EMBL科学家发布新荧光标记技术

欧洲分子生物学实验室EMBL的科学家们在12月8日的《Nature Methods》上发表了一种新标记技术,为人们揭示了小鼠神经系统的更多细节。研究者们可以在此基础上很方便的使用各种人工标记,拓展自己的研究范围,提高荧光成像的分辨率。“这一技术能帮我们看到之前看不清楚的细节,”这项研究的领导者,EMBL的Paul Heppenstall说。“比如皮肤上毛发附近的神经结构。”SNAP-tag诞生已经差不多有十年了,这个标记系统已经被广泛用于体外培养的细胞。SNAP-tag系统主要是利用SNAP蛋白与其底物(苯甲基鸟嘌呤)的特异性结合,这是一种非常牢固的结合。苯甲基鸟嘌呤在生化条件下相当稳定,没有其他蛋白会和这类物质作用,因此SNAP标签反应的特异性很高。Heppenstall团队首次将这种标记用到了活体小鼠的神经元中。这个方法支持几乎任何荧光标签,能克服研究复杂组织和动物体时面临的特殊挑战。举例来说,Heppenstall等人为了......阅读全文

荧光PCR原理

1.荧光染料荧光基团通常各自拥有单一的光吸收峰。在光的刺激下,荧光基团吸收光的能量后通常以三种方式释放出能量:1) 光能 许多荧光基团吸收光能后仍旧以光能形式释放能量,并且发射光的峰值大于吸收峰。比如荧光染料Fam的光吸收峰为490nm,而发射峰为530nm。 2) 热能 某些荧光基团吸收光能后,能

什么是荧光

荧光是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。

什么是荧光

荧光是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。

荧光检测方法

荧光检测是一种自然发光反应,通过荧光素酶与 ATP进行反应,可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣,在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量,并以数字形式予以表示,在1975年首先被应用到食品工业中,在1985年在化妆品制造业中得到应用。荧光定量:采用国际主流的荧光定量PCR技术,迅速提升

荧光免疫分析

免疫分析是基于蛋白抗原和抗体之间、或者小分子半抗原与抗体之间的特异反应的分析方法,是生物分析化学的重要内容之一。其中,用荧光物质作为标记的免疫分析即为荧光免疫分析。作为荧光标记物,应具有高的荧光强度,其发射的荧光与背景荧光有明显区别;它与抗原或抗体的结合不破坏其免疫活性,标记过程要简单、快速;水溶性

激光荧光分析

激光荧光分析采用发射光强度大,波长更纯的激光作光源,该光源大大提高了荧光分析方法的灵敏度和选择性。利用激光光源的相干性可以产生非常理想的辐射,以激光为光源可以使仪器仅仅使用一个单色器,加上利用可调谐激光器的可调功能获取激发光谱发射光谱。目前,激光诱导荧光分析法已经成为分析超低浓度物质的灵敏而有效的方

什么是荧光?

荧光是物质吸收电磁辐射后受到激发,受激发原子或分子在去激发过程中再发射波长与激发辐射波长相同或不同的辐射。当激发光源停止辐照试样以后,再发射过程立刻停止,这种再发射的光称为荧光。

叶绿素荧光参数

叶绿素荧光参数是用来评估植物光合作用效率和生理状态的重要指标。通过测量叶片的荧光辐射,可以获取多个参数,如最大光化学效率(Fv/Fm)、有效光化学效率(Fv'/Fm')、非光化学淬灭系数(qN)等。Fv/Fm反映光合机构的整体健康状况,Fv'/Fm'则考察光合反应中光

分子荧光寿命

荧光寿命(lifetime):去掉激发光后,分子的荧光强度降到激发时最大荧光强度的1/e(备注:e为自然对数的底数,其值约为2.718)所需要的时间,称为荧光寿命.荧光分子处于S1激发态的平均寿命,可用下式表示:τ f = 1 /(kf + ΣK)(典型的荧光寿命在10-8~10-10s)  kf表

什么是荧光

荧光是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。

低温荧光分析

通常荧光分析都在室温下进行,荧光光谱为带光谱,由于各种变宽因素,谱带往往较宽。自然界有许多有机化合物,其化学结构颇为接近,而且各存在着多种同分异构体和衍生物,它们的光谱往往相互重叠,难以鉴别表征以及定量测定。环境因素对分子荧光会产生显著的影响,温度是其中一个主要因素。随着温度的降低,介质黏度增大,荧

荧光造影分析

1.臂一视网膜循环时间(arm-retina circulation time ,A-Rct )荧光素从肘前静脉注射后,经右心→左心→主动脉→颈总动脉→颈内动脉→眼动脉而到眼底,为时7~12秒(但亦有长达15~30秒者),两眼相差不能超过0.5~1秒。2.视网膜血循环的分期及荧光形态荧光素钠经眼动脉

荧光定量PCR

  荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结

荧光免疫技术

荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibod

荧光检测方法

荧光检测是一种自然发光反应,通过荧光素酶与 ATP进行反应,可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣,在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量,并以数字形式予以表示,在1975年首先被应用到食品工业中,在1985年在化妆品制造业中得到应用。荧光定量:采用国际主流的荧光定量PCR技术,迅速提升

荧光成像系统

用荧光显微镜进行3D球状体荧光成像时,需要进行仪器设置优化和使用高级功能才能得到更好的成像结果。对球状体进行Z轴层扫时,需要选择合适的物镜并进行合适地聚焦才能拍出更清晰的图片。EVOS细胞成像系统和配套的CellesteTM成像分析软件可以完美地对球状体的大小、结构和蛋白表达水平进行定性和定量分析。

荧光光谱

荧光光谱:荧光光谱包括激发谱和发射谱两种。激发谱是荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况,也就是不同波长的激发光的相对效率;发射谱则是某一固定波长的激发光作用下荧光强度在不同波长处的分布情况,也就是荧光中不同波长的光成分的相对强度。 既然然激发谱是表示某种荧光物质在不同

叶绿素荧光参数

叶绿素荧光参数是用来评估植物光合作用效率和生理状态的重要指标。通过测量叶片的荧光辐射,可以获取多个参数,如最大光化学效率(Fv/Fm)、有效光化学效率(Fv'/Fm')、非光化学淬灭系数(qN)等。Fv/Fm反映光合机构的整体健康状况,Fv'/Fm'则考察光合反应中光

免疫荧光

Immunofluorescence Technique (Spector Lab)protocol for immunofluorescence on cells  Immunofluorescence Protocol (Walter Steffen)Methanol fixationForma

荧光的产生

物质吸收光能后所产生的光辐射称之为荧光和磷光单重态和三重态。分子中的电子运动包括分子轨道运动和分子自旋运动,分子中的电子自旋状态,可以用多重态2S+1描述,S为总自旋量子数。若分子中没有未配对的电子,即S=0,则2S+1=1,称为单重态;若分子中有两个自旋方向平行的未配对电子,即S=1,则2S+1=

叶绿素荧光参数

叶绿素荧光参数是用来评估植物光合作用效率和生理状态的重要指标。通过测量叶片的荧光辐射,可以获取多个参数,如最大光化学效率(Fv/Fm)、有效光化学效率(Fv'/Fm')、非光化学淬灭系数(qN)等。Fv/Fm反映光合机构的整体健康状况,Fv'/Fm'则考察光合反应中光

荧光成像系统

对完全校准好的荧光成像系统,当用不同的滤色镜组时,样品上一个点在检测器上精确成像为一个点,也就是像素对像素。然而,不同颜色的通道 merge 时,物镜的色差校正不够、滤镜光路没有完全对准都会使得荧光信号之间的记录有差错。对具有复杂图案的图像或明暗信号相混的图像,这个可能就检测不到。会得出这样的结论:

流式荧光技术

流式荧光技术又称液态芯片技术(Luminex xMAP技术),其整和了荧光编码微球、激光分析、应用流体学及高速数字信号处理等多项最新科技,是美国Luminex公司于上世纪末开发出的新一代高通量发光检测技术。目前该技术已被广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别等领域,并得到各权威机构和

荧光测量配置

荧光测量常用配置光谱仪 AvaSpec- 2048光谱仪 (推荐-TEC型光谱仪)VA 光栅 (360-1100nm), 200µm 狭缝, DCL-UV, OSC软件 AvaSoft-Full 全功能软件光源 AvaLight-LED光源或 AvaLight-DH-S氘-卤钨灯光纤/探头 FCR-

同步荧光分析

同步荧光分析由Lloyd首先提出,它与常用荧光测定最大的区别是同时扫描激发和发射两个单色器波长,由测得的荧光强度信号与对应的激发波长(或发射波长)构成光谱图,即同步荧光光谱。按光谱扫描方式的不同,同步荧光分析可以分为恒(固定)波长法、恒能量法、可变角法和恒基体法。同步荧光分析具有光谱简单,谱带窄、分

荧光偏振简介

Perrin于1926年首先描述了荧光偏振理论,他观察到溶液中的荧光分子在受到偏振光激发时,如果在激发时分子保持静止,该分子将发出固定偏振平面的发射光(发射光仍保持偏振性)。然而,如果分子旋转或翻转那么发射光的偏振平面将不同于初始激发光的偏振平面。分子的偏振性与分子旋转驰豫时间成比例,分子旋转驰豫时

荧光倍频峰会随荧光信号减弱而减弱吗

一般来说,扫描荧光光谱应该从波长大于激发光的波长约 5 nm 处作为扫描起点,原因有两点:1) 避免激发光的干扰;2) 从能级上来看,荧光光谱不可能在小于激发波长的位置采集到信号.因为激发光的能量决定了将分子中的电子激发至能跃迁到的最高能级,因此,从这个能级向下跃迁而发出的荧光波长不可能小于激发光的

荧光测硫仪紫外荧光法测定原理

荧光测硫仪紫外荧光法测定原理荧光测硫仪(硫含量测定仪)可广泛用于石油、化工、电力、煤炭、食品、环境保护及其它领域,是国内外较为先进的硫分析仪器。是采用物理分析方法, 快速测定水泥中SO3的百分含量,能让水泥企业即时调整水泥中石膏的掺入量并预知用该种水泥生产的混凝土的凝固时间,还可以应用于需要分析SO

FITC荧光二抗?——EarthOx新型DyLight-488绿色荧光

FITC(Fluorescein Isothiocyanate,异硫*酸荧光素)是一种绿色荧光团,在免疫学实验里,经常被用于荧光团标记到相应的检测分子,如抗体上。FITC的纯品为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为 490~495nm,最大发射光波长

关于荧光分析法的荧光的产生介绍

  根据波兹曼 (Boltzmann)分布,分子在室温时基本上处于 电子能级的基态。当吸收了紫外-可见光后,基态分子中的电子只能跃迁到激发单重态的各个不同振动-转动能级,根据自旋禁阻选律, 不能直接跃迁到激发三重态的各个振动-转动能级。  处于激发态的分子是不稳定的,通常以辐射跃迁和无辐射跃迁等方式