⅱ:C 、因子Ⅴ:C 、因子Ⅶ:C 、因子Ⅶ:C

角蛋白酶的活性测定方法介绍

  角蛋白不溶于水及大部分有机溶剂,使得角蛋白酶活性测定比一般蛋白酶困难。常用测定角蛋白酶的原理是以底物水解后释放的氨基酸的量来确定角蛋白酶的活性。目前测定角蛋白酶的方法主要有三种,一种是直接用角蛋白粉作为底物进行测定,涂国全等(1998)曾以羽毛粉作为测定角蛋白酶的底物[59]。第二种是使用经过修