斑点杂交方法——优化抗原和抗体浓度
斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法。 注:所有的抗体稀释度假定起始浓度为1 mg/mL。 1. 用TBS和PBS稀释的蛋白样品,好的稀释方法是由样品中的抗原稀释浓度决定的,但是由于抗原的浓度是未知的,所以有必要进行宽范围的稀释度的检测。SuperSignal West Pic化学发光底物的检测灵敏度可达皮g水平,所以样品的稀释范围可以从微克水平到皮克水平。如果要使用过多的抗原,结果会出现以下情况:非特异性条带、模糊条带和信号降低。 2. 准备转印膜。所需膜的数量依赖于被屏蔽的一抗和/或二抗有......阅读全文
斑点杂交方法——优化抗原和抗体浓度
对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法。注:所有的抗体稀释度假
斑点杂交方法——优化抗原和抗体浓度
斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用
斑点印迹——优化抗原和抗体浓度
斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超
抗原和抗体浓度的优化免疫斑点实验
对于一个给定的抗原,最佳的抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。最优抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法:1、 用TBS和P
HLA抗原和抗体的概述/抗原/HLA抗体
1.抗原:HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个座位,至少含4个与移植有关的基因区:即HLA-A,HLA-B,HLA-C和HLA-D.HLA-D又分为
HLA抗原和抗体
人类白细胞上有3类抗原:红细胞血型抗原、白细胞特有抗原、与其他组织共有但也是最强的人类白细胞抗原(HLA)。1.HLA:是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA有一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个
抗原和抗体的区别
1、原理不同:抗原是能够诱发机体出现免疫反应,产生抗体的物质,抗原可以是细菌、病毒、微生物、生物制剂、自身死亡的细胞等;2、作用不同:抗体是在抗原的刺激作用下由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生,它可以与相应的抗原结合,是一种免疫球蛋白。抗原是入侵者,是外来的物质,通常对机体可以造成一定的损伤,而抗体是
抗原和抗体的概念
抗原(antigen,缩写Ag)是指能引起抗体生成的物质,是任何可诱发免疫反应的物质。 抗体(antibody)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。
抗原和抗体的概念
抗原,是指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。 抗体指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 这血清里含有抗体。当然也含有抗原,
抗原和抗体的区别
抗原可以是病毒、细菌等异物以及人体自身死亡的细胞,是能够刺激机体产生免疫应答的物质。而抗体是B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化而成的,一般产生于抗原的刺激之下。可以说抗原是人体免疫系统的入侵者,而抗体是机体的防卫者,抗原被机体识别后机体会产生对抗抗原的物质也就是抗体。一般来说,抗原对人体有害,而抗体对
斑点杂交技术的方法和步骤
斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交,以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于目的
斑点杂交的DNA斑点杂交方法
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。
抗原和抗体结合的部位
抗体和抗原结合的部位是重链和轻链的V区
HLA抗原和抗体的概述
HLA抗原和抗体的概述是检验主管技师考试要求掌握的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 1.抗原:HLA是糖蛋白抗原,又称组织相容性抗原、移植抗原和组织抗原。HLA由一系列紧密连锁的基因编码,这些基因称为组织相容性复合物(MHC),也称为HLA基因,定位在第6号染色体短臂上,共有6个座
临床化学检查方法介绍疟原虫抗体和抗原介绍
疟原虫抗体和抗原介绍: 指检测疟原虫感染后血液中的抗原和抗体。疟原虫抗体和抗原正常值: 间接免疫荧光法:小于1:20。 酶联免疫吸附试验、放射免疫法:阴性。疟原虫抗体和抗原临床意义: 异常结果:本检测用于疟疾的诊断。 人感染发生原虫血症后1周就可检出免疫抗体,且在短期内达到高峰,一段时间后
临床化学检查方法介绍阿米巴原虫抗原和抗体介绍
阿米巴原虫抗原和抗体介绍: 阿米巴原虫抗原和抗体指检测人体肠道中的溶组织内阿米巴致病后血液中的原虫抗原和抗体。现常用直接荧光法查粪便、肝脓液中的阿米巴抗原;用酶联免疫吸附测定法、间接免疫荧光法检测血清中的阿米巴抗体。阿米巴原虫抗原和抗体正常值: 酶联免疫吸附测定法:阴性。 间接免疫荧光法:阴性
衣原体特异性抗原和抗体检测方法
1、材料 ①7—8d日龄的鸡胚,McCoY细胞或HL细胞。②荧光显微镜,CO2孵箱。 ③沙眼衣原体免疫荧光诊断试剂盒,吉姆萨染色液。 2、方法 (1)标本采集 ①沙眼病人眼结膜标本的采集。在10%丁卡因局部麻醉下,用无菌狭长盖玻片(0.5*2cm)刮取眼结膜上的滤泡组织,置于盛有1—2ml蔗糖磷酸盐
阿米巴原虫抗原和抗体的概述
阿米巴原虫抗原和抗体指检测人体肠道中的溶组织内阿米巴致病后血液中的原虫抗原和抗体。现常用直接荧光法查粪便、肝脓液中的阿米巴抗原;用酶联免疫吸附测定法、间接免疫荧光法检测血清中的阿米巴抗体。
乙肝表面抗体和抗原的区别
乙型肝炎表面抗原是乙型肝炎病毒的外壳蛋白,本身只有抗原性,没有传染性。当乙型肝炎表面抗原阳性的时候,说明是乙型肝炎病毒携带者,可以进一步检查乙型肝炎HBV-DNA,测定乙型肝炎病毒的载量。乙型肝炎表面抗体是一种保护性抗体,是因为感染了乙型肝炎病毒之后,机体的免疫反应可以将乙型肝炎病毒清除,而产生乙型
DNA斑点杂交方法
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。
RNA斑点杂交方法
每个样品至多加10μg总RNA(经酚/氯仿或异硫氰酸胍提取纯化),方法是将RNA溶于5μl 焦碳酸二乙酯(DEPC)水,加5μl 甲醛/SSC缓冲液(10×SSC中含6.15mol/L甲醛),使RNA变性,然后取5-8μl点样于处理好的滤膜上,烘干。
病原体检测方法阿米巴原虫抗原和抗体介绍
阿米巴原虫抗原和抗体介绍: 阿米巴原虫抗原和抗体指检测人体肠道中的溶组织内阿米巴致病后血液中的原虫抗原和抗体。现常用直接荧光法查粪便、肝脓液中的阿米巴抗原;用酶联免疫吸附测定法、间接免疫荧光法检测血清中的阿米巴抗体。阿米巴原虫抗原和抗体正常值: 酶联免疫吸附测定法:阴性。 间接免疫荧光法:阴性
完整细胞斑点杂交方法
应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接
完整细胞斑点杂交方法
应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞直接
DNA斑点杂交方法简介
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。 ②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。 ③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。 ④将膜烘干,密封保存备用。
RNA斑点杂交方法介绍
与上法类似,每个样品至多加10μg总RNA(经酚/氯仿或异硫氰酸胍提取纯化),方法是将RNA溶于5μl 焦碳酸二乙酯(DEPC)水,加5μl 甲醛/SSC缓冲液(10×SSC中含6.15mol/L甲醛),使RNA变性,然后取5-8μl点样于处理好的滤膜上,烘干。
DNA斑点杂交方法步骤
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。
完整细胞斑点杂交方法
应用类似检测细菌菌落的方法,可以对细胞培养物的特异序列进行快速检测,将整个细胞点到膜上,经NaOH处理,使DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到至少5pg的Epstein-Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它使细胞
斑点杂交的方法介绍
斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市售有多种多管吸印仪(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Smart Blotter(Wealtec)、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-D
DNA斑点杂交方法(二)
核酸杂交法检测病原微生物 核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立,用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针,与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性高,但敏感性低于PCR方法。 本实验学习用非放射性标记物-地高辛(DI