B细胞分泌抗体的检测

基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞(P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板(Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) , 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 107 个细胞/2m l 。室温 , 400 g 离 心 IOmin,弃上清。加 入 RPMI- 5 完全培养基,重复洗涤至少 4 次 。2 . 再次计数 P B M C ,用 R P M I -I O 完全培养基调整浓度至 5X I O 5 个细胞/ml。在 9 6 孔板中加入 0.2m l 细 胞 悬 液(每 孔 I X I O 5 个细胞)。各实验组设 2 复孔。避免使用培养板四周边缘的孔。细胞培养时间较长时,周边孔中应加满水以减少实验孔的液体挥发。3 . 加 入 20ul PWM (最......阅读全文

B细胞分泌抗体的检测

基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞(P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板(Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) , 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 107 个细

简述效应B细胞的分泌方式

  成熟的浆细胞可通过不同的方式向胞外分泌免疫球蛋白:  (1)局部分泌:这是所有分泌性细胞的共有分泌方式。在浆细胞内质网囊腔中合成的免疫球蛋白分子,先以芽生的方式形成许多小囊泡,然后输送到高尔基复合体进行加工、浓缩和贮存,最后,充满免疫球蛋白分子的小囊泡游离到细胞质膜的内表面,与细胞质膜相溶合并通

单个B细胞抗体制备技术原理

单个B细胞技术是近年来新发展的一类快速制备单克隆抗体的技术,是根据每一个B细胞只含有一个功能性重链可变区DNA序列和一个轻链可变区DNA序列,以及每一个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性B细胞,通过单细胞PCR技术从单个抗体分泌B细胞中扩增IgG重链和轻链可变区

单B细胞抗体的制备及应用

单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具。它在蛋白质结构与功能、疾病诊断、药效学和临床应用等方面发挥着不可或缺的作用。近年来,随着分子生物学和细胞生物学的发展,单个B细胞抗体的制备技术开始兴起并逐渐得到广泛应用。采用单B细胞抗体技术制备的单克隆抗体具有全人源性、高特异性和均一性的特点。在治疗病原微

单个B-细胞抗体制备技术过程

1. 鉴定和分离单个B 细胞细胞来源:外周血中分离浆细胞;外周血中分离单个记忆B 细胞;骨髓中分离前B 细胞。在样品丰富的情况下,为提高特异性抗体得率,可以在分离B 细胞之前先通过密度梯度法,或流式细胞分选从外周血中粗分离B淋巴细胞,以ELISPOT 进行抗原特异性细胞丰度的评价,从而选择含抗原特异

分泌抗体的介绍

  为进一步证明分泌的致病抗体,课题组克隆和表达了副肿瘤性天疱疮特异性自身抗原(斑蛋白),证明了肿瘤细胞分泌的抗体是针对斑蛋白家族中包斑蛋白、周斑蛋白等细胞连接蛋白,与患者血液中致病抗体是相同的。课题组还证明与副肿瘤性天疱疮伴发的其他肿瘤如胸腺瘤、滤泡树突状细胞肉瘤中的B细胞同样能分泌特异性致病抗体

分泌抗体的介绍

  为进一步证明分泌的致病抗体,课题组克隆和表达了副肿瘤性天疱疮特异性自身抗原(斑蛋白),证明了肿瘤细胞分泌的抗体是针对斑蛋白家族中包斑蛋白、周斑蛋白等细胞连接蛋白,与患者血液中致病抗体是相同的。课题组还证明与副肿瘤性天疱疮伴发的其他肿瘤如胸腺瘤、滤泡树突状细胞肉瘤中的B细胞同样能分泌特异性致病抗体

关于免疫细胞的功能检测—抗体分泌细胞检测的介绍

  分泌抗体的浆细胞由B细胞分化而来,但在此分化过程中,往往需要T细胞与单核–巨噬细胞协作。因此,对抗体分泌细胞的检测,实际上是对B细胞、T细胞和巨噬细胞功能的综合性评价。抗体分泌细胞的检测可分为针对某种抗原的特异抗体分泌细胞的检测,以及无一定特异性的免疫球蛋白分泌细胞的检测。在自然条件下,体内存在

人源抗体开发——B细胞永生化-(二)

2.3 遗传修饰以促进抗凋亡因子表达原癌基因BCL-6属于抗细胞凋亡家族,具有转录抑制功能,可促进B细胞增殖,同时抑制B细胞向浆细胞分化,BCL-xL作为BCL-2家族成员蛋白,通过与促凋亡蛋白的拮抗作用从而抑制细胞凋亡。Kwakkenbos等利用逆转录病毒转导系统将BCL-6和BCL-xL基因导入

人源抗体开发——B细胞永生化-(一)

人源单克隆抗体具有免疫原性低、半衰期长等优势,成为了体内应用中不可或缺的生物制剂。人类抗体库为人源单克隆抗体的制备提供了丰富的来源,人B细胞永生化是获得人类抗体库的潜在有效方法,可应用于人源单克隆抗体的制备。由于各平台均有亟待解决的问题,基于人B细胞永生化的抗体制备尚局限在实验室研究阶段,本文以明确

抗A、抗B抗体

和一切抗体一样,血型抗体也是免疫球蛋白,天然抗体主要是IGM,免疫体主要是IGG。但这种区分界限也不十分明确,事实上人的IGM和IGG血型抗体往往同时存在。抗A和抗B可以完全是IGM,也可以是IGN与IGG,甚至是IGM、G、a 混合。总体而言,抗A与抗B主要是IGM,而O型血清中是以IGG为主

分泌细胞简介

  分泌物质贮藏在分泌细胞内,分泌细胞中贮存油、黏液、单宁、树脂、结晶和橡胶等分泌物,当分泌物质充满细胞时,细胞壁木栓化而成为死细胞。如桂皮、姜的分泌细胞贮有挥发油称为油细胞;半夏、玉竹的分泌细胞贮有粘液称为粘液细胞。  分泌细胞(secretory cell)是由基本分生组织细胞分化而来,通常此种

新冠轻症患者或终身拥有分泌抗体的免疫细胞

      美国研究人员发现,新冠病毒轻症患者痊愈后,体内抗体水平虽然下降,但仍有分泌新冠病毒抗体的免疫细胞。 据路透社报道,美国圣路易斯华盛顿大学医学院研究人员分析轻症患者骨髓样本得出上述结论。研究报告刊载于24日出版的英国《自然》杂志。 新冠病毒感染者在感染初期,血液内免疫细胞迅速增多,

利用抗独特型抗体激活表达广泛中和抗体的前体B细胞

  诱导保护性的广泛中和抗体(broadly neutralizing antibody, bNAb)产生是成功接种疫苗的关键策略。然而,对于许多重要的全球性疾病,如艾滋病和流感,人们尚未实现高效的疫苗接种。  一种开发新疫苗的策略专注于鉴定出病原体上的特定脆弱靶标,疫苗诱导出的保护性抗体应当能够靶

女性免疫力更强?也许与B细胞“抗体工厂”有关

“男女平等”还是“男女有别”这个争论千古的话题,至今也难以给出定论。然在人体免疫力方面,女性通常是高于男性的。B细胞作为“抗体工厂”,能够产生抗体,实现人体的自我保护。比如接种疫苗就是利用这一机制使人体产生保护性抗体,进而预防流感、肺炎等传染病,并且女性人群的效果比男性更好。也就是说抗体发生的强弱由

技术强则药物强单个B细胞抗体制备技术

  如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点,目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。   1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。

腺细胞局质分泌的分泌方式介绍

在解剖学与组织胚胎学中,这些名词可用来形容腺细胞:全质分泌腺细胞在分泌前,胞质中堆积了大量的分泌核,胞核固缩,细胞器消失,细胞解体并随分泌物一起排出。 (皮脂腺、睑板腺)顶质分泌细胞内的分泌颗粒聚集在细胞顶部,连同 顶部胞质一同释放脱落。 (乳腺、大汗腺、耵聍腺等) 。局质分泌腺细胞的分泌颗粒是以胞

青年博士Science解析抗体分泌关键基因

  La Jolla过敏与免疫学研究所,加州大学圣地亚哥分校医学院,耶鲁大学医学院细胞生物学系,等处的研究者在Science 在线版上发布最新免疫学研究成果,Bcl6 and Blimp-1 Are Reciprocal and Antagonistic Regulators of T Follic

技术强则药物强—单个B细胞抗体制备技术(一)

如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点,目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。 1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。随后的50年,

技术强则药物强—单个B细胞抗体制备技术(二)

3)微雕刻和ISAAC方法分选B细胞微雕刻技术原理[7]是基于软光刻微阵列芯片识别、克隆抗原特异性B细胞的方法。通过刺激多克隆B细胞,并将其逐个分布到芯片孔内进行培养产生抗体,然后将改芯片孔内抗体转印至相应的蛋白芯片,通过与目标抗原反应后,再与荧光抗体反应,最后根据荧光抗体染色结果,通过显微操作将分

浆细胞局质分泌的主要分泌方式介绍

成熟的浆细胞可通过不同的方式向胞外分泌免疫球蛋白:局部分泌这是所有分泌性细胞的共有分泌方式。在浆细胞内质网囊腔中合成的免疫球蛋白分子,先以芽生的方式形成许多小囊泡,然后输送到高尔基复合体进行加工、浓缩和贮存,最后,充满免疫球蛋白分子的小囊泡游离到细胞质膜的内表面,与细胞质膜相溶合并通过反向吞噬,将内

腺细胞局质分泌的主要分泌方式介绍

在解剖学与组织胚胎学中,这些名词可用来形容腺细胞:全质分泌腺细胞在分泌前,胞质中堆积了大量的分泌核,胞核固缩,细胞器消失,细胞解体并随分泌物一起排出。 (皮脂腺、睑板腺)顶质分泌细胞内的分泌颗粒聚集在细胞顶部,连同 顶部胞质一同释放脱落。 (乳腺、大汗腺、耵聍腺等) 。局质分泌腺细胞的分泌颗粒是以胞

OsCCT1b抗体的制备

实验概要本实验构建了含OsCCTlb的原核表达载体,获阳性克隆。诱导表达纯化后免疫兔子,制备了OsCCT1b抗体。实验步骤1. 载体构建将高保真PCR扩增的OsCRYlb基因的C末端OsCCTlb克隆到pET-21a( )载体中,得到的阳性克隆转化如大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。2.

OsCCT1b抗体的制备

实验概要本实验构建了含OsCCTlb的原核表达载体,获阳性克隆。诱导表达纯化后免疫兔子,制备了OsCCT1b抗体。实验步骤1. 载体构建将高保真PCR扩增的OsCRYlb基因的C末端OsCCTlb克隆到pET-21a( )载体中,得到的阳性克隆转化如大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。2.

如何选择Lamin-B1抗体?

Lamin B1是一种蛋白质,在人类由LMNB1基因编码,核纤层由位于内核膜旁边的蛋白质的二维基质组成,层系蛋白家族构成基质并在进化过程中高度保守的。在有丝分裂过程中,板矩阵是可逆拆卸核纤层蛋白蛋白质磷酸化。核纤层蛋白的蛋白质被认为是参与核稳定、染色质结构和基因表达。脊椎动物核纤层蛋白包括两种类型,

壁细胞还分泌什么?

  胞间层:胞间层是细胞壁与细胞膜之间的一层黏性物质,主要由果胶、半纤维素等多糖组成。胞间层有助于维持细胞间的紧密联系,保持组织结构的稳定性。  纤维素:纤维素是植物细胞壁的主要成分,由葡萄糖分子通过β-1,4-糖苷键连接而成的线性多糖。纤维素为植物提供强度和刚性,使其能够抵抗外界压力。  木质素:

什么是壁细胞分泌?

  壁细胞分泌是指在植物细胞壁的合成过程中,由细胞壁合成相关的酶催化合成壁基质的过程。这些酶包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶等,它们能够将细胞壁中的多糖类物质分解成单糖分子,并参与新的壁基质的合成。壁细胞分泌是植物细胞壁形成和修复的重要过程,对于植物的生长和发育具有重要的影响。

浆细胞的分泌方式

  成熟的浆细胞可通过不同的方式向胞外分泌免疫球蛋白:  (1)局部分泌:这是所有分泌性细胞的共有分泌方式。在浆细胞内质网囊腔中合成的免疫球蛋白分子,先以芽生的方式形成许多小囊泡,然后输送到高尔基复合体进行加工、浓缩和贮存,最后,充满免疫球蛋白分子的小囊泡游离到细胞质膜的内表面,与细胞质膜相溶合并通

细胞分泌因子的调控

干细胞的细胞膜表面存在多种细胞因子受体,当细胞因子与其受体结合后,使受体结构发生改变,引起一系列变化,从而调控皮肤干细胞的增殖和分化。角质细胞生长因子,表皮生长因子,转化生长因子和抑制性信号物质(如肾上腺素)等都参与皮肤增殖调控。例如,角质细胞生长因子与其受体结合后可促进其受体的二聚体化以及自身的磷