细胞培养常规操作
常规操作(主要内容如下)· Aseptic Technique· Culture Vessels· Cell Counting· Primary Culture· Maintenance of Cell Line · ......阅读全文
细胞培养常规操作
常规操作(主要内容如下)· Aseptic Technique· Culture Vessels· Cell Counting· Primary Culture· Maintenance of Cell Line ·
常规细胞培养方法
原理 1 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱
细胞培养常规方法
. 冻存细胞的复苏应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度,取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内,约5ml左右,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养并内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养。2. 传代:对于贴壁细胞
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切:用眼科剪把
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切:用眼科剪把
妇产科手术操作常规
第一章 妇科手术操作常规 第一节 妇科腹部手术常规 一、术前准备 1.血液: 1)血常规:超过一周者应复查。 2)血小板。 3)出凝血时间。 4)血型。 5)肝功能。 6)肝炎分型。 7)肾功能+离子。 8)梅毒+艾滋病毒
尿常规操作规程
(一)检测原理 通过肉眼观察判断尿外观。透明度,可分为清晰透明、轻度混浊(雾状)、混浊(云雾状)、明显混浊4个等级。 (二)方法学评价 尿色和透明度判断,受主观因素影响。尿透明度还易受某些盐类结晶的影响。临床应用仅作参考。 (三)质量控制 1.使用新鲜尿尿放置时间过长,盐类结晶析出、尿胆原
细胞培养的操作步骤
一、原代培养及其操作步骤原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分,生长缓慢,但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞
PA1细胞培养操作
PA-1细胞培养操作1)复苏细胞:将含有 1mLPA-1细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250p
2A1细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL2A1细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8m
人肾实质细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL人肾实质细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8
WML2细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mLWML2细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8
巨噬细胞培养操作方法
巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、 S774A.1、RAW309Cr.l
大鼠纤维环细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL大鼠纤维环细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约
直流高压发生器常规操作
1、设备连线: 在断开电源的情况下,用提供的线缆将控制箱与倍压筒对应连接好,再连接地线,然后接上电源线。 注意:控制箱、倍压筒、放电棒等所有的地线必须集中在被试品的地线上一点接地,不准相互串接。2、直流高压发生器空载试验检查设备完好性: 在开始试验之前进行空载试验以检查设备的完好性。 检查连
洗板机常规安装、操作与维护
洗板机是医院检验科及实验室的常规设备。以美国伯乐公司生产的1575型洗板机为例,阐述一下洗板机的操作使用、日常管理维护和故障排除,包括了开箱后对仪器的检查、安装,简易操作、编程和一些维护方面的内容。1仪器的安装和第一次开机1.1板机开箱后,先按以下清单对照,核对是否缺少物品,箱内应该包括有如下部件:
常规色谱柱的操作方法
安装1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果
细胞培养细胞培养的操作步骤及注意事项
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5
LLCMK2细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mLLLC-MK2细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入
RNc细胞大鼠皮质细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mLRNc细胞大鼠皮质细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,
细胞培养的操作注意事项
(1)第一次开始培养某种细胞时,一定要在WWW. ATCC. ORG上用该细胞的名称进行检索,可以得到关于该细胞的详细信息,包括需要使用的培养基、血清、添加剂、通常的消化时间、传代时间等。对于特定的细胞(如原代培养的细胞),需要查阅相关文献来获得更准确的培养方法。(2)进入细胞间开始细胞培养时,必须
原代神经细胞培养操作步骤
1.取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍体积的Hank液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。 2.为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等
细胞培养无菌操作技术规范
打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。 4.风淋2分钟。 5.0.1%过氧乙酸水泡手,擦干。 6. 点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培
细胞培养的成败关键——无菌操作
无菌操作是决定细胞培养成败的关键因素,即便使用设备完善的实验室,若实验者粗心大意,操作不规范,也会导致污染。因此,所有操作都要最大可能的保证无菌,每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠。1、实验进行前:在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求,准备各种所需器材和
人关节软骨细胞培养操作
人关节软骨细胞培养操作:1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,
细胞培养无菌操作注意事项
体外培养细胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意,技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。 【培养前准备】在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算
拟南芥细胞培养原理及操作步骤
实验概要了解植物细胞悬浮培养的基本原理,通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。实验原理植物细胞的悬浮培养是指将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。植物离体培养可产生愈伤组织。将疏松型的愈伤组织县浮在液体培养基中并
2B4细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL2B4细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入约 8m
原代神经细胞培养操作步骤
1.取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍体积的Hank液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。 2.为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细胞或细胞团块自然下沉,脂肪等
常规恒温摇床操作7步法
1.恒温摇床翻开右侧电源总开关,整机通电。2. 按温度功能键,然后按参数修正/承认键,再按添加键至3.再按温度功能键,仪器进入温度参数设定状况,显现温度的设定值,一起SV闪亮,按添加键或削减键改动温度至所需数值,zui后按参数修正/承认键予以承认。3.按转速功能键,然后按参数修正/承认键,再按添加键