外周血细胞形态学检验及技巧
一． 血液学及血细胞形态学临床应用： ● 是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。 ● 血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。 ● 近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。 ● 当前血液病不能单凭临床与形态学 作出 诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。 ● 进入 90 年代以来，国内外采用多学科联合技术综合诊断......阅读全文
细胞转染技巧及常见问题分析
1. Freestyle™ 293-F细胞的培养：在37℃，125rpm，8% CO2的摇床培养箱中培养；转染当天Freestyle™ 293-F细胞密度达到1.5-2.5×106个/ml时可以进行转染，但细胞存活率需>95%；可以使用生产的台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒(C0011)进行细胞存活率
检验碾米机选购技巧
据有关报道显示，我国粮油市场供应呈有序上升趋势，为保持平稳运行，相关质检部门应加强粮油质量安全检测、监督和品质测报工作，落实国家粮食质量安全监测年度计划和方案，切实履行政策性粮食质量监管责任。在执行监督工作中，我们常会运用到相关粮油仪器进行检测。例如实验室常备仪器——检验碾米机，对于很多第一
外周血细胞瑞氏（Wright）染色及计数实验——涂片法
实验方法原理瑞氏染料中有美蓝和伊红两种成分，前者为碱性，后者为酸性，它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力，使其显现出不同的色调。血细胞核由去氧核糖核酸和强碱性的组蛋白、精蛋白等形成核蛋白。这种强碱性的物质与瑞氏染料中的酸性染料伊红有亲和力，所以染成红色；核蛋白中还有少量的 弱酸性蛋白，它们又与染液
外周血B细胞的检测_活性B细胞检测
实验步骤展开
关于外周血干细胞移植的细胞动员介绍
正常情况下，外周血中的干/祖细胞的含量占单个核细胞的 0.01%—0.1%相当于骨髓的1%—10%，动员后外周血MNC中CD34+细胞数及CFU—删数均明显高于骨髓。迄今已发现多聚阴离子化合物(如硫酸葡聚糖)、糖皮质激素、细菌内毒素、抗肿瘤药物、四氢叶酸以及造血生长因子等均能有效地动员骨髓和其它
外周血干细胞移植的移植问题
1、收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞； 2、移植物中存在大量T细胞，可能诱发严重GVHD ； 3、初步的结果表明，PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似，但慢性GVHD为Allo—BMT的2-3倍； 4、重组细胞因子作为动员剂对供者的安全有待于观察。
外周血干细胞移植的应用趋势
动员的外周血移植较骨髓移植可获得更快的造血和免疫重建，还可以使大剂量化疗更安全，现已成为自体移植的主要细胞来源。动员的异基因外周血移植在快速重建造血的 同时，伴有较高慢性GVND，因此目前尚不能判断从Allo-PBSCT是否能得到广泛应用。所以今后的发展趋势： 1) 细胞因子和化疗方案进一步
外周血干细胞移植的临床问题
1）外周血干细胞数量采集困难，不能满足移植所需数量。 2）收集的外周血干细胞会混杂有肿瘤细胞。 3）异基因外周血移植物中存在大量T细胞，可能诱发严重GVHD，初步的结果表明Allo-PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似，但慢性GVHD显著高于Allo-BMT。 4）PBSCT后肿瘤
外周血单个核细胞怎么进行分离？
外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重介于1.075～1.090 之间，红细胞及粒细胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之间，因而可利用一种比重介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。对分离介质的基本要
关于外周血干细胞移植的简介
干细胞由骨髓大量生成，其中少量的干细胞被释放到血液中，这就是外周血干细胞(PBSC）。通过使用一种叫做Filgrastim的药物（重组人粒细胞集落刺激因子），我们能够增加释放到血液中的干细胞数量，从而有可能直接从血液中采集到干细胞移植所需要的足量的干细胞。
外周血淋巴细胞可以传代吗
外周血淋巴细胞培养及染色体制备过程中的影响因素,以便提高外周血淋巴细胞染色体标本制备成功率。
概述外周血干细胞移植的优点
1、费用低，效益好 造血及免疫功能恢复快，移植的费用/效益之比优于BMT。 不管是自体还是异体PBSCT，移植后的植活时间 (白细胞>1.0x109/L，中性粒细胞>0.5x109/L和血小板>20×109/L) 大都在2周左右，比BMT至少提早1周；如果在移植后加用G-CSF或GM-CSF
外周血单个核细胞分离的原理
外周血单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其比重为1.070左右，而红细胞和多核白细胞的比重超过1.080。这样利用介于两者比重之间的溶液(称为分层液)做密度梯度离心，就可得到单个核细胞。最常用的分层液为聚蔗糖和泛影酸钠混合比重为1.070±0.001的溶液，国内常用泛影葡胺代替泛影酸钠。
外周血干细胞移植的移植优点
费用低，效益好 造血及免疫功能恢复快，移植的费用/效益之比优于BMT。 不管是自体还是异体PBSCT，移植后的植活时间 (白细胞>1.0x109/L，中性粒细胞>0.5x109/L和血小板>20×109/L) 大都在2周左右，比BMT至少提早1周；如果在移植后加用G-CSF或GM-CSF，则
外周血罕见红细胞被吞噬现象
临床上，骨髓中发生噬血细胞的原因很多，且被吞噬的细胞类型也较多。但外周血出现中性粒细胞和单核细胞吞噬红细胞是非常罕见的现象，且仅发现红细胞被吞噬。这种现象多数情况下是免疫介导引起，免疫相关的红细胞被吞噬最常见情况是阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH）。发病原因包括病毒、罕见疫苗接种，严重菌血症和败血症，
外周血干细胞移植的采集时间
一般情况下，恶性肿瘤患者大剂量化疗+造血生长因子动员PBSC时，外周血白细胞>1.0x109/L、血小板>(20 -50)x109/L、CD34+细胞>1%时开始采集，根据血象的恢复速度连续或隔日采集，至血象达到高峰时止，一般采集1—3次。 健康供者用G-CSF动员时，虽在4-6h即可见白细胞
外周血干细胞移植的采集指标
目前多数医生主张用CD34+细胞数作为采集PBSC时的质量指标。也有作者认为，用处于DNA合成期的MNC数作为 PBSC的质量指标，它比用CD34+细胞更快捷更稳定。
外周血单个核细胞的分离实验
实验方法原理体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞（mononuclear cell）。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。 血液中各种细胞的大小和比重不同，因此，可用不同比重（密度）的分离液使不同比重的细胞在离心沉降过
大鼠外周血淋巴细胞分离液
【检验方法】全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。首先取抗凝血按体积比 1:1的比例与样本稀释液（产品编号：2010C1119）混匀，根据稀释后的样本量大小，分以下两种情况：情况 A：稀释后的血液样本量小于 5ml时，实验方法如下：1.取一支15ml离心管，先加入与稀释后样本等量的
人外周血淋巴细胞培养
在正常情况下，人外周血中是没有分裂相的，只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素（PHA）是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂，在PHA作用下，原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性，淋巴细胞经过含有HPA培养液培养，在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体
外周血单个核细胞的分离实验
实验方法原理 体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞（mononuclear cell）。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。 血液中各种细胞的大小和比重不同，因此，可用不同比重（密度）的分离液使不同比重的细胞在
细胞培养常用设备及实验技巧（一）
常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外
细胞培养常用设备及实验技巧（二）
细胞的复苏 细胞复苏的原则——快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。具体操作 一、实验前准备：1.将水浴锅预热至37℃。2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。3.在超净工作
细胞形态学的简介
所有的生物都是由细胞组成的，只是不同的生物体细胞的大小和形状有所不同。有的细胞人的眼睛可以看得见，如鸟类的蛋，最大的直径近10厘米（鸵鸟蛋）。有的细胞直径只有0.1米微米，要用高倍显微镜才能看到，如原始的细菌。大多数细胞的直径是10-100微米，用低倍显微镜就能看到。细胞的大小，即使在同一生物体
细胞形态学的形态
细胞的形状多种多样，有球体、多面体、纺锤体和柱状体等。由于细胞内在的结构和自身表面张力，以及外部的机械压力，各种细胞总是保持自己的一定形状。细胞的形状和功能之间有密切关系。例如，神经细胞会伸展几米，这是因为伸长的神经细胞有利于传导外界的刺激信息。高大的树木为什么能郁郁葱葱，这是因为植物内的导管、
细胞形态学检查方法
1.光镜细胞形态学；细胞形态学的基本内容和常用的检查方法。2.细胞化学染色：是细胞和化学两者相结合的形态学方法，保持细胞完整组织结构显示化学结构成分-定性/半定量，主要用于白血病分型鉴别诊断。3.相差镜检查：用于观察活细胞的内部结构及活动，细胞生长成熟衰亡过程及对各种刺激的反应。4.荧光显微镜检查：
细胞形态学的简介
细胞形态学是研究细胞及各组成部分的显微结构和亚显微结构，包括表现细胞生命现象的生物大分子结构的科学。 所有的生物都是由细胞组成的，只是不同的生物体细胞的大小和形状有所不同。有的细胞人的眼睛可以看得见，如鸟类的蛋，最大的直径近10厘米（鸵鸟蛋）。有的细胞直径只有0.1米微米，要用高倍显微镜才能看
细胞形态学检查方法
1.光镜细胞形态学；细胞形态学的基本内容和常用的检查方法。 2.细胞化学染色：是细胞和化学两者相结合的形态学方法，保持细胞完整组织结构显示化学结构成分-定性/半定量，主要用于白血病分型鉴别诊断。 3.相差镜检查：用于观察活细胞的内部结构及活动，细胞生长成熟衰亡过程及对各种刺激的反应。 4.荧光显
干细胞形态学特征
总的来讲，胚胎性干细胞的形态结构与早期胚胎细胞相似，细胞较小，核质比高，细胞核显著，有一个或多个核仁，染色质较分散，胞质内除游离核糖体外，其它细胞器很少；细胞呈多层集落状生长，紧密堆积在一起，无明显细胞界限，形似鸟巢。但不同物种、不同类型的胚胎性干细胞的结构特征又有所不同。如小鼠ES细胞和人EG细胞
骨髓细胞形态学
1．正常血细胞形态学（Wright染色）（1）粒细胞系统形态1）原始粒细胞 胞体直径10～18μm，圆形或类椭圆形。胞核较大，约占细胞的2/3以上,核染色质呈细粒状，排列均匀，无浓集，核膜较模糊。核仁2～5个，较小，清楚。胞质量少，呈透明天蓝色，绕于核周，无颗粒。2）早幼粒细胞 胞体直径