常用抗原的修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片:1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂)配制,取该粉剂一包溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,其pH值在6.0 ± 0.1,如因蒸馏水本身造成的pH值偏差,请自行调整。(1)高压热修复 切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0,工作液)或0.001M EDTA(pH8.0)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接......阅读全文
常用抗原修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片: 1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064
常用抗原的修复方法
用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片:1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓
抗原修复方法
至今为止,抗原修复有许多种方法,在这些方法中,有的是根据抗体的要求来进行,有的是根据抗原的表达程度来进行,我们则对每种病例每项检测,都要求必须进行抗原修复,以达到抗原全面表达的*佳状态。 1. 真空负压抗原修复法: ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗,蒸馏水
抗原修复方法介绍(抗原热修复和酶消化方法)
抗原修复主要用于福尔马林或多聚甲醛固定的石蜡包埋组织切片。1、抗原热修复(1)高压热修复在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)。盖上不锈钢高压锅的盖子,但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上,缓慢加压,使玻片在缓冲液中浸泡5分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来。
抗原修复锅的使用方法
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇,通常用到抗原修复锅。强适于甲醛固定的组织,经石蜡包埋后进行免疫染色前的处理,配合特别的抗原修复缓冲液确保你得到最搞质量的免疫染色效果
抗原修复锅的使用方法
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇,通常用到抗原修复锅Antigen Retriever。强烈推荐EMS最具有竞争力的一款产品,适于甲醛固定的组织,经石蜡包埋后进行免疫
抗原的保存与修复的方法有哪些?
在制片过程中,由于广泛的蛋白交联可使组织中某些抗原决定簇发生遮蔽,致使抗原信号减弱或消失。抗原修复是使组织抗原决定簇重新暴露的过程。常用的抗原暴露、修复方法有: 酶消化法(无花果蛋白酶为轻度消化酶;胰蛋白酶为中度消化酶;胃蛋白酶为强消化酶。);盐酸水解法;微波法;高压锅法(适用大批切片);煮沸
关于石蜡切片的抗原修复及方法介绍
石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。 常用的抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,
IHC全攻略6:抗原修复方法
尽管固定对于组织形态的保留是必不可少的,但这一过程对IHC/ICC检测也有不良影响。固定可能会改变蛋白的生化特性,如目的表位被掩盖,或不再与一抗结合。表位的掩盖可能是由氨基酸与表位的交联、表位附近无关肽段的交联、表位构象的改变或抗原静电荷的改变引起的。抗原修复指的是逆转表位掩盖和恢复表位-抗体结
在什么情况下进行组织抗原修复及抗原修复的条件
(1)由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中,发生了蛋白之间交联及醛基的封闭作用,从而失去抗原性。通过抗原修复,使得细胞内抗原决定族重新暴露,提高抗原检测率。 (2)修复方法从强到弱一般分为三种,高压修复、微波修复、胰酶修复。修复液也分为若干种(具体的可以查阅相关资料,大量的:中性的
抗原修复的选择合适的孵育时间
第一抗体的孵育时间,有较多的使用范围,应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟,120分钟,对于研究性质的抗体孵育时间,也可按照上述的时间,但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育,根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜,原因是:1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来,或者被
抗原修复的选择合适的孵育时间
第一抗体的孵育时间,有较多的使用范围,应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟,120分钟,对于研究性质的抗体孵育时间,也可按照上述的时间,但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育,根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜,原因是:1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来,或者被
抗原修复的选择合适的孵育时间
第一抗体的孵育时间,有较多的使用范围,应用于临床检测抗体的孵育时间。一般室温下孵育在30-60分钟,120分钟,对于研究性质的抗体孵育时间,也可按照上述的时间,但也有人提出于4℃冰箱中过夜孵育,根据我们的经验一般不主张于4℃冰箱中过夜,原因是:1.长时间的孵育可以使一些非特异性的物质沉淀下来,或者被
如何确定适用于某种特定抗体的抗原修复方法?
有些抗体对抗原修复方式有特别要求的,一般在其说明书中都会有明确的标注和推荐。但是很多抗体并没有一个特别的推荐,就需要实验者自己来进行优化和摸索了。可以参考51AB网站实验方法中“免疫组化实验方法”以及abcam网站的的IHC protocols page 查看更多的抗原修复方法
常用的九种土壤修复技术
1、热力学修复技术:利用热传导(热毯、热井或热墙等)或热辐射(无线电波加热等实现对污染土壤的修复。2、热解吸修复技术:以加热方式将受有机物污染的土壤加热至有机物沸点以上,使吸附土壤中的有机物挥发成气态后再分离处理。3、焚烧法:将污染土壤在焚烧炉中焚烧,使高分子量的有害物质(挥发性和半挥发性)分解成低
为什么双抗体夹心法是检测抗原的常用方法?
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。那么,为什么双抗体夹心法是检测抗原常用的方法?1、将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2、加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原
双抗体夹心法是检测抗原的常用方法的原因分析
双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。那么,为什么双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法? 1、将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。 2、加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相
噪声计常用故障的分析和修复
显示器无显示 (1)内部电池连线断开或电池接触不好:焊好连线,更换电池接触片。 (2)电池损坏:更换电池。 测量读数明显偏低或校准时校不到94.0dB (1)传声器灵敏度太低或损坏:更换传声器并重新校准。 (2)前置放大器的接点与传声器接触不好:清洗接点。 (3)前置放大器的插头与主
噪声计常用故障的分析和修复
1、显示器无显示 (1)内部电池连线断开或电池接触不好:焊好连线,更换电池接触片。(2)电池损坏:更换电池。 2、测量读数明显偏低或校准时校不到94.0dB。 (1)传声器灵敏度太低或损坏:更换传声器并重新校准。 (2)前置放大器的接点与传声器接触不好:清洗接点。 (3)前置放大器的插
噪声计常用故障的分析和修复
1、显示器无显示 (1)内部电池连线断开或电池接触不好:焊好连线,更换电池接触片。(2)电池损坏:更换电池。 2、测量读数明显偏低或校准时校不到94.0dB。 (1)传声器灵敏度太低或损坏:更换传声器并重新校准。 (2)前置放大器的接点与传声器接触不好:清洗接点。 (3)前置放大器的插
乙型肝炎病毒临床常用检测方法—HBV抗原、抗体检测
乙型肝炎病毒临床常用检测方法—HBV抗原、抗体检测:表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗HBs)、е抗原(HBeAg)、е抗体(抗HBe)和核心抗体(抗HBc)称为乙肝五项,是常用的HBV感染的检测指标,可反映被检者体内HBV水平及机体的反应情况,粗略评估病毒的水平。乙肝五项检测分为定性和定量两
免疫组化抗原修复注意事项
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和
齿轮修复的方法
齿轮磨损失效是生产实际和设备维护保养中经常遇到的问题。对失效齿轮如何恢复其原有性能,延长其使用寿命并减少投入,节约成本一直是人们所关注的问题。下面将目前常用的齿轮磨损失效修复方法总结如下:1、调整换位法 调整换位法是将已磨损的齿轮变换方位,利用齿轮未磨损或磨损较轻的另一齿面继续工作的方法。采用这
抗原的制备方法
实验步骤一、抗原的提取 抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中
抗原的制备方法
实验概要除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。实验步骤一、抗原的提取
抗原的制备方法
实验步骤一、抗原的提取抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中,如
抗原的制备方法
抗原的制备 除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。 一、抗原的提取
ELISA测定的常用模式竞争法测抗原
大分子抗原因其具有两个以上的抗原决定簇,而可用双抗体夹心法测定,小分子半抗原如地高辛、茶碱等药物以及T3,T4及睾酮等激素因其只有一个抗原决定簇,从而无法使用双抗夹心方法测定,只能采用竞争抑制法测定。具体步骤如下:1.先用抗小分子的特异抗体如双抗体夹心法一样包被固相并封闭。2.同时加入待测样本和酶标
抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些
抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针
DNA损伤修复的切除修复方法介绍
又称切补修复。最初在大肠杆菌中发现,包括一系列复杂的酶促DNA修补复制过程,主要有以下几个阶段:核酸内切酶识别DNA损伤部位,并在5'端作一切口,再在外切酶的作用下从5'端到3'端方向切除损伤;然后在 DNA多聚酶的作用下以损伤处相对应的互补链为模板合成新的 DNA单链片