细胞增殖的检验方法:结晶紫法
结晶紫法1.体外细胞培养结束后,去培养液,加入11%的戊二醛固定,置于振荡器上摇20min。2.固定细胞用去离子水洗涤至戊二醛液洗净。3.置空气或烘箱37℃彻底干燥。4.加入0.1%的结晶紫液对细胞染色,振摇30min。5.用蒸馏水洗涤,至多余的结晶紫液冲洗干净。6.置空气或37℃烘箱中彻底干燥。7.加入10%的乙酸对细胞吸收的结晶紫进行提取。8.1h后在酶标仪上测定光吸收度,波长595nm。......阅读全文
细胞增殖的检验方法:结晶紫法
结晶紫法1.体外细胞培养结束后,去培养液,加入11%的戊二醛固定,置于振荡器上摇20min。2.固定细胞用去离子水洗涤至戊二醛液洗净。3.置空气或烘箱37℃彻底干燥。4.加入0.1%的结晶紫液对细胞染色,振摇30min。5.用蒸馏水洗涤,至多余的结晶紫液冲洗干净。6.置空气或37℃烘箱中彻底干燥。7
结晶紫染色方法
结晶紫染色法测定细胞数: 1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。 2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准
蛋白的生物活性测定方法(结晶紫法和MTT法)
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素,pH7.2)吹打细胞,使形成细胞悬液。进行细胞计数,使细胞数为2~2.5×105个
结晶紫染色
实验材料D-PBSA D-PBSA:甲醇(1:1) 试剂
结晶紫染色
实验材料 D-PBSA D-PBSA:甲醇(1:1) 试剂、试剂盒 甲醇 结晶紫
结晶紫染色
实验材料 D-PBSAD-PBSA:甲醇(1:1)试剂、试剂盒 甲醇结晶紫仪器、耗材 过滤漏斗滤纸回收染液的瓶子实验步骤 1. 吸去并弃掉培养基。2. 用 D-PBSA 冲洗单层细胞,弃掉冲洗液。3. 每 25 cm2 加入 D-PBSA / 甲醇 5 ml,静置 2 min,弃掉 D-PBSA /
结晶紫染色
实验材料D-PBSAD-PBSA:甲醇(1:1)试剂、试剂盒甲醇结晶紫仪器、耗材过滤漏斗滤纸回收染液的瓶子实验步骤1. 吸去并弃掉培养基。2. 用 D-PBSA 冲洗单层细胞,弃掉冲洗液。3. 每 25 cm2 加入 D-PBSA / 甲醇 5 ml,静置 2 min,弃掉 D-PBSA / 甲醇。
结晶紫法对TNF生物活性的检测
实验概要TNF包括TNFα与TNFß两型,它们具有极其相似的生物学活性,在体内外可对一些肿瘤细胞或细胞系起杀伤作用,而对正常细胞则无细胞毒效应。根据这一特点,可利用TNF对敏感靶细胞的细胞毒效应,在体外检测TNF的活性水平,既可检测分泌型TNF(sTNF),也可检测膜结合型TNF(mTNF)。最常用
细胞增殖的检验方法:酸性磷酸酶法
酸性磷酸酶法1.96孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。2.去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3.37℃,孵育1~4h。4.加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5.在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细
细胞增殖的检验方法——酸性磷酸酶法
1、96孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。2、去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3、37℃,孵育1~4h。4、加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5、在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细胞,同样处理
细胞侵袭实验,用结晶紫染色方法如何做
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞② 染色:采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接反映细胞数。结晶紫一染就出来了,我做的时候
细胞侵袭实验,用结晶紫染色方法如何做
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞② 染色:采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接反映细胞数。结晶紫一染就出来了,我做的时候
结晶紫的变色范围
用作酸碱指示剂,pH值0.15(黄)~0.32(绿),pH值1.0(绿)~1.5(蓝),pH值2.0(蓝)~3.0(紫)。
结晶紫溶液如何配制
药典上边说的磷酸盐缓冲液pH7.0的配制方法为取磷酸二氢钾0.68g,加入0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释成100ml即得0.1mol/L氢氧化钠溶液4.000g氢氧化钠加水配制到1000ml容量瓶
用结晶紫染transwell细胞,发现细胞形态不清晰
有可能是因为染色之前,膜没有风干。也有可能是配的结晶紫浓度低了!
细胞增殖的检验方法:BrdU标记法
BrdU标记法1.细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4% FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期。2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。3.弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。4.甲醇/醋
细胞增殖检测:MTT法
细胞增殖检测:MTT法 实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-
细胞增殖检测:MTT法
MTT法,又称MTT比色法,可以用于:检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物,是一种接受氢离子的染
BrdU标记法检验细胞增殖
1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4%FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0 期。 2、终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。 3、弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。 4、甲
做transwell时结晶紫染色的具体
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%结晶紫染色。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接
氯化钠结晶紫增菌液
成分 蛋白胨 20g 氯化钠 40g 0.01%结晶紫溶液 5mL 蒸馏水 1000mL pH9.0制法 除结晶紫外,其他按上述成分配好,加热溶解。约加30%氢氧化钾溶液4.5mL,校正pH。加热煮沸, 过滤。再加入结晶紫溶液,混
结晶紫染色液使用说明
产品内容:1. 结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。2. 结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。3. 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。4. 室温避光保存
细胞增殖的研究方法
细胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法。 EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替T渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确
细胞增殖检测:MTT法心得
MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。一、MTT的原理活细胞有琥珀酸脱氢酶,将MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍园子里已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。二、MTT法检测细胞增殖实验的注意事项1、培养好细胞点板养细胞没
细胞增殖检测方法
一、胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法 胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA特有的碱基,也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程,通过测定细胞的放射性强度,可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二、MTT检测法 MTT检
做transwell时结晶紫染色的具体详细步骤
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%结晶紫染色。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接...
结晶紫指示剂变色范围是多少
样品号 指示剂名称 变色范围 指示剂法的终点体积(ml) 电位法的终点体积(ml) 终点误差(以电位法为准)1 结晶紫 复杂(紫→蓝) 6.37 6.83 -6.7%2 α-萘酚苯甲醇 8.9.8(绿→黄) 6.26 6.40 -2.0%3 喹哪啶红 1.3.2(红→无色) 6.16 6.16 0结
结晶紫指示剂变色范围是多少?
结晶紫(又叫甲基紫,俗名紫药水)pH0.5(绿)~2.0(蓝)。以冰醋酸作溶剂,用酸滴定液滴定碱时,zui常用的指示剂为结晶紫,还有α-萘酚苯甲醇(0.2%冰醋酸溶液,其碱式色为黄色,酸式色为绿色)和喹哪啶红(0.1%甲醇液,其碱式色为红色,酸式色为无色)结晶紫性状:具有金属光泽的暗绿色结晶形
细胞增殖生长方面实验_细胞计数法
实验方法原理细胞计数法:细胞计数法是测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。一般过程为接种21 孔/24 孔板细胞(如用培养瓶时则21 瓶)。分7 组,每组3 孔(或瓶),培养一周,期间逐日检测一组,计数。把7天中的细胞数值绘成图,即为细胞生长曲线。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材培养瓶恒温
结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)的相关介绍
检验原理: 蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素、生长因子和辅酶等其他营养物质;氯化钠维持均衡的渗透;乳糖为可发酵碳水化合物,可作为一种能量来源;3 号胆盐和结晶紫可抑制革兰氏阳性菌的生长;中性红为指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。 外观:干粉培养基为淡红色粉末。 制备好的培养基为紫红色透明固态