PCR需要注意的一些问题

扩增长目的片段当扩增大于5kb的目的片段时,可以使用用于超长PCR的酶或酶混合物以获得最佳产量(图24)。Taq DNA聚合酶并不能有效扩增较长目的片段(大于5kb),可能是因为其缺少3'-5'外切核酸酶活性,不能纠正dNTP错误掺入。错误配对的延伸几率大大降低,减少了较长产物的产量。将Taq DNA聚合酶同带有3'-5'外切核酸酶活性的热稳定DNA聚合酶混合,可以扩增最高为30kb的目的片段。Platunum Pfx DNA聚合酶(带有3'-5'外切核酸酶活性)也可以扩增较长产物(≤12kb)。除了选用正确的热稳定DNA聚合酶,较长产物的扩增还需要改变标准步骤的延伸时间、变性时间、缓冲液pH。按1分钟/kb增加延伸时间使聚合酶完成合成。一般对于有效的超长PCR,延伸温度会低至68℃。因为延伸时间较长,对于20kb的模板高达20分钟,所有使用较高起始pH的缓冲液。如果pH将至低于p......阅读全文

PCR仪的实验操作注意事项

  1.戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;  2.使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;  3.避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面; 

PCR仪的保养与注意事项

PCR仪器不是一种计量仪器,其主要作用原理与基本计量要素密切相关,要求较高,一旦失控,仪器将不能正常工作,所以PCR仪器也需要定期检测和维护,这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。PCR扩增仪的保养和注意事项。 下面介绍一些具体的保养维护方法:1.样品池的清洗先打开盖子,然后用95%乙醇或10%清

RTPCR技术的注意事项

1、合成cDNA的引物:合成cDNA引物时,通常采用随机六核苷酸引物能够有效地指导从RNA有效地合成第一链cDNA:2、避免RNA酶的污染:在合成cDNA第一链时,应使用RNA酶抑制剂,进行RT-PCR时,用于合成cDNA第一链的RNA不会对PCR有影响,因此没有必要用碱或RNA酶处理;3、不同来源

这些事情需要注意!无菌操作注意事项

操 作 进行培养时,动作要准确敏捷,但又不必太快,以防空气流动,增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿,如已接触,要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便,工作台面上的用品要有合理的布局,原则上应是右手使用的东西放置在右侧,左手用品在左侧,酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性,组织或细胞在未做

烘培过后需要注意什么呢

 数显不锈钢电热板广泛用于样品的烘焙、干燥和作其他温度试验,是生物、遗传、医药卫生、环保、生化实验室、分析室、教学研究的必备的工具。   那么在烘培之后我们需要注意的是:   1.将不锈钢电热板工作面擦拭干净,上面不要有水滴,污物等。   2.放置装样试瓶或其他器皿。   3.接通电源,合上电源开关

电泳设备时需要注意什么

   电泳依赖于在电场中移动的基本过程-粒子。已知200多年,这种现象仍然驱动许多实验室的基本技术,其悠久的历史在该技术的广泛使用中发挥作用。当前的兴趣在于使得该技术更快,更准确,更灵敏。购买电泳设备和用品时您应该问的前9个问题每个实验可以在单个电泳槽中同时运行多少个凝胶?你可以用同样的电泳设备运行

做核酸检测需要注意什么

在核酸检测时要注意以下六个事项:一是在核酸检测前两小时,请勿进食,为避免影响检测结果,采样前30分钟请勿吸烟,喝酒和嚼口香糖。二是为降低交叉感染风险,所有检测者需配戴口罩并备一个用,在采样结束后进行替换。三是在采集鼻咽拭子前检测者应告知采集人员是否存在鼻中隔弯曲或有鼻腔手术史,过程中可能出现鼻部酸痒

烘箱使用时需要注意什么?

   烘箱使用时需要注意什么?   1.烘箱应放置在洁净的室内水平处,工业烘箱保持干燥,防潮防湿,并防止腐蚀。    2.烤箱放置要有一定的空间,四面距离墙壁要有一定的距离,建议有1米以上。    3.检查使用前电压,小的烘箱中所需的电压为220V,较大的烘箱所需的电压为380V(三相五线),根据烘

使用肿节风片需要注意什么?

  孕妇及过敏体质者慎用。这是因为肿节风片可能对孕妇或过敏体质者产生不良影响。  用药期间忌食酸、辣、萝卜等食物,以免影响药效。  肿节风片在药品性状发生改变时禁止使用,如发现药品颜色、形状等有异常,应停止使用。  将药品放在儿童不能接触的地方,防止儿童误食。  由于肿节风片是中药制剂,建议在医生指

质谱仪操作需要注意哪些问题

首先了解你的仪器的工作原理,知道它可以做哪些样品分析,熟读SOP,对于仪器的操作和日常维护熟记于心。上面两点你能做到,其实已经不错了。重要的一点,质谱仪是精密仪器,灵敏度高,使用不当会污染离子源,作分析时一定要先确定样品是否可以进该质谱仪。

使用抑肽酶需要注意什么?

  过敏体质者应慎用,如果出现过敏反应,应立即停用并处理。  推荐在使用抑肽酶的同时,静脉给予H2-拮抗剂(抗组胺剂)。  避免与β-内酰胺类抗生素合用。  在手术中使用时,应在手术开始前静脉滴注,以达到有效抑制纤溶的效果。  为预防术后肠粘连,建议手术结束后立即在腹腔内注入适量的抑肽酶。  对于急

脑卒中患者康复需要注意什么?

  早期康复:脑卒中后,患者应尽早开始康复训练,以减少并发症的发生,提高康复效果。  个体化康复:每个患者的病情和身体状况都不同,因此康复计划应根据患者的具体情况制定。  持续康复:脑卒中患者的康复是一个长期过程,需要持续进行。家庭成员和医护人员应共同努力,帮助患者坚持康复训练。  心理康复:脑卒中

门诊检验需要注意哪些事项?

    门诊检验作为疾病诊疗的重要环节,长期以来备受医生和患者关注。近年来,随着检验医学的快速发展和检验方法的不断改进,检测项目和检测结果的针对性与可靠性大大增强,从而极大地丰富和满足了临床诊断与治疗评估对检验的需要,检验医学在临床的作用也日益突出。由于检验人员的素质不断提高,检验方法日益完善,

熔点仪需要注意哪些事项

熔点仪运用光电检测、数字温度显示等技术,具有初熔、终熔自动显示等功能。温度系统应用了线性校正的铂金电阻作为检测元件,让实验过程与结果更为、准确。可广泛应用于化学工业、医药研究中,是生产药物、香料、染料及测量其他有机晶体物质的必备仪器。熔点仪的注意事项:1.样品必须按要求烘干,在干燥和洁净的研钵中碾碎

买地磅需要注意哪些问题?

购买地磅注意事项有哪些:    1.重要的就是传感器和仪表。购买知名品牌的比较保险,比如上海耀华的表头性价比比较高,柯力的也可以。像顶松、碧彩世面上用的比较少。传感器一般使用桥式感应器,厂家为博达、柯力、广测、中航这四家,生活从那技术纯熟,销售价格也比较实惠。    2.选择电子地磅生产厂家。   

打干细胞需要注意什么

1、打完了干细胞一定要注意多休息,不要剧烈的运动,最好选择卧床休息一天;2、要注意加强面部的护理,24小时之内尿布先不要碰水,避免注射的位置出现感染的情况;3、三天之内要注意清淡饮食,不要吃刺激性较强的食物,可以多吃一些新鲜的水果蔬菜,晚上睡觉要保证充足的睡眠,不要熬夜。

液氮罐储存需要注意什么

  液氮罐是为储存液氮而设计的,液氮是超低温,如果我们把装有液氮的液氮罐存放在密闭空间的话,很可能会因为液氮挥发,造成空气缺氧,导致窒息。  液氮罐储存地点要求如下:  1、液氮罐要存放在阴凉通风良好的地方,禁止在阳光下直晒。在使用或存放时,禁止倾斜、横放、倒置、堆压、相互撞击或与其他物件碰撞,要做

革兰氏染色需要注意哪些问题

1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响,难以严格规定。 2、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后,应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释而影响染色效果。

湿疹患者需要注意什么饮食?

  避免食用过敏原:湿疹患者应该避免食用可能引起过敏的食物,如海鲜、花生、牛奶、鸡蛋等。如果您不确定自己是否对某种食物过敏,可以进行皮肤试验或血液检查。  增加抗氧化剂的摄入:抗氧化剂可以帮助减少自由基的损伤,促进皮肤健康。湿疹患者可以多食用富含维生素C、维生素E、β-胡萝卜素等抗氧化剂的食物,如柑

pcr为何需要循环三次?解析pcr技术循环三次示意图

  PCR技术中为什么3次循环才能得到目的基因?  1、第一个循环扩增出来的新片段很长很长。  2、第二个循环以新的长片段为模板进行,但新片段的一端是引物开头的,所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度,但只是一条链,所以还不能分离出目的基因。  3、第三个循环,当以第二个循环得到的新片段为模板时

电子天平中常见的一些问题

电子天平中常见的一些问题:    1、开启问题_天平开启后完全无显示:(1)电源插座上没有220V电流接通交流电座;(2)交流适配器犯错(3)交流适配器烧毁,需更换交流适配器;    2、开启问题_天平开启后完全无显示(1)校准数据丢失,重新校准天平;(2)瞬时干扰影响;    3、开启问题_天平开

使用比色计应该的一些问题

      由于人对颜色的辨别能力会由于注视时间的延长而造成眼睛劳,这种情况也与观测者的年龄、视力、辨色力等有密切的关系,但是油脂比色计的原理是依靠肉眼测定的,所以在测定的时候,要特别注意保护眼睛的辨色能力,防治由于辨色能力的减弱而造成误差。一般来说,操作过程中,可以试样外观色泽大致拨动某个数值,

培养细胞时需要注意的事项(一)

培养细胞时需要注意的事项细胞培养在生命科研的地位举足轻重。实验君的很多成果可谓是成也细胞培养,败也细胞培养。然而细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋!科研人是不会这么被轻易打败的。各大平台上讨论细胞培养的帖子不胜枚举,百家争辨。本文收集整理了相关书籍以及行业平台关于细胞培养的注意事项,希望对大家有所帮助。

选购荧光仪需要注意的要素(四)

  诱导曲线,Induction Curve,慢速荧光诱导动力学(Slow Kinetics)的一种。测量诱导曲线可以获得淬灭分析(Quenching Analysis)的参数,光化学淬灭(qP), 非光化学淬灭(NPQ)。实际应用中,诱导曲线后可以增加暗弛豫的测量,进一步分析植物非光化学淬灭的能力

选购荧光仪需要注意的要素(二)

  荧光仪光源,在荧光参数测量前对荧光仪光源有明确的认识是非常有必要的。以调制式的叶绿素荧光仪为例,通常会配置四种光,测量光ML,光化光AL,饱和脉冲光SP,远红光FR。测量光,光强比较弱(<1μmolm-2s-1),具有调制频率,用于信号检测,测量前需要调整测量光强度(Int.)和频率(Freq.

培养细胞时需要注意的事项(二)

15.血清灭活是否必须?这个问题现在有争议。有人主张价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟的热处理会对血清中的生长因子,氨基酸等成分带来的负面影响。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,尤其是在昆虫细胞和胚胎干细胞培

购买洗板机有哪些需要注意的

洗板机在我们的实验操作中应用广泛,那么在购买洗板机的时候,我们要注意些什么呢?    1洗板性能首先是大家zui看重的!一款好的洗板机,必须有效地移除微孔板中的液体。残留的液体可能导致分析的背景信号偏高,或产生假阳性或假阴性的结果,因此洗板机的残液量必须极低。通过调整分液和吸液的高度以及吸液速度,可

使用凝胶成像系统需要注意的事项

凝胶成像系统是目前一些科研领域经常使用到的一种设备,它在使用的过程当中,需要结合自己实验的一些特征来选择相应的凝胶成像系统。不同的凝胶成像系统他的防护级别不同,所以能够使用的实验也不相同,就要求我们的实验者在选择过程当中,需要根据自身的实际情况来进行挑选。这样才能确保我们的实验过程更加的合理和完整,

选购荧光仪需要注意的要素(三)

  Fv/Fm, (Fm-Fo)/Fm,最大光能转换效率,反应植物潜在的最大光合能力。通过测量暗适应之后的最小荧光Fo和最大荧光Fm计算而来。该参数相对独立,可以单独使用,来评估胁迫条件下植物的光合特性变化或用来筛选突变体。大多数荧光仪都可以测。  ΦPSII,(Fm’-F)/Fm’, 实际光能转换

KRACHT齿轮泵需要注意的地方

KRACHT齿轮泵需要注意的地方:工作压力Pb-允许的持续压力**允许的负载仅适用于带前置轴承的泵。Fradial位于轴端中心。某些操作条件下,不应采用最大或最小值。例如,在低速和低粘度条件下不能达到最大工作压力。