HLATypingforA2.1TransgenicMice,protocol2
2) Nested PCR: amplification product is 715 bp.Primer AL#22: CAC TCC ATG AGG TAT TTC TT Primer AL#Q: CTC TCT GCT GCT CCG CCADNA preparation: make a 1:100 dilution of the first PCR (for example 5ul PCR product into 495ul H2O). Add 5ul into nested PCR mix.For 1 reaction: 50ul10x Buffer 5ul dNTP's 4ul MgCL2 4ul Primers 2.5ul each TaqPol 0.5ul H2O 26.5ul DNA 5ul of previous 1/100 re......阅读全文
概述青少年强直性脊柱炎的发病机制
1. HLA-B27结构与角色 1968年Dr.Eric Thorsby发现HLA-B27, 1973年发现HLA-B27与AS有强烈的关联性,据统计,95%的患者具有HLA-B27抗原(即HLA-B27阳性);所有HLA-B27(+)的人,有2-10%终将发展成AS。除了HLA-B27外,
转基因
DNA PreparationGene TransferEmbryo TransferTransgenic IdentificatioinOthersTransgenic Outline (University of Michigan Transgenic Animal Model Core)Thi
HLAB27表达的检测
实验步骤展
HLA基因分型方法:RFLP法
RFLP法1)常规制备DNA盐析法1.用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。2.每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次,再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。3.加50μl 10% SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质,37℃过夜或55℃ 3h。4.加0.25体积饱和醋酸钠溶液,剧烈摇动1
HLA细胞法分型试验介绍
HLA细胞法分型试验介绍:HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.2ml到反
免疫学实验HLA定型介绍
HLA定型介绍: HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这是一组广泛分布于人体有核细胞表面的抗原,受控于人类第6号染色体短臂。HLA基因位点至少有五个,即HLA-A、B、C、D和DR位点。近年又确定了DP和DQ两个位点。HLA有高度
HLA细胞法分型试验简介
HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。1.试验
临床化验单详解HLA定型
HLA定型介绍: HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这是一组广泛分布于人体有核细胞表面的抗原,受控于人类第6号染色体短臂。HLA基因位点至少有五个,即HLA-A、B、C、D和DR位点。近年又确定了DP和DQ两个位点。HLA有高度多态性,每
HLA细胞法分型试验简介
HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原(lymphocytedefinedantigen),其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC),也称混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)。
HLA的分型方法有什么?
①淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。 ②混合淋巴细胞培养
HLAB27表达的检测
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人类HLA基因图及其遗传特征
在人类MHC称为HLA(human leucocyte antigen),是迄今为止所知的人类最复杂的基因族。除成熟的红细胞外,HLA抗原几科分布于人体的各种有核细胞以及血小板。由于此组抗原首先在人外周血白细胞上发现,同时表达抗原水平较高,目前多采用外周血淋巴细胞来检测这类抗原的型别,故称为
HLA配型与骨髓移植
一、 骨髓移植概述骨髓移植(bone marrow transplantation ,BMT)的实质是造血干细胞移植,干细胞具有能复制并分化为造血和免疫活性细胞的能力。根据干细胞的来源不同可分为自体、同基因(syngeneic)和异基因(allogeneic)BMT。同基因骨髓移植是指同卵孪生同胞
关于HLA交叉反应组的介绍
HLA基因分型的精确度明显提高,大幅度减少了GVHD的发生率。但正是由于基因分型的精确,找到基因亚型完全相合的供体非常困难。同时临床资料显示,同样是供受者HLA错配,有些错配明显影响移植物存活,而有些错配并无显著影响。因此,临床上需要种更为实用、临床可行的配型策略,即确定HLA虽不合但可以接受或
HLAB27表达的检测
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HLA细胞法分型试验介绍
HLA细胞法分型试验介绍: HLA-D和DP位点的抗原须用细胞法分型进行鉴定,所以又称LD抗原,其鉴定方法普遍采用混合淋巴细胞培养,也称混合淋巴细胞反应。 1.试验方法将分离的反应细胞(通常是患者的淋巴细胞)与刺激细胞(通常是供者或已知的标准淋巴细胞)配制成1×106/ml浓度的悬液,各加0.
HLA定型的正常值是什么
阴性:蓝色死细胞数
关于HLAB27的症状概述
HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。根据HLA抗原结构,功能与组织分布的不同,可分为三类:Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原,
临床化学检查方法介绍HLA定型介绍
HLA定型介绍: HLA即人类白细胞抗原(Human leucocyteantigen),是人类的组织相容性系统。这是一组广泛分布于人体有核细胞表面的抗原,受控于人类第6号染色体短臂。HLA基因位点至少有五个,即HLA-A、B、C、D和DR位点。近年又确定了DP和DQ两个位点。HLA有高度多态性,
PCR扩增样本DNA的HLA基因片段
一、PCR扩增体系1. 1.0uM 引物2. 300ng待测样本基因组DNA3. 2.0U Taq多聚酶4. 200uM 各种dNTP5. 用1 X PCR缓冲液(10mM Tris-HCl,pH8.3,50mM KCl,1.5mM MgCl2,0.01%明胶)调至总体积100ul,并用50ul矿物
HLAA基因编码功能及结构描述
HLA-A属于HLA I类重链相似度。这一类分子是由重链和轻链(β-2微球蛋白)组成的异二聚体。重链锚定在膜上。I类分子通过呈现内质网腔中的肽在免疫系统中起着中心作用。几乎在所有细胞中都有表达。重链约45kDa,其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽,外显子2和3编码α1和α2结构域,两者结合肽,
关于抗HLADR的病理介绍
T淋巴细胞上的特异性受体或B淋巴细胞释放的免疫球蛋白,这些主要组织相容性复合体(MHC)的糖蛋白引起人们很大的兴趣。这些蛋白是由6号染色体短臂编码的。它们存在于细胞表面和体液中。在人类,1958年由J.Dausset首次描述并被称作“移植抗原”。使用“抗原”这个词是因为它们在血清学上已经被定义了
HLA定型的注意事项有哪些
临床上器官移植,除同卵双生儿,供者与受者除应ABO血型相配外,还需进行严格的HLA定型,以选择HLA相同或近似的个体。
概述抗HLADR的医学检查
1、分类 免疫学检查 > 自身抗体测定 2、抗-HLA-DR的测定原理 同Raji细胞免疫酶抑制法。 3、试剂 同Raji细胞免疫酶抑制法。 4、操作方法 同Raji细胞免疫酶抑制法。 5、正常值 Raji细胞免疫酶抑制法:阴性。 6、化验结果临床意义 阳性:系统性红斑狼疮
HLAB27与脊柱关节病
脊柱关节病(SpA)属于风湿性疾病的范畴,它是以中轴、外周关节炎以及关节周围组织慢性进展性炎症为主要特点的一组疾病,主要包括强直性脊柱炎(AS)、银屑病关节炎、炎症性肠病关节炎、反应性关节炎和未分化SpA五个亚型。AS是脊柱关节病的最主要疾病,在风湿性疾病中它的发病率(0.3%左右)仅次于干燥综合征
HLAA基因编码功能及结构描述
HLA-A属于HLA I类重链相似度。这一类分子是由重链和轻链(β-2微球蛋白)组成的异二聚体。重链锚定在膜上。I类分子通过呈现内质网腔中的肽在免疫系统中起着中心作用。几乎在所有细胞中都有表达。重链约45kDa,其基因包含8个外显子。外显子1编码先导肽,外显子2和3编码α1和α2结构域,两者结合肽,
细胞株HLAA*02检测方法
方法1、抗体测定:研究对象取200μl新鲜抗凝全血,每管100μl加入流式细胞仪检测管中,再加入2ml红细胞裂解液反应12min后离心,弃上清液,磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline, PBS)洗细胞两次,其中反应管加入鼠抗人HLA-A*02抗体××μl(达科为公司),4
HLADRA的结构特点和作用
HLA-DRA是HLAⅡ类α链的一种。这种II类分子是一种由α链和β链组成的异二聚体,它们都锚定在膜中。通过呈现细胞外蛋白衍生的肽,在免疫系统中起到中心作用。Ⅱ类分子在抗原呈递细胞(APC:B淋巴细胞、树突状细胞、巨噬细胞)中表达。α链约为33-35kDa,其基因包含5个外显子。外显子1编码先导肽,
HLA定型的临床意义是什么
组织或器官移植配型选择HLA适合的供体。
简述HLA低分辨分型的内容
采用序列特异性引物扩增HLA等位基因的特异性片段,经电泳分离,根据PCR结果的反应格局具判断被测标本的HLA等位基因型,具有通量大、正确性好的特点。反映了HLA抗原水平的等位基因类型,用于骨髓、器官移植组织配型的初筛。