GFP抗体|GFP抗体检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗体

检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein)的简称,由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP标签系统等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。我们都知道GFP抗体能应用于GFP的表达检测、纯化以及定位分析。那么该如何检测GFP其他的一些突变体,如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表达和定位呢?我们来看一下GFP标签与其它突变体标签的关系。YFP(Yellow Fluorescent Protein)是黄色荧光蛋白,其序列与GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代,这样的GFP不发出绿色荧光,而发出较长波长的黄色荧光......阅读全文

GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验-1

实验材料 进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸消化缓冲液NN-二甲基甲酰胺磷酸钠磷酸盐缓冲溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 单功能硫代吲哚花菁琥珀酰亚胺酯抗体SDS-聚丙烯酰胺凝胶明胶溶液聚-L-赖氨酸质粒 DNAGFP 融合载

GFP-和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验-2

16. 标记反应以后,采用下述公式计算标记率:                                           Aλ X M / [ ( A280-ƒ X Aλ ) X ελ ]式中 Aλ是染料在其最大吸收波长λ处的吸收度,A280 是蛋白质在 280nm 的吸收度,M 是以

GFP在大肠杆菌中的诱导表达和细菌蛋白的超声破碎抽提

[实验原理] 把含有外源基因的表达载体转化的大肠杆菌在有相应抗菌素和诱导物的条件下培养,可以诱导外源蛋白在大肠杆菌中表达。利用溶菌酶、反复冻融或超声波破碎的方法将诱导培养的细菌的细胞壁破碎后,可使那些可溶性的外源蛋白释放出来,再利用硫酸铵沉淀、蛋白质层析技术和制备电泳等方法能够将外源

我国学者利用甲肝病毒揭示外泌体内容物装载新模式

  1月22日,中国科学院上海巴斯德研究所龙钢课题组在国际期刊J.Extracellular Vesicles 在线发表了一篇关于病毒外泌体包装的研究论文“Hepatitis A virus structural protein pX interacts with ALIX and promotes

方案1-用-FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀

实验材料抗 FLAGM2 单克隆抗体293 T 细胞试剂、试剂盒抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素仪器、耗材大型离心机配有检测 GFP 滤片

Hoxb5细胞的命运我做主将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞

  小编:天地悠悠过客匆匆潮起又潮落~~~   小鼠甲:咳咳,咱们是个严肃的科普节目……   小编:天地洪荒,宇宙万物,生命起源,又到了万物~~~   小鼠乙:(咆哮体)现在是冬天!冬天!咱们几(今)天要讲的是细胞!细胞!   小编:呃(⊙o⊙)… 好吧,咱们今天要讲的是细胞(*^▽^*),

【技术方案】微孔板内细胞固定和抗体染色自动化解决方案

以往,我们使用显微镜做荧光成像的时候,常常将样本放在载玻片上。但是随着样本量增加,细胞实验使用 96 孔和 384 孔微孔板逐渐成为趋势,这与高内涵(high-content analysis,HCA)分析不谋而合。高内涵分析是一种高通量识别并分析由与细胞相互作用的物质所带来的细胞表型变化的方法。这

绿色荧光蛋白融合抗体研究

  融合抗体  近二十年来,抗体生成技术有了飞速发展,已经从细胞工程抗体(杂交瘤技术一单克隆抗体)发展到了第三代抗体:基因工程抗体,尤其是噬菌体抗体库技术的出现,解决了人源抗体的研制问题,促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体(Single-chain variable

Science专题:癌症抗体,艾滋病抗体

  早在一百多年前,Paul Ehrlich就创造出“magische Kugel(魔球)”,“magic bullet”这样的短语,科学家们多年以来也一直努力不懈的进行研究,希望能研发出对抗从癌症到克罗恩病的疾病靶向治疗方法。终于在四十年前,一项技术的诞生,令这一期望不再遥不可及,这就是杂交瘤

概述抗原抗体反应抗体催化的原理

  1986年,由P.G.schultz和R.A.Lerner分别领导的两个小组同时证明抗体具有催化活性。针对一个四面体带电荷的磷酸酯半抗原产生的抗体,能有选择性地催化相应的碳酸脂和羧酸脂的水解反应。他们将这种有催化活性的抗体称为催化性抗体(catalytic antibody),又称抗体酶(abo

抗原抗体反应抗体基因的改造简介

  将鼠源抗体的V区基因与人源抗体C区基因重组,获得的嵌合抗体(chimericalantibody),可保留鼠抗体对抗原的高亲和性,又减弱鼠源抗体对人的免疫原性,提高治疗性抗体的效果。  重组的嵌合抗体基因转化骨髓瘤细胞或中国地鼠卵细胞(CH0),可在其中表达。为了进一步地消除鼠抗体V区框架区(F

REAfinity重组基因工程抗体REA抗体

REAfinity流式抗体,即Recombinant Engineered Antibody(重组基因工程改造抗体),经基因工程改造,对Fc段序列进行点突变,使其不会对FcR受体产生非特异性的结合。序列优化和突变后,使得REA抗体与传统大鼠、小鼠单克隆抗体相比优势明显。 1 |        

单域抗体|纳米抗体|VHH文库构建

单域抗体,也称为VHH(Variable domain of heavy chain of HCAb)抗体或纳米抗体,是一种小型抗体分子。与传统抗体相比,VHH具有更小的分子尺寸、更高的稳定性和更易于工程化的特点,具有广泛的生物医学应用潜力。单域抗体文库的构建是开发和优化这些抗体的关键步骤之一。 一

IgM抗体和IgG抗体的区别是?

IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生

关于多克隆抗体的抗体鉴定介绍

  抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼

怎么亚细胞定位分析

用报告基因技术呀 比如说最常用的绿色荧光蛋白GFP或者改造过的EGFP等。和目的基因构建成为融合蛋白,转入细胞中以后,用激光扫描共聚焦显微镜就可以观察到基因的亚细胞定位

细菌抗体检测前准备

  向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑;一般选取血液进行检测,采血前1d应清淡饮食,避免饮酒以免影响结果,采血时避免情绪紧张,采血当日不需要空腹。

自身抗体检测的分类

  1.抗核抗体检测抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称,主要是IgG,其次是IgM和IgA,无器官和种属特异性。ANA在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA检测在临床自身免疫病

自身抗体检测的介绍

  自身抗体是自身免疫性疾病患者中针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体,是自身免疫性疾病的重要标志。常见的自身抗体主要有抗核抗体、类风湿因子、抗中性粒细胞胞浆抗体等。每种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体,高效价自身抗体是自身免疫性疾病的特点之一,也是临床确诊自身免疫性疾病的重要依据。许多自身

抗体检测的临床应用

  首先抗体检测用于诊断时,要考虑到患者所在地区该疾病的发病情况及与该疾病密切相关的情况,如正常人血清中抗体的水平,这一点在病原微生物感染的疾病中尤为重要。有些感染性疾病(例如病毒感染性疾病),往往采用“双份血清法”,根据发病初期及患病后某个时期抗体增长的情况进行诊断。  众所周知,许多感性疾病初期

新冠抗原抗体检测

  疫情动态  根据世卫组织最新实时统计数据,截止小编撰稿,目前全球确诊新冠肺炎2248654例。世卫组织发言人玛格丽特·哈里斯14日表示,疫情尚未到达顶峰,就单个国家而言,目前美国的新冠疫情是全球最严重的,美国新冠肺炎确诊病例已超过73万,意大利确诊病例累计175925例,西班牙确诊病例达1944

自身抗体检测的分类

  1.抗核抗体检测抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称,主要是IgG,其次是IgM和IgA,无器官和种属特异性。ANA在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA检测在临床自身免疫病

简述抗体检测的意义

  一般来说,诊断感染性疾病,如能从标本中直接检测到病原体是最理想的,但由于某些病原体生长所需条件高,生长时间长、检出的阳性率低,给临床诊断带来一定困难。特异性抗体的检出在一定程度上可弥补以上的不足。近年来逐步发展起来的用免疫学方法测定标本中的病原抗原,或用分子生物学技术测定感染因子,无疑对感染性疾

B细胞分泌抗体的检测

基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞(P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板(Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) , 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 107 个细

动物疫病抗体ELISA检测技术

ELISA中文全称是酶联免疫检测吸附试验, 其核心是抗原抗体固相化及抗原抗体酶标记技术, ELISA检测方法间接法、 夹心法、 阻断法等多种检测方法,其不同的检测方法各有优劣。同时, 其他的产品组份及操作细节同样影响着终的试验结果。 1.ELISA试剂盒的选择 1.1 产品的技术参数选

EB病毒抗体的检测方法

  1)在细胞涂片上加入最终浓度为1∶10的NPC病人血清和1∶10正常人血清,置37℃湿盒内1h。  (2)用BSS液浸洗3次,每次5min。  (3)加1∶10稀释的HRP标记的抗C3抗体,置37℃温盒内30min。  (4)再BSS液洗3次。  (5)浸入酶底物(50mg 3,3'-二氨基联苯

抗核抗体检测方法

ANA的检测方法 由于ANA的复杂性及多样性,故测定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等。 1.免疫荧光法检测血清总ANA最常用的方法是荧光免疫组化法。多用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质,结果比较稳定可靠,在荧光显微镜下见到

HIV抗体检测要做多久

  艾滋病病毒进入人体后,人体免疫系统可以产生相应的艾滋病病毒抗体。检测血液中的艾滋病病毒抗体是目前最常用的确诊艾滋病病毒感染的实验室方法。那么, HIV抗体检测要做多久 ?HIV抗体检测要做多久  1、酶联法 :即“酶联免疫法”,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测

不孕不育抗体7项检测

不孕不育的免疫学检查包括男性抗精子自身免疫不育、女性抗精子同种免疫不育和女性抗透明带免疫不育。不孕不育抗体7项包括: 1、抗心磷脂抗体测定(ACA)    与复发流产,死胎及全身性红斑狼疮,神经梅毒,多发性硬化症,格林一巴利综合征等神经系统疾病关系密切。 2、抗子宫内膜抗体测定(EmAb)   用于