PCR假阴性的原因分析

PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了,同时由于造成假阳性的因素相对单一,因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话,那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性,仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重,并且用些因素经常被人忽略,严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目,有什么样的诊断价值。 造成PCR假阴性的原因是复杂的,也是多样的。主要有: 1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题(如:温控不准等)给临床带来了诸如非特异性扩增(假阳性)、扩增效率下降(假阴性)等问题。(具体另外讲述) 2.离心机问题。离心机的质量或使用不正确,造成离心标本模板没有分离出来造成假阴性,窃以为这是最易被忽视的问题。其时离心机使用问题不仅在PCR,在整个检验工作中都是最易被忽视的问题,只是因为在其他工作中不象PCR那样明......阅读全文

ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果

假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生

无创产前诊断的假阳性和假阴性

  尽管无创产前诊断能够让医生和患者在孕期评估胎儿非整倍体的风险,但在最近召开的美国医学遗传学和基因组学学院(ACMG)年会上,专家们提醒,有时筛查会得到假阳性或假阴性的结果。   目前,美国有四家公司提供无创产前筛查,它们分别是Ariosa Diagnostics、Natera、Sequenom

核酸检测的“假阳性”与“假阴性”指的是什么

一、概念理解。当你真的没有的时候,别人却说你有——假阳性(false positive)当你真的有的时候,别人却说你没有——假阴性(false negative)下面表格列出了四种情况,另外两张判断正确的情况分别是:你真的有,别人也说你有——真阳性(true positive)你真的没有,别人也说你

核酸检测的假阴性和假阳性是什么意思?

假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔

如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?

  【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假   ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因

如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?

【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因素也会对结果

什么是PCR阴性?

举乙肝的例子来说:通过酶免的方法查乙肝两对半和通过荧光定量PCR的方法学查乙肝DNA小明得了肝炎,但他不知道自己得了肝炎,有一天身体不舒服或者正常体检(比如入职体检),他去看医生,临床医生怀疑他得了肝炎(肝炎有很多种比如病毒性肝炎,也就是病毒倾入他体内后由于人体的三道防线没能把病毒消灭掉,导致病毒在

导致尿HCG假阳性的原因分析

HCG检测应以血β-HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响,比如其他的一些激素,比如LH激素有时就可与试纸反应,导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋养层细

导致尿HCG假阳性的原因分析

HCG检测应以血β-HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响,比如其他的一些激素,比如LH激素有时就可与试纸反应,导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋

导致尿HCG假阳性的原因分析

应以血HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响,比如其他的一些激素,比如LH激素有时就可与试纸反应,导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血B-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具

尿妊娠试验假阳性原因分析

绒毛膜促性腺激素(hCG)是由胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的糖蛋白激素,由α和β两个亚基组成。    其中α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的α亚基相似,β亚基则是特异的,因此一般用β-hCG 抗体来测定标本中的β-hCG。    尿妊

新型冠状病毒病原学检测假阴性的产生原因及高效检测...

新型冠状病毒病原学检测假阴性的产生原因及高效检测方法分析自2020年开始,新型冠状病毒肺炎的疫情就一直牵动着亿万人的心。截至2月11日8:29,全国已确诊病例累计42708例,疑似21675例,疫情防控形势依然严峻。 新型冠状病毒传播方式多样,除了经呼吸道飞沫和接触传播的主要途径外,目前已有报道病毒

研究发现PCR无法识别奥密克戎一变种亚型,可致“假阴性”

  近日,研究人员表示,新冠病毒变异毒株奥密克戎(Omicron)的一种变种亚型无法通过PCR的病毒识别测试,因此这种亚型病毒或更难被追踪,但目前尚不清楚其来源、传播速度和形式。  据《卫报》12月7日报道,研究人员表示,这种变种亚型病毒与普通的奥密克戎病毒有许多相同的突变,但由于其缺乏一种特殊的基

探讨两种方法检测HBsAg假阳性和假阴性的影响因素

目前HBsAg的检测方法很多,但是在临床实验室检测HBsAg的方法最常用的主要是金标法和酶联免疫吸附试验(ELISA)。常常会有患者及其他工作人员反映HBsAg检验结果与其他医疗单位不一致,为此常会发生医疗纠纷。因此,提高HBsAg检测的准确性,避免假阳性和假阴性所造成的不良社会影响,是我们临床检验

化学发光假阳性本底产生的原因分析

近期收到有小伙伴提问,关于如何解决发光试剂盒研发过程中的本底偏高和假阳性问题。解决问题最重要的是了解问题产生的原因,本微信平台分类汇总了化学发光试剂产生假阳性本底的原因,由于问题本身并没有很具体的描述,因此本文也只广泛的汇总,不包含具体的项目或者方法学方面的内容。希望对大家的工作有所帮助。抗原/抗体

关于假膜性肠炎的致病原因分析

  假膜性肠炎是由两种菌群产生毒素致病。  1.难辨梭状芽胞杆菌  难辨梭状芽胞杆菌是与抗生素相关的假膜性肠炎的重要发病原因,1935年由Hall等首先从婴儿的粪便中分离出来的细长的严格厌氧的革兰阳性杆菌。这种细菌是体内常驻细菌存在于正常人的肠道中。在未接受抗生素治疗的患者中,难辨性梭状芽胞杆菌数量

化学发光假阳性本底产生的原因分析

 近期收到有小伙伴提问,关于如何解决发光试剂盒研发过程中的本底偏高和假阳性问题。解决问题最重要的是了解问题产生的原因,本微信平台分类汇总了化学发光试剂产生假阳性本底的原因,由于问题本身并没有很具体的描述,因此本文也只广泛的汇总,不包含具体的项目或者方法学方面的内容。希望对大家的工作有所帮助。   

荧光定量pcr阴性对照的定义

NC的作用在于消除试剂污染的因素~如果NC(无模板)也有扩增曲线那么说明试剂污染较为严重~所谓的阴性就是一定实验后是没有结果的~

PCR反应的阴性相关问题

  需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。  引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单位。②引物的浓度不仅要看OD值,更要

分析血清阴性脊柱关节病的发病原因

  脊柱关节炎包括的所有疾病中B27抗原均显著增高。研究证实强直性脊柱炎和反应性关节炎有着相似的B27抗原频率。炎症性肠病性关节炎的外周关节炎为肠外受累的证据,但其B27抗原表达并不增高。然而,发生脊柱炎的炎症性肠病性关节炎患者却75%与B27抗原有关。这些发现提示炎症性肠病性关节炎关节病的发病机制

组织切片机所有切片呈阴性的原因分析

原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性;b.染色未完全按照操作步骤进行;c.漏加一种抗体或抗体失活;d.复染或脱水剂使用不当;e.底物中加入的过氧化氢少或失活。解决措施:设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达,说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性,便是真实的阴性,说明

什么是PCR假阳性?

假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔,防止

酶免法检测HBeAg假阳性原因分析

我们在应用酶免法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时,发现有时会出现单项HBeAg(+)或HBeAg(+)、抗-HBs(+)等罕见模式。为慎重起见再将标本离心后复检 HBeAg, 结果为阴性。为此我们特做如下实验。取10份 HBeAg 阴性的献血员的不抗凝血液,每份分两管,一管静置0.5h、1h、2h;另

血培养检测:-MRSA结果或可呈假阴性

     近日,美国食品与药品管理局(FDA)与Cepheid公司联合发布1级召回公告,宣布召回该公司在2008年10月21日~2010年6月21日期间生产和配发的用于GeneXpert Dx系统的Xpert耐甲氧西林金黄色葡萄球菌/金黄色葡萄球菌(MRSA/SA)血培养检测试剂盒。  本次召回产品

关于弹性假黄瘤病的发病原因分析

  该病属于全身弹力纤维障碍,病因迄今不明。多数人认为与先天性因素有关。有以下几方面看法:  家族遗传学说:根据该病多有家族史这一事实,因而认为该病与遗传有关。  内分泌障碍:甲状腺或胸腺肥大、卵巢功能障碍,可以引起该病,因而推论该病可能与内分泌障碍有关。  代谢障碍:有人对该病进行皮肤组织学检查发

尿液分析仪检测出现假阳性的原因

 假阳性。即尿液分析仪潜血反应阳性,镜检阴性,其常见原因有:  (1)血红蛋白(Hb) 尿液分析仪潜血反应既能与完整的RBC发生阳性反应,也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应,而显微镜只能检出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量极微,定性为阴性。疾病时,尿中Hb有两个来源:一是发生血管内溶血,血

新冠病毒核酸检测结果假阴性的再思考

近期专家及民众对2019-新型冠状病毒核酸阳性检出率低、咽拭子屡次阴性、核酸检测与临床诊断不吻合等问题提出各种观点或疑惑。回顾近三年我们对呼吸道感染患儿不同取材部位多种呼吸道病原体检出率的研究,供大家参考,希望对2019-新型冠状病毒核酸检测有所指导,对临床医生选择采样位置以及解读结果有所启示,对民

高灵数字PCR检测法+检测试剂盒=避免新冠肺炎假阴性问题

  中国计量科学研究院(以下简称“中国计量院”)前沿中心生命科学计量团队成功研发了针对新型冠状病毒的新型检测方法和对应试剂盒——高灵敏数字PCR检测法和检测试剂盒。该方法较现行通用的RT-PCR法灵敏度显著提升,已进行验证测试,并将同步有序开展推广应用。  该方法和试剂盒主要基于数字PCR系统完成相

外斐氏试验阴性的原因

  人体被立克次体感染后,血清中逐渐产生相应抗体,该抗体在发病后5~12天出现,至数月后基本消失,一般凝集价在1:160以上或病程中效价明显上升有诊断意义。我国常见的立克次体病上要为斑疹伤寒和恙虫病,流行性斑疹伤寒主要为OX19凝集价升高,恙虫病主要表现为OXK升高明显。  流行性斑疹伤寒(OX19

石蜡切片阴性染色产生的原因

⑴一抗和二抗浓度不合适或孵育条件不妥。⑵荧光素提前衰退。荧光素质量不佳或操作过程中没有注意避光等防止荧光素衰退的事项。⑶血清封闭时间过长。⑷抗体稀释液PH值不合适,影响抗原抗体反应。⑸组织切片不平、裂片或脱片很严重,易引起大块阴性着色。⑹组织标本不新鲜或已经冷冻组织制成的切片中抗原易弥散,易引起本来