罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序

(In situ cell death detection kit-POD法)一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并与连接辣根过氧化酶(HRP,horse-radish peroxidase)的荧光素抗体特异性结合,后者又与HRP底物二氨基联苯胺(DAB)反应产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA断裂,因而没有3‘-OH形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检......阅读全文

TUNEL-法测凋亡技术操作步骤

   TUNEL 法测凋亡操作步骤   一、TUNEL检测原理    TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况,可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。   

一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析

1. 对于贴壁细胞或细胞涂片: a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB

细胞凋亡检测

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技术和

细胞凋亡检测

实验概要细胞凋亡是细胞生物学研究的重要领域。检测药物或某种处理对于细胞细胞的影响时,细胞凋亡检测是一个重要检测指标。以Annexin V联合PI法为例简述细胞凋亡检测。实验原理在细胞凋亡早期,位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V(

细胞凋亡、非程序性和程序性细胞坏死的区别

区别点细胞凋亡非程序性细胞坏死程序性细胞坏死起因生理或病理性病理性变化或剧烈损伤死亡受体与肿瘤坏死因子结合,大多由于病毒侵染细胞膜保持完整,一直到形成凋亡小体破损破损染色质凝聚在核膜下呈半月状呈絮状同左细胞器无明显变化肿胀、内质网崩解同左细胞体积固缩变小肿胀变大同左凋亡小体有,被邻近细胞或巨噬细胞吞

罗氏10亿美元收购基因诊断公司

  瑞士制药巨头罗氏12日宣布,同意以10.3亿美元的价格收购Foundation制药公司56.3%的股权,以推动个性化癌症诊疗和药物开发。后者是一家分子诊断测试研发机构。  根据协议,罗氏将以每股50美元的价格收购Foundation制药公司1560万股现有股票和500万股新发行股票。该报价较后者

细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨

细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测

实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1.  未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞

细胞凋亡与程序性死亡的概念

其实从严格的词学意义上来说,细胞程序性死亡(PCD)与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其变态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡,高等哺

简述细胞凋亡检测

  细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡,乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此,有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技

细胞凋亡的检测

早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期

细胞凋亡的检测

早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法)实验步骤展开晚期细胞凋亡检测(TUNEL法)实验步骤晚晚期细胞凋亡检测(DNA含量分析法)实验步骤展开 

细胞凋亡的检测

早早期细胞凋亡检测(半胱氨酸蛋白酶3法) 早期细胞凋亡检测(磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法) 早期细胞凋亡检测(细胞线粒体膜蛋白法) 早期细胞凋亡检测(Hoechst-PI染色法) 晚期细胞凋亡检测(TUNEL法) 晚晚期

细胞凋亡检测方法

细胞发生凋亡时,不同区域内(如细胞膜、细胞浆、线粒体、细胞核等)会发生不同的生理生化改变。因此,针对不同区域的细胞凋亡检测要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡检测原理:Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca依赖性磷脂结合蛋白,正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

细胞凋亡mRNA检测

研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们

细胞凋亡检测实验

实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关,自身免疫性疾病和

细胞凋亡检测实验

荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法

细胞凋亡检测实验

荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法

罗氏放弃收购美国基因测序公司Illumina

  北京时间1月7日晚间消息,瑞士制药巨头罗氏控股董事长佛朗茨-胡沫(Franz Humer)在接受瑞士《周日报》采访时表示,该公司目前并未考虑竞购美国基因测序公司Illumina。这意味着在罗氏竞购对象中,Illumina已经出局。受到此消息的影响,Illumina的股价在本周一的盘前交易中大

Illumina公司拒绝罗氏57亿美元敌意收购

  北京时间2月8日上午消息,美国基因测序公司Illumina Inc.于当地时间周二回绝了瑞士制药巨头罗氏集团57亿美元的收购出价,称其低估了公司的价值。   Illumina公司第四季财报也好于预期。   Illumina坚持称罗氏的敌意收购未对公司现有和将推出的产品做合适估价,建议股东

罗氏制药公司宣布退出RNA干涉研究领域

新药研发陷入困境罗氏退出RNA干涉研究领域  罗氏公司总部位于瑞士巴塞尔,是全球最大的医药公司之一。据最新出版的《科学》杂志报道,11月下旬,罗氏宣布退出RNA干涉(RNAi)研究领域,这一决定是该公司计划裁减6%的人力即4800人的计划的一部分。  RNA干涉是一种分子生物学上由双

细胞凋亡与细胞坏死以及细胞程序性死亡的区别

细胞凋亡(apoptosis),又称程序性细胞死亡(programmed cell death),是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序性的死亡。与细胞的坏死不同,细胞凋亡不是一种被动的过程,而是一种主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用。它并不是病理条件下自体损伤的一种现

关于细胞凋亡与程序性死亡的解释

  其实从严格的词学意义上来说,细胞程序性死亡(PCD)与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其变态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡,高

罗氏最终放弃收购美国基因测序公司Illumina

  北京时间1月7日晚间消息,瑞士制药巨头罗氏控股董事长佛朗茨-胡沫(Franz Humer)在接受瑞士《周日报》(SonntagsZeitung)采访时表示,该公司目前并未考虑竞购美国基因测序公司Illumina。这意味着在罗氏竞购对象中,Illumina已经出局。受到此消息的影响,Illum

罗氏公司携手齐鲁医院建高效“实验室”

  山东首家“罗氏参考实验室”10日在山东大学齐鲁医院挂牌,山东大学齐鲁医院与世界知名医疗企业罗氏公司将在检测系统标准化、检测服务社会化及新技术研发和应用等方面展开合作。   据介绍,目前我国的一些大型医院由于医科门类覆盖广,百姓就医需求集中,年总检测量不断增大,这对如何快速、准确提供检测报告提出

罗氏诊断购买AvanSci-Bio公司组织分离ZL技术

  美国时间2014年12月10日,罗氏诊断宣布与AvanSci Bio公司签署了一项收购协议,购买与高性能显微组织滑动式切片分离的相关产品,包括仪器、软件及研究人员使用的耗材,以及临床提取、具有较高精确度和纯度用于后续分子分析的特定区域,包括实时PCR、微阵列和测序。  AvanSci

罗氏收购美国实验室大数据公司-Viewics

  分析测试百科网讯 近日,据外媒报道,罗氏收购一家美国软件公司 Viewics 公司,获得其实验室 IT 系统的云端大数据平台,使其能够在诊断操作中增强现有的数字化功能。  Viewics 公司的软件可以将实验室内外的各种 IT 系统大数据集成起来,从而对操作和财务等领域进行深入了解。Viewic

TUNEL分析实验——贴壁细胞的-TUNEL-染色

实验材料细胞试剂、试剂盒PBSTdT 反应混合液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 用无菌镊子将一无菌盖玻片放入 35 mm 培养皿中。2. 将大约 1X104 细胞接种于无菌盖玻片上,培养 24~48 小时。凋亡诱导时,细胞铺满不超过 80%。如细胞贴壁不太好,可以用纤连蛋白、聚赖氨酸或血

细胞凋亡的mRNA检测

研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们