枯草杆菌溶栓酶的分离纯化研究
摘 要 目的:以枯草杆菌HL2986 发酵液为原料,对枯草杆菌溶栓酶的分离纯化技术进行研究。方法:采用磷酸钙吸附沉淀除去部分色素和杂蛋白,经超滤脱盐、CM252 离子交换分离、丙酮沉淀和Sephadex G275 凝胶过滤处理,得到具有溶栓活性的酶。结果:得到的溶栓酶在SDS2PAGE 上为单一谱带,其分子量约为27kD ,比活为9 800 U/ mg ,活性得率为63. 8 %。结论:以较高的得率获得了高纯度的枯草杆菌溶栓酶。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
胰酶肠溶片
性状本品为肠溶片,除去肠溶衣后,显白色至淡黄色。检查微生物限度取本品,照胰酶项下的方法检查应符合规定。其他应符合片剂项下有关的各项规定(通则0101)。效价测定胰蛋白酶照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品原液取本品5片(0.3g规格)或3片(0.5g规格),除去肠溶衣,研细,加冷至5℃以
静脉溶栓治疗失败者支架治疗安全有效
最近,来自捷克的一项研究表明,对于静脉溶栓治疗(IVT)禁忌或失败的卒中患者,脑血管成形术和支架置入术进行动脉血管重建是一种有效且耐受性良好的治疗。研究结果发表在《放射学杂志》杂志上。 该研究主要研究者Ostrava 大学医院的Martin Roubec说:“我们证实,IVT失败或存在禁忌的患
颈内动脉闭塞综合征的超早期溶栓治疗
恢复梗死区血流灌注,减轻神经元损伤,挽救缺血半暗带。 1)静脉溶拴疗法:常用溶拴药物包括: ①尿激酶(UK):50-150万IU加入0.9%生理盐水100ml,在1小时内静脉滴注; ②重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA):一次用量0.9mg/kg;%的剂量先予静脉推注,其余剂量在约60分
STEMI-患者转院前溶栓治疗与直接-PCI-疗效相当
及时再灌注治疗对急性 ST 段抬高型心肌梗死(STEMI)患者的益处众所周知,临床研究表明直接 PCI 在减少死亡率方面优于溶栓,因此,直接 PCI 作为再灌注治疗优选方案。 但是,就美国整体而言,仍有大部分 STEMI 患者未能在发病 2 小时内实现直接 PCI 再灌注治疗。而现行指南推
ST段抬高型心肌梗死的溶栓治疗介绍
在不具备PCI条件的医院或因各种原因使FMC至PCI时间明显延迟时,对有适应证的STEMI患者,静脉内溶栓仍是较好的选择。对发病内3小时内的患者,溶栓治疗的即刻疗效与直接PCI基本相似。溶栓治疗药物建议优先采用特异性纤溶酶原激活剂如重组组织型纤溶酶原激活剂阿替普酶、兰替普酶、瑞替普酶和替奈普酶等
前壁心肌梗死溶栓治疗后心悸病例分析
一位58岁男性患者,因前壁心肌梗死(MI)住医院,已行心电图检查(A)。应用溶栓治疗,且无并发症。几天后,患者出现心悸、出汗。进行另一份心电图检查(B)。心电图A心电图B问题:心电图提示什么?心电图分析心电图A显示节律规则,心率100次/分,因此为心动过速。QRS间期延长(0.16 s),形态为非典
纤溶系统α2纤溶酶抑制抗原
α2-纤溶酶抑制抗原介绍: 2纤溶酶抑制物主要由肝脏合成,一种单链糖蛋白,是体内特异的抑制活性的丝氨酸蛋白酶,有限时性抑制纤溶酶的作用和抑制纤溶酶原与纤维蛋白结合,防止纤维蛋白被抗纤溶酶水解的作用。α2-纤溶酶抑制抗原正常值: 1-12ng/ml。α2-纤溶酶抑制抗原临床意义: (1) t-PA含量
酶液的纯化方法
酶是蛋白质,因此凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化,如盐析法、聚乙二醇沉淀法、有机浴剂分级沉淀法、等电点法、选择性沉淀法、各种柱层析法(吸附层析、离子交换层析、凝胶过滤)、各种电泳法及亲和层析等。不同之处是酶的纯化过程尚需选用迅速简便的活力测定方法,以追踪酶的去向。在选用酶的活力测定方法时,分析
酶的分离纯化步骤
酶的分离纯化一般包括三个基本步骤: 即抽提、 纯化、 结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液, 此时不可避免地夹带着一些杂质, 然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来, 或者从此溶液中选择性地除去杂质, 然后制成纯化的酶。
胰激肽原酶肠溶片
性状本品为肠溶衣片,除去包衣后显白色或类白色。鉴别在纯度项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致检查纯度照高效液相色谱法(通则0512)测定磷酸盐缓冲液(pH7.0)见胰激肽原酶纯度项下。辅料溶液取淀粉1.3g、糊精0.36g与微晶纤维素0.52g,置离心管中,加
关于纤溶酶的简介
纤溶酶(plasmin)是指能专一降解纤维蛋白凝胶的蛋白水解酶,是纤溶系统中的一个重要组份。体内凝血和纤溶两系统是相互依存紧密相联的。机体一旦产生凝血反应,也几乎同时激活了纤溶系统,使体内多余的血栓移去,并通过负反馈效应使体内纤维蛋白原的水平降低,从而避免纤维蛋白的过多凝聚。
纤溶酶的激活途径
纤溶酶原有内源性及外源性两条激活途径。①内源性激活:指血液中存在有能使纤溶酶原激活的活化因子,它可能来自静脉或微静脉的内皮细胞,其活性在上肢静脉较之下肢静脉高,这是下肢静脉血栓比上肢静脉多的原因之一。此外在血液中还存在一种活化因子原,当机体的凝血反应一旦被启动,激活的凝血因子之一——凝血因子Ⅺ除参与
纤溶酶的激活途径
纤溶酶原有内源性及外源性两条激活途径。①内源性激活:指血液中存在有能使纤溶酶原激活的活化因子,它可能来自静脉或微静脉的内皮细胞,其活性在上肢静脉较之下肢静脉高,这是下肢静脉血栓比上肢静脉多的原因之一。此外在血液中还存在一种活化因子原,当机体的凝血反应一旦被启动,激活的凝血因子之一——凝血因子Ⅺ除参与
抗凝溶栓疗法治疗心脑综合征介绍
对进展性脑梗死包括脑栓死有一定疗效。对高龄及严重脑动脉硬化、出血性脑梗死均应慎用,而且应排除小灶性脑出血,治疗前应进行CT脑扫描。治疗过程中应慎用青链霉素、卡那霉素、氯霉素、新霉素因可降低凝血酶原活性。药物包括肝素静脉滴注、口服华法林、双香豆乙酯(新双香豆素)醋硝香豆素(新抗凝片)等应由有经验医
关于急性缺血性脑中风的溶栓治疗介绍
(一 )静脉内溶栓 :静脉内溶栓治疗最大的优点是简便、快速、非侵袭性 ,能缩短从发作到治疗的时间。缺点是有出血的危险 ,以及血管再通率较低、溶栓后再闭塞等。研究表明 ,神经功能缺损出现后的几个小时内 ,应用静脉内溶栓对改善脑中风有效 ,中风发作后 3小时内且CT正常时使用该疗法 ,效果较佳。一般
早期静脉溶栓联合PCI治疗在STEMI救治中的探析
我国ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)发病突然,死亡率高,使用血运重建方式和开通梗死动脉方式能够挽救患者的生命,改善患者的预后。院内序贯的再灌注治疗 策略,即诊断明确的STEMI患者,30min内无法决定(Pr
人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒
人纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 PAP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PAP与单抗结合,加入生物素化的抗人PAP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Str
概述葡激酶的临床应用
重组葡激酶是一种强效且具有纤维蛋白特异性的新型纤溶酶原激活剂类的溶栓药物。目前,用于治疗心肌梗死和脑栓塞等血栓疾病的溶栓药物主要有:组织纤溶酶原激活剂(tissue type plasminogen activator,tPA)、尿激酶(urokinase)、链激酶(streptokinase)
稻曲菌分泌枯草杆菌蛋白酶抑制水稻免疫的分子机制
稻曲菌UvPr1a靶向降解水稻OsSGT1抑制寄主免疫的分子模型南湖新闻网讯(通讯员 李夏冰)近日,我校植物科学技术学院黄俊斌教授团队在Plant Physiology在线发表了题为“A secreted fungal subtilase interferes with rice immunity
PPO粗酶液的纯化
实验材料 葡聚糖凝胶SephadexG-200干粉试剂、试剂盒 Tris-HCL缓冲液NaCL聚已二醇DEAE-纤维素DE52仪器、耗材 试管试管架烧杯玻璃搅棒移液管滴管试剂瓶层析柱pH计恒流泵梯度混合仪核酸蛋白监测仪GL-20C高速冷冻离心机DL-7A大容量低速冷冻离心机
PPO粗酶液的纯化
实验概要本实验利用葡聚糖凝胶柱层析对PPO粗酶液进行了纯化。实验原理1. 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素DE5
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素
酶的提取和分离纯化
(一)细胞破碎处理 许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指
亲和层析纯化胰酶
一、实验目的与原理生物大分子化合物的重要特征之一是具有与某些相对应的分子通过次级键或共价键专一结合的能力即亲和力。例如酶与抑制剂之间,抗原与抗体之间,结合的双方不仅是专一的,而且结合以后可以在不丧失生物活性的基础上用物理或化学的方法进行解离。根据这一特性,如果把具有亲和力的一对分子的某一方连接于水不
PPO粗酶液的纯化
凝胶层析法 实验方法原理 葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后
酶的分离纯化方法简介
酶的分离纯化方法简介生物细胞产生的酶有两类:一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶,称为细胞外酶。这类酶大都是水解酶,如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶,就是由枯草杆菌和根酶发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高,容易得到;另一类酶在细胞内产生后并不分泌到细胞外,而在细胞内起催化作用,称为细胞内酶,
酶的提取和分离纯化
(一)细胞破碎处理 许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法
酶的提取和分离纯化
(一)细胞破碎处理 许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用
胰蛋白酶(trypsin)纯化
[原理]胰蛋白酶与另外两种蛋白水解酶:糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)和弹性蛋白酶同时存在于胰脏中。由于胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶的酶蛋白分子在结构上及其它很多性质上的相似之处,往往在一般的制备过程中很难将它们彼此彻底分开,传统的分离、纯化技术难以达到十分满意的结果,但采用亲和层析技术,大大提高了分离纯