关于RNA酶保护试验的个人体会
RNA酶保护试验实际上是很早就出现的技术。在1982年出版的第一版圣经（分子克隆）还没有提到。在1989年出版的第二版中已经出现：7.71 Mapping of RNA with Ribonuclease and Radiolabeled RNA(可参见中译本P383-387）。在2001年出版的第三版中的第七章用了大量的篇幅介绍这一技术，可参见科学出版社的第三版中译本P567-577，其中有RNA酶保护试验的用途、优缺点、所用试剂、操作程序等。根据实验的经历，我感觉到这个方法的的主要缺点如下：1.这个实验的前提是你必须首先要把要研究的基因克隆于一个载体，要清楚插入片段的方向，该载体插入片段两侧有T3、T7或SP6的启动子位点。载体先要用合适的内切酶线性化，选择正确的体外转录试剂盒，转录出要研究的mRNA 的互补链，再纯化。总之RNA探针的制备够麻烦。2.核酸酶消化时，酶量的控制困难，容易消化过头，X片上什么都没有。3.要用放射......阅读全文
沉淀－σ32－和－RNA－聚合酶实验
试剂、试剂盒 聚乙烯亚胺仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)试剂聚乙烯亚胺（PEI)(6% 储液，pH7.9)(配方，见“试剂的配制”，pp.184~189)操作程序1)0.2%DOC 上清 (见 p.153)
沉淀－σ32－和－RNA－聚合酶实验
试剂、试剂盒 聚乙烯亚胺 仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置 聚丙烯酰胺小胶
RNA聚合酶转录终止子
中文名终止子外文名terminator T定义终止子(terminator T)是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。在一个操纵元中至少在结构基因群最后一个基因的后面有一个终止子。作 用转录终止信号
沉淀－σ32－和－RNA－聚合酶实验
试剂、试剂盒聚乙烯亚胺仪器、耗材SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)试剂聚乙烯亚胺（PEI)(6% 储液，pH7.9)(配方，见“试剂的配制”，pp.184~189)操作程序1)0.2%DOC 上清 (见 p.153), 取 6
核糖核酸酶保护分析
一、体外转录在无菌1.5 ml 微型离心管中，结合以下内容：4 ul 5倍转录缓冲液2 ul 0.1 M DTT4 ul 2.5 MM NTP（A，C，G）0.8 ul RNA酶抑制剂（25 U/ul）RNA酶抑制剂（Promega）中100 UM冷UTP1 ul/ug UL线性DNA模板5 ul
RNA干涉实验——采用RNA聚合酶Ⅲ启动子表达siRNA分子
实验方法原理因为哺乳动物细胞不具备低等真核生物细胞所具有的扩增 RNAi 信号的机制，因此人工合成或体外转录的 siRNA 分子在细胞内的作用是瞬时性的，不适合用于进行靶基因的表达受到抑制后细胞表型的长期变化观察，也不适于进行文库的筛选。此外，体外制备 siRNA 分子的成本比较高，而且 siRNA
RNA甲基化酶的基本信息
中文名称RNA甲基化酶英文名称RNA methylase定 义编号：EC 2.1.1.-。催化RNA中碱基甲基化反应的酶。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
RNA聚合酶的反应需要哪些底物？
该酶需要四种核糖核苷酸三磷酸（NTP：ATP、GTP、CTP、UTP）作为RNA聚合酶的底物，DNA为模板，二价金属离子Mg2+、Mn2+是该酶的必需辅因子。其催化的反应表示为：（NMP）n+NTP→（NMP）n+1+PPi。RNA链的合成方向也是5’→3'，第一个核苷酸带有3个磷酸基。其后
DNA酶试验
(1)原理：某些细菌能产生DNA酶，可使长链DNA水解成为寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀，而寡核苷酸则溶于酸。故在DNA琼脂平板上加盐酸后，可在菌落周围形成透明环。 (2)培养基：0.2%DNA琼脂平板。 (3)方法：在DNA琼脂平板上点种待检菌，35℃孵育18~24h，用1mol/L盐
脂酶试验
脂酶试验是检验技师考试的内容，医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 （1）原理：有的细菌产生脂酶，可分解脂肪成游离的脂肪酸。从而使培养基中与脂肪结合形成无色化合物的维多利亚蓝释放出来，呈现深蓝色。 （2）培养基：脂酶培养基（含维多利亚蓝）。 （3）方法：将被检菌接种于上述培养基中，于37℃培
尿素酶试验
尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm
DNA酶试验
DNA酶试验是检验技师考试的内容，医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。（1）原理：某些细菌产生DNA酶，可使长链DNA水解成寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀，寡核苷酸链则溶于酸，所以当在菌落平板上加入酸后，会在菌落周围出现透明环。（2）培养基：0.2%DNA琼脂平板。（3）方法：将被检菌点种于
尿素酶试验
培养基： KH2PO4 0.1g K2HPO4 0.1％ NaCl 0.5g 0.2％酚红水溶液 0.5ml 蒸馏水 100ml pH 7.0高压后加20％的尿素溶液 10.4ml。 方法：与其他菌相同。注意接种量要大，4小时观察结果。
脂酶试验
(1)原理：有些细菌产生脂酶，可分解脂肪成游离的脂肪酸。在培养基中加入维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物，如果脂肪被分解，则维多利亚蓝被释放出来，呈现深蓝色。 (2)培养基：含维多利亚蓝的脂酶培养基。 (3)方法：将待检菌接种于含维多利亚蓝的脂酶培养基中，置37℃孵育24h，观察结
尿素酶试验
尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm
凝固酶试验
(1)原理：凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶，一种是与细胞壁结合的凝聚因子，称结合凝固酶，它直接作用于血浆中纤维蛋白原，使其变为纤维蛋白，发生凝集，包围于细菌外面而凝聚成块，可用玻片法测出;另一种凝固酶是分泌至菌体外，称为游离凝固酶，它能使凝血酶原变成凝血
固氮酶的防氧保护机制介绍
1、固氮菌以较强的呼吸作用迅速地将周围互不干涉中的氧消耗掉，使细胞周围处于低氧状态，保护固氮酶不受损伤。2、在根瘤菌中，以豆血红蛋白与氧气结合的方式使豆血红蛋白周围的氧气维持在一个极低的水平。3、有些固氮菌能形成一个阻止氧气通过的粘液层。
核糖核酸酶保护实验的定义
核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay，RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。
核糖核酸酶保护实验的原理
其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交，标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合，形成双链RNA；未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA，免受RNA酶的消化，故该方
简述固氮酶的防氧保护机制
固氮菌在进化过程中，发展出多种机制来解决既需氧又防止氧对固氮酶的操作损伤的矛盾。 1、固氮菌以较强的呼吸作用迅速地将周围互不干涉中的氧消耗掉，使细胞周围处于低氧状态，保护固氮酶不受损伤。 2、在根瘤菌中，以豆血红蛋白与氧气结合的方式使豆血红蛋白周围的氧气维持在一个极低的水平。 3、有些固氮
保护个人生物资讯，斯坦福团队研发－DNA－加密技术
为了找出致病基因，研究人员常需要大量患者与健康者的基因资讯，甚至针对全基因体进行分析比较，找出关键的差异。然而，个体 DNA 差异也正是每一个人独有的生物特征。有些人因此担忧，自己的 DNA 资讯可能会因为提供样本进行研究或遗传检测而外流。 因此，美国斯坦福大学研究团队开发了一种 DNA
小儿肺炎的护理体会
肺炎是婴幼儿时期常见病，就全球而言，肺炎占五岁以下小儿死亡总数的1/4~1/3，占我国住院小儿死亡的第一位，是我国儿童保健重点防止“四病"之一。肺炎一年四季均可发病，以冬春季者多见，所以在合理治疗的基础上，临床护理的恰当与否直接影响小儿肺炎的康复。 1.临床表现 本病多
子痫患者的护理体会
子痫是妊娠期高血压疾病最严重的阶段，是妊娠期高血压疾病所致母儿死亡的最主要原因，因此，积极配合医生抢救，采取有效的护理措施，是子痫病人抢救成功，保证母儿安全的关键。现就护理体会介绍如下:1. 抢救护理 遵医嘱用25%硫酸镁20毫升加于25%葡萄糖注射液20毫升静脉推注(>5min)，继之以2~
心源性晕厥的临床体会
在临床工作中，常会遇到以突发晕厥为主诉的患者前来就诊。在遇到这类患者时，我们要注意区别是神经介导性晕厥、直立低血压性晕厥还是心源性晕厥。而心源性晕厥是其中最高危，并且预后不好，容易发生猝死，所以我们主要阐述一下心源性晕厥的临床诊断与治疗。 心源性晕厥是由于心脏方面的原因，引起心脏排血量减少，从而导致
小儿腹泻的护理体会
小儿腹泻病是由多种病原多因素引起的以排便次数增多和大便性状改变为特征的消化道综合症。是儿科常见病之一，多见于六个月至两岁的婴幼儿，一年四季均可发病，但夏秋发病率较高.根据病因分为感染性和非感染性两类，以前者更多见，笔者认为在治疗小儿腹泻时，除了做好调整饮食，合理用药，控制感染，纠正电解质和酸碱平衡紊
关于卫星RNA的加工的介绍
在具侵染性小分子RNAs的复制机制中,RNA的加工最令学者们兴趣,即是在多聚体形式与相关的线状和环状单体之间的切割与连接过程。1986年有学者发现烟草环斑病毒ToRSV与卫星RNA 正链二聚体在接点处自我切割,产生具有感染性的线状单休。随后,又发现包含有ASBV的正链与负链的二聚体的体外转录休能
关于转运RNA的结构的概述
转运RNA分子由一条长70~90个核苷酸并折叠成三叶草形的短链组成的。上图中有两种不同的分子，苯丙氨酸tRNA(4tna)和天冬氨酸tRNA(2tra)。tRNA链的两个末端在图上方指出的L形结构的末端互相接近。氨基酸在箭头示意的位置被连接。在这条链的中央形成了L形臂，如图下方所示，露出了形成反
关于RNA的自我复制的介绍
进一步的研究还发现一些RNA病毒如R17、f2、MS2等,可以以RNA为模板直接复制新的RNA。这些病毒都属于最简单的类型。例如,MS2的RNA只含有大约350个核苷酸,仅编码三种蛋白质：外壳蛋白,附着蛋白（attachment protein,其功能主要是使病毒能附着于寄主细胞并进入其内部）、
首都环境保护奖揭晓－环境保护部六集体七个人获奖
北京市环境委员会近日召开“首都环境保护奖”表彰大会，环境保护部6个集体和7名个人获奖。 环境保护部科技标准司科技发展处、污染物排放总量控制司综合处、环境监察局监察稽查处、华北环境保护督查中心监督一处、环境规划院大气环境规划部、中华环境保护基金会宣传联络部等6个部门获得“首都环境保
3类不同的RNA聚合酶的功能介绍
真核细胞含有3类不同的RNA聚合酶,根据其对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同,分为RNA聚合酶Ⅰ(A)、RNA聚合酶Ⅱ(B)、RNA聚合酶Ⅲ(C),如下:酶的种类存在功能对抑制物的敏感性RNA聚合酶Ⅰ核仁合成rRNA前体不敏感RNA聚合酶Ⅱ核质合成mRNA前体及大多数snRNA敏感RNA聚合酶Ⅲ核质合成5S