AffinityChromatography
(一)原理 亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。 此法具有高效、快速、简便等优点。 (二)载体的基本要求和选择 理想的载体应具有下列基本条件:①不溶于水,但高度亲水;②惰性物质,非特异性吸附少;③具有相当量的化学基团可供活化;④理化性质稳定;⑤机械性能好,具有一定的颗粒形式以保持一定的流速;⑥通透性好,最好为多孔的网状结构,使大分子能自由通过;⑦能抵抗微生物和醇的作用。 可以做为固相载体的有皂土、玻璃微球、石英微球、羟磷酸钙、氧化铝、聚丙烯酰胺凝胶、淀粉凝胶、葡聚糖凝胶、纤维素和琼脂糖。在这些载体中,皂土、玻璃微球等吸附能力弱,且不能防止非特异性吸附。纤维素的非特......阅读全文
胶囊色谱(Micellar-Chromatography,MC)介绍
又称拟相液相色谱或假相液相色谱(Pseudophase LC),是一种新型的液相色谱技术。特点是应用含有高于临界胶囊浓度的表面活性剂溶液作为流动相。所谓“胶囊”就是表面活性剂溶液的浓度超过其临界胶囊浓度(Critical Micelle Concentration,CMC)时形成的分子聚合体。通常每
AntiDYKDDDDK-tag-(L5)-Affinity-Gel
实验概要Anti-DYKDDDDK tag (L5) affinity gel is a purified rat IgG2a, κ monoclonal antibody covalently attached to agarose by hydrazide linkage. It is us
Poly(A)+RNA-Isolation
Eukaryotic messenger RNA (mRNA) can be separated from the other RNA species in a total RNA preparation by affinity chromatography by virtue of the
常用色谱法介绍亲和色谱法
亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
什么是亲和色谱法?
亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
亲和色谱法
亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
亲和色谱法的技术简介
亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
亲和色谱法的技术特点
亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。
高效液相色谱法词汇
高效液相色谱法:high performance liquid chromatography,HPLC 高速液相色谱法:high speed LC,HSLC 高压液相色谱法:high pressure LC,HPLC 高分辨液相色谱法:high resolution LC
气相色谱层析(gas-chromatography)介绍
基本原理混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。气相色谱仪的基本流程,如图2-26。气相色谱仪的基本部件(1)载气 常用的载气主要有氮、氩、氢和二氧化碳等。这些气体一般都由高压气瓶供给(2)进样器 气相色谱仪可以用于分离固相、气相和液相标本。液相标本采用微升注
Lipid-analysis-Week-3:-GAS-LIQUID-CHROMATOGRAPHY
During this week, you will analyze the fatty acid composition of the individual lipid fractions recovered from the TLC plate. Gas chromatography is a
实验室分析方法亲和色谱法概念介绍
亲和色谱法(affinity chromatography)用连接在基体上的配位体作为固定相,使与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用,利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。
高效液相色谱分析法的原理
它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入待测样品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography
细胞亲和层析的定义
中文名称细胞亲和层析英文名称cell affinity chromatography定 义从混合培养物中将具有特定功能的细胞分离出来的一种层析法。常用的亲和吸附剂有特异性抗体、外源凝集素等。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
细胞亲和层析的概念和应用
中文名称细胞亲和层析英文名称cell affinity chromatography定 义从混合培养物中将具有特定功能的细胞分离出来的一种层析法。常用的亲和吸附剂有特异性抗体、外源凝集素等。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
细胞亲和层析的概念
中文名称细胞亲和层析英文名称cell affinity chromatography定 义从混合培养物中将具有特定功能的细胞分离出来的一种层析法。常用的亲和吸附剂有特异性抗体、外源凝集素等。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
Isolation-of-Functional-Photosystem-II-Core-Particles-From-the-Cyanoba...
This chapter contains the description of several methods used for the isolation of functional photosystem (PS)II core particles from wild-type (w
寡dT纤维素亲和层析的应用
中文名称寡dT纤维素亲和层析英文名称oligo(dT)-cellulose affinity chromatography定 义用于分离纯化信使核糖核酸(mRNA)的层析方法。因真核生物mRNA分子3′端含多腺苷酸尾,可与纤维素上的寡脱氧胸苷酸互补结合。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方
Global-urinary-metabolic-profiling-procedures-using-gas-chromatography
Global urinary metabolic profiling procedures using gas chromatography–mass spectrometry Eric Chun Yong Chan,1 Kishore Kumar Pasikanti1, 2 & Jeremy K
薄层层析(thin-layer-chromatography)操作要点
铺板铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶 G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板
薄层色谱法(thin-layer-chromatography,TLC)
一、目的要求1. 了解薄层层析分离和鉴定有机物的原理和方法;2. 掌握薄层层析分离和鉴定有机物的操作步骤。二、基本原理薄层色谱具有设备简单、速度快、分离效果好、灵敏度高以及能使用腐蚀性显色剂等优点,是一种微量的分离分析方法。它可以与光谱或质谱结合起来,是一种很有发展前途的分析技术。薄层色谱是把吸附剂
色谱法(chromatography)概念、特点和分类
1903年,俄国科学家M.C.ЦВЕТ首创了一种绿叶中分离多种不同颜色色素成分的方法,命名为色谱法(chromatography),由于翻译和习惯的原因,又常称为层析法。近百年来,色谱法不断发展,形式多种多样。50年代开始,相继出现了气相色谱、液相色谱、高效液相色谱、薄层色谱、通透色谱、离子交换色谱
凝集素亲和层析的原理和应用
中文名称凝集素亲和层析英文名称lectin affinity chromatography定 义将凝集素以共价形式与不溶性载体相连接作为亲和吸附剂的层析技术。可用于从混合物中分离或分析糖类及糖复合物,如多糖、糖蛋白、细胞膜碎片、酶、抗体复合物等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术
你必须知道的色谱词汇(一)
色谱图 chromatogram 色谱峰 chromatographic peak 峰底 peak base 峰高 h,peak height 峰宽 W,peak width 半高峰宽 Wh/2,peak width at half height
高效亲和层析的原理和应用
中文名称高效亲和层析英文名称high-performance affinity chromatography;HPAC定 义利用分子间的结合作用(如抗原-抗体、酶-抑制物、激素-受体、糖类-外源凝集素或核酸的互补链之间的结合),将其中配对结合的任何一方固定在硬质的支持物(如硅酸微粒、合成的多聚物等
Lipid-analysis-Week-3:-GAS-LIQUID-CHROMATOGRAPHY2
B: GLC procedure The GLC will be prepared for your use. Please do not attempt to turn on the GLC on your own if it is off. Do not change any of the
NLISIS-Chromatography获得Pittcon-2008撰稿人银奖
2008年3月6日,NLISIS Chromatography和Bruker公司均获得不同寻常的Pittcon 2008撰稿人大奖,说它是不同寻常的,是因为这是NLISIS Chromatography创建两年来第一次参加盛会。他们的突破性毛细柱连接器产品——NLISIS Meltfit One,被
离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(3)
其次是对离子交换剂基质的选择。前面已经介绍了,聚苯乙烯离子交换剂等疏水性较强的离子交换剂一般常用于分离小分子物质,如无机离子、氨基酸、核苷酸等。而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换剂亲水性较强,适合于分离蛋白质等大分子物质。一般纤维素离子交换剂价格较低,但分辨率和稳定性都较低,适于初步分离和大量制备。
离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(1)
简介离子交换层析(Ion Exchange Chromatography 简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 1848年,Thompson 等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换
离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(2)
(2)离子交换剂的电荷基团根据与基质共价结合的电荷基团的性质,可以将离子交换剂分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。阳离子交换剂的电荷基团带负电,可以交换阳离子物质。根据电荷基团的解离度不同,又可以分为强酸型、中等酸型和弱酸型三类。它们的区别在于它们电荷基团完全解离的pH 范围,强酸型离子交换剂在较大