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菌落总数的误操作及避免方法

1、样品的制备和稀释倍数的选择 对于冰冻的样品,在接种前要放到0~4℃的冰箱中解冻。固体样品要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料并混合,在无菌操作下充分研细,混匀,做成均匀稀释液。样品制备的整个过程都应在无菌状态下进行,以防污染。任何样品在打开包装前,都要在取样开口处的周围表面进行消毒。以上过程的误操作是:冰冻样品的解冻时间过长,导致细菌增殖,使实测结果偏高;固体样品取样不均衡,稀释液未充分混匀,使所测结果准确度降低;取样时未进行外包装消毒,引起样品污染。 充气饮料应在无菌条件下进行排气;酸性样品用经过灭菌的20~30% 碳酸钠溶液调整pH 值到中性;含盐量较高的样品应用灭菌蒸馏水进行稀释。误操作是:充气饮料未经排气,使样品接种量偏低;酸性样品未调pH 值,使不适合酸性状态下生长的细菌受抑制;高盐样品仍用生理盐水进行稀释,使不适于高盐状态下生长的细菌受抑制,结果均使实......阅读全文

平板菌落计数法菌落总数介绍

  菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。  菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克

菌落总数

一、菌落总数介绍:  菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。  菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养

菌落PCR

            实验方法原理 直接挑取菌落进行PCR,PCR的95℃加热可以破胞,释放基因组DNA或质粒,成为PCR体系的模板,然后进行链式扩增。 实验材料 菌落样品

菌落PCR

实验方法原理 直接挑取菌落进行PCR,PCR的95℃加热可以破胞,释放基因组DNA或质粒,成为PCR体系的模板,然后进行链式扩增。实验材料 基因样品试剂、试剂盒 dNTPPCR混合液仪器、耗材 PCR仪实验步骤 1.  PCR混合液的制备(1)Taq buffer(10×) 180 ul(2)dNT

菌落PCR

菌落PCR可用于:(1)重组体的筛选;(2)重组体DNA测序分析。实验方法原理直接挑取菌落进行PCR,PCR的95℃加热可以破胞,释放基因组DNA或质粒,成为PCR体系的模板,然后进行链式扩增。实验材料菌落样品试剂、试剂盒dNTPPCR混合液仪器、耗材PCR仪实验步骤1.  PCR混合液的制备(1)

菌落总数

一、菌落总数介绍:  菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。  菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养

菌落总数测定菌落计数的注意事项

  (1)如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高,则系检验工作中发生的差错,属实验室事故。此外,也可能因抑菌剂混入样品中所致,均不可用作检样计数报告的依据。  (2)如果平板上出现链状菌落,菌落之间没有明显的界限,这是在琼脂与检样混合时,一个细菌块被分散所造成。一条链作为一个菌落计,

菌落总数介绍

  菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。  菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克

菌落PCR实验

菌落PCR标签: 菌落 PCR菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。

菌落pcr步骤

一、引言常规的PCR扩增需要进行细菌培养、质粒制备等多步操作后才能进行基因扩增,操作繁琐耗时较长,同时在反复的操作中DNA量损失也较大,产率较低。在1989年 Gussow Clackson3建立了菌落PCR( colony PCR)法,菌落PR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以单个菌