DNAMarker产品选择指南

1.Marker选择标准 (1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。 (2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2.常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;3. 电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm,温度应低于30℃;4. marker上样量过多。请根据说明书选用合适上样量;5. 凝胶质量不好。建议使用质量较好的琼脂糖;此外,凝胶凝固......阅读全文

卫星DNA的定义

卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在

DNA错插的定义

中文名称错插英文名称misinsertion定  义特指DNA复制过程中插入错误的、不与模板匹配的碱基。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)

DNA测序仪原理

abi prism 310型基因分析仪(即dna测序仪),采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,生成的pcr产物则是相差1个碱基的3''''末端为4种不同荧光染料的单

卫星DNA的分类

卫星DNA按其浮力密度的大小可以分成I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四类,其浮力密度分别是1.687,1.693,1.697和1.700g/cm3。各类卫星DNA都是由各种不同的重复序列家族所组成。卫星DNA通常是串联重复序列。卫星DNA按其重复单元的核苷酸的多少,可以分为两类。一类是小卫星DNA(minisatel

DNA技术的概念

  DNA(Deoxyribonucleic acid),中文译名为脱氧核糖核酸,是染色体的主要化学成分,同时也是基因组成的,有时被称为“遗传微粒”。DNA是一种分子,可组成遗传指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令,是建构细胞内其

DNA杂交的基础

  具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,通过超声或者其他物理方法,将DNA剪切成片段,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链

DNA-序列分析技术

            实验方法原理 本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDeoy TM Terminator

DNA-Fragmentation-Assays-for-Apoptosis

Protocol I: Triton X-100 Lysis BufferIn 96 flat-wells plate, incubate 4x10 6 target cells (40 wells of 105 per well) with desired concentration of eff

Organelle-DNA-Library-Construction

Organelle DNA Library Construction(version MAY-1998)I. NEBULIZATION of DNA      1. 0.5 - 5 ug DNA in TE (10mM/1mM), 25% glycerol, final volume 500 ul

间隔DNA的定义

中文名称间隔DNA英文名称spacer DNA定  义基因组内基因间存在的一种功能未知的非编码DNA序列。存在于真核细胞及某些病毒基因组中,通常含有高度重复的DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

核心DNA的定义

中文名称核心DNA英文名称core DNA定  义缠绕在核小体核心颗粒上的DNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

什么是自在DNA?

中文名称自在DNA英文名称selfish DNA定  义除能复制自身外,不具有其他功能的DNA片段。泛指间隔DNA及卫星DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

Dephosphorylation-of-DNA

De-phosphorylation of DNAThe preferred method of de-phosphorylation uses the buffer system described by Pharmacia for most of their restriction endonu

外周血DNA提取技术

方法一:1. 标本预处理:将1ml EDTA抗凝贮冻血液于室温解冻后移入5ml离心管中,加入1ml磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀,3500g离心15min,倾去含裂解红细胞上清。重复一次。用0.7ml DNA提取液混悬白细胞沉淀,37℃水浴温育1h。2. 消化:上述DNA提取液混悬白细胞,37℃水浴

Preparation-of-Sonicated-Human-DNA

Purpose:To break up high molecular weight human placental DNA into fragment sizes of 500 bp or less which can be used as competitor DNA in Southern an

DNA测序的原理

  化学修饰法测序原理  化学试剂处理末段DNA片段,造成碱基的特异性切割,产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳分离。化学切割反应:包括碱基的修饰,修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。  Sanger法测序的原理  就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定

什么是DNA重排?

DNA重排(DNA rearrangement)这种调节主要是根据DNA片段在基因组中位置的变化,即从一个位置变换到另一个位置,从而改变基因的活性。最熟知的两个例子是酵母交配型的控制和抗体基因的重排。

动物DNA提取实验

实验方法原理 在浓氯化钠(1-2 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得的

无用DNA的定义

中文名称无用DNA英文名称junk DNA定  义基因组中不表达的因而功能不明的DNA。但已有证据表明这些无用DNA是有其各种不同功能的。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

DNA发卡结构介绍

发卡结构(hairpin structure):这些结构是由于DNA单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇,形成氢键结合而成的,称为发卡结构。又译:发夹结构。

质体DNA的定义

中文名称质体DNA英文名称plastid DNA定  义真核生物细胞器质体中存在的DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

什么是“DNA探针”?

DNA探针(DNA probe)是最常用的核酸探针,为长度在几十到几百甚至上千碱基对的单链或双链DNA,用特殊示踪剂(如同位素、酶或有色基团)进行标记;在适当的pH值、温度和离子强度下,DNA探针利用分子的变性、复性以及碱基互补配对的高度精确性,能与待测样本中互补的非标记单链DNA或RNA以氢键结合

CT扫描损伤DNA?

  CT扫描,即电子计算机断层扫描,通过横断面X射线对多种疾病进行诊断,包括胸痛、骨折和消化系统问题等等。  《美国心脏病学会杂志》一篇学术论文报道:CT扫描存在副作用——损伤DNA!  斯坦福大学的研究人员以67例需要接受CT扫描的病患作为试验对象:患者接受全身且最低辐射量扫描后,研究人员检测她们

75%DNA是垃圾

  你距离“上帝的完美作品”还很远。近日,一项新研究显示,人体内75%的DNA是“垃圾”。  数十年来,生物学家一直认为人类大多数基因都有某些作用。但该研究却驳斥了这一观点,指出人类大部分DNA毫无用处。实际上,早在2012年该研究组就猜测人类基因大多无用。  早在上世纪50年代,研究人员发现了DN

痘苗DNA检测实验

实验方法原理 实验材料 贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒 PBS胰酶/EDTA干冰/乙醇DNA 提取缓冲液乙酸钠乙醇PCR 扩增缓冲液引物完全 MEM-10、MEM-2.5 和 MEM-5 培养基完全 MEM-10/BrdU 培养基筛选试剂4

端粒DNA主要组成

端粒DNA是由简单的DNA高度重复序列组成的,染色体末端沿着5'到3' 方向的链富含 GT。在酵母和人体中,端粒序列分别为C1-3A/TG1-3和TTAGGG/CCCTAA,并有许多蛋白与端粒DNA结合。端粒DNA主要功能有:第一,保护染色体不被核酸酶降解;第二,防止染色体相互融合;

细菌DNA=未来光盘?

  英国《自然》杂志11日发表了一项生物技术重要成果:科学家利用CRISPR手段,成功将图片和视频短片编码进了细菌的DNA中,通过测序DNA再重新提取出来后仍相当准确。其证明了活细胞作为一种可靠媒介,存储一定数量的数据完全有可能。   CRISPR被称为“生物科学领域的游戏规则改变者”。最近的一些研

DNA裂解分析实验

琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析             实验材料 细胞

Restriction-Enzyme-Digestion-of-DNA

Materials:10X restriction enzyme buffer (see manufacturer's recommendation)DNAsterile waterrestriction enzymephenol:chloroform (1:1)Add the follow

受损DNA修复“关键”

德雷塞尔大学和佐治亚理工学院的研究人员发现,Rad52蛋白质是DNA修复的关键所在。最新的研究发表结果发表于《分子细胞》杂志中,在报道中,研究人员解释了Rad52蛋白质同源重组的重要功能,这一发现有助于确定治疗癌症的新目标目标。放疗和化疗可引起DNA双链断裂,其中最大的损害就是DNA的损伤,同源重组