胰酶分离提取

一、原理与目的提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活。因此提取制备胰酶的全部操作过程应在低温和低PH下进行。胰酶以无活性的酶原形式存在于动物的胰脏中。胰蛋白酶原在正常生理条件下可被肠激酶和钙离子所激活或自我环化成为有活性的酶。猪胰蛋白酶原分子量约24000-25000,而猪胰酶分子量为23400。在酶原活化的过程中,酶原N端Lys与Ile之间的 一个肽链被断裂,丢失一个6肽,分子构象发生改变,PI变成10.8。本实验拟通过从猪胰脏中制备胰酶结晶实验,掌握酶的制备、一般分离、提取、纯化和结晶的操作技术。同时为亲和层析、免疫学实验准备实验样品。二、材料与试剂1.仪器紫外光分光光度计、恒温水......阅读全文

胰激肽原酶肠溶片

性状本品为肠溶衣片,除去包衣后显白色或类白色。鉴别在纯度项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致检查纯度照高效液相色谱法(通则0512)测定磷酸盐缓冲液(pH7.0)见胰激肽原酶纯度项下。辅料溶液取淀粉1.3g、糊精0.36g与微晶纤维素0.52g,置离心管中,加

胰酶的鉴别方法

脂肪取本品1.0g,置具塞锥形瓶中,加乙醚10ml,密塞,时时旋动,放置约2小时后,将乙醚液倾泻至用乙醚湿润的滤纸上,滤过,残渣用乙醚10m1照上法处理,再用乙醚5ml洗涤残渣,合并滤液及洗液至已恒重的蒸发皿中,使乙醚自然挥散后,在105℃干燥2小时,精密称定,遗留脂肪不得过20mg干燥失重取本品,

胰酶使用注意事项

胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据

胰激肽原酶的检查方法

酸碱度取本品适量,加水溶解并稀释制成每lml中含300单位的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为溶液的澄清度取本品适量,加水溶解并稀释制成每lml中含2mg的溶液,依法检查(通则0902第一法),溶液应澄清。(供注射用)脂肪取本品1.0g,置具塞锥形瓶中,加乙醚20ml,密塞,时时旋动,放置约

细胞消化胰酶的配制

适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100ml PBS,0.25g胰酶步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl

胰酶的基本性状

本品为类白色至微黄色的粉末;微臭,但无霉败的臭气;有引湿性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。

生化检测项目胰酶泌素胰泌素试验介绍

胰酶泌素-胰泌素试验介绍:  胰腺外分泌功能测定分为直接试验和间接试验。直接试验是通过插管到十二指肠后直接收集胰液,或用某些胃肠激素直接刺激胰腺分泌,了解其外分泌状态。其敏感性和特异性都比较好,但因插管给病人造成一定痛苦,故不易在临床推广应用。间接试验有多种方法,无须插管而测定胰酶分解产物,或用核素

碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定

一、实验原理       碱性磷酸酶(alkaline phosphatase   EC 3.1.3.1简称为ALPase)广泛存于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应,磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸

碱性磷酸酶的分离提取及比活力的测定

、实验原理       碱性磷酸酶(alkaline phosphatase   EC 3.1.3.1简称为ALPase)广泛存于微生物界和动物界。ALPase能催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖。它也可以催化磷酸基团的转移反应,磷酸基团从磷酸酯转移到醇、酚或糖等磷酸受

胰酶的性状及检查方法

性状本品为类白色至微黄色的粉末;微臭,但无霉败的臭气;有引湿性;水溶液煮沸或遇酸即失去酶活力。检查脂肪取本品1.0g,置具塞锥形瓶中,加乙醚10ml,密塞,时时旋动,放置约2小时后,将乙醚液倾泻至用乙醚湿润的滤纸上,滤过,残渣用乙醚10m1照上法处理,再用乙醚5ml洗涤残渣,合并滤液及洗液至已恒重的

关于促胰酶素的简介

  促胰酶素,也称胆囊收缩素(CCK)在空腹时胰液不分泌。进食才引起胰液分泌,胰液分泌受神经和激素的调节。  ①神经调节。食物的色、香、味、形态和容积等刺激机体感受器,可反射性地引起胰液分泌。支配胰腺的神经为迷走神经和内脏神经;  ②激素调节。刺激胰液分泌的主要胃肠激素有促胰液素和促胰酶素。促胰酶素

胰激肽原酶的鉴别方法

(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。精密量取4ml,置10ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度。测定法取效价测定酶活力项下的底物溶液2.9ml

胰酶的类别及贮藏方法

类别助消化药。贮藏遮光,密封,在阴凉干燥处保存。制剂(1)胰酶肠溶片(2)胰酶肠溶胶囊

胰激肽原酶的基本性状

本品为白色或类白色粉末;无臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中几乎不溶。

关于胰淀粉酶的应用

  了解血清胰淀粉酶在急性胰腺炎及其相关疾病中的变化规律,确定血清胰淀粉酶在急性胰腺炎诊断中的作用。方法:经临床与影像学诊断的急性胰腺炎组60例;非急性胰腺炎组45例,包括急性胆囊炎30例,急性腮腺炎2例,胰腺癌5例,急性肠梗阻3例,慢性胰腺炎5例。分别于发病第2天行血清胰淀粉酶和血清总淀粉酶测定。

胰激肽原酶的鉴别检查方法

鉴别(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。精密量取4ml,置10ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度。测定法取效价测定酶活力项下的底物溶液2.9

使用胰激肽原酶的情况介绍

  一、胰激肽原酶的用法用量:  成人常规剂量:  1、口服给药:肠溶片:一次120~240U,一日360~720U,空腹服用。  2、皮下注射:一次10~20U,一日l~2次,3周为一疗程。  3、肌内注射:一日10~40U,一日1次或隔日1次。临用前,加灭菌注射用水1.5ml溶解。  4、结膜下

单萜的-提取分离方法

环烯醚萜苷的提取,一般采用溶剂法,提取时常在植物材料中拌入碳酸钙或氢氧化钡以抑制酶的活性和中和植物酸,常用水、甲醇、乙醇、稀丙酮溶液、正丁醇、乙酸乙酯等作为提取溶剂。可采用冷渗液法和热回流提取法。在同一植物中,往往含有多种结构相似的环烯醚萜苷,欲进一步分离单一成分,可采用硅胶、氧化铝等制备性薄层或柱

卵清蛋白分离提取

一、实验目的与原理鸡卵粘蛋白存在于鸡蛋清中,对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,高纯度的鸡卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比为1:1。鸡卵粘蛋白在中性或酸性溶液中对热和高浓度的脲都是相当稳定的,而在碱性溶液中较不稳定。由于鸡卵粘蛋白对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,因此可以用鸡卵粘蛋白做亲和配基配制纯化胰酶的亲

酵母RNA提取与分离

一、目的:学习稀碱法提RNA的原理与技术。二、原理:由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也各异,一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验室最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中,向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析

核酸分离提取的原则

核酸分离提取的原则核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的

核酸分离提取的原则

核酸分离提取的原则核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的

临床化学检查方法介绍胰酶泌素胰泌素试验介绍

胰酶泌素-胰泌素试验介绍:  胰腺外分泌功能测定分为直接试验和间接试验。直接试验是通过插管到十二指肠后直接收集胰液,或用某些胃肠激素直接刺激胰腺分泌,了解其外分泌状态。其敏感性和特异性都比较好,但因插管给病人造成一定痛苦,故不易在临床推广应用。间接试验有多种方法,无须插管而测定胰酶分解产物,或用核素

胆酶分离

基本概述什么是“胆酶分离”?具体的说,“胆酶分离”通常是指在肝炎发展过程中,由于肝细胞的大量坏死,对胆红素的处理能力进行性下降,因此出现上升;同时转胺酶由于已经维持相当长时间的高水平,从而进行性耗竭,因此出现ALT下降,转氨酶不高。这种转氨酶现象就是所谓的“胆酶分离”。转氨酶的高低变化对于肝炎病人来

关于胰酶的注意事项介绍

  1.孕妇及哺乳期妇女慎用。  2.本品口服常用肠溶制剂,以避免被酸灭活,但肠衣可能会影响胰酶在十二指肠和空肠上段的生物利用度。  3.服用时不可嚼碎,以免药粉残留于口腔内,导致严重的口腔溃疡。胰腺外分泌功能测定前应至少停用本品3日。  4.胰酶有微臭但无腐败臭气,煮沸或遇酸即失去活力。

关于胰酶的基本信息介绍

  胰酶(Pancreatin)为助消化药。主要含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶等,胰蛋白酶能使蛋白转化为蛋白胨,胰淀粉酶使淀粉转化为糊精与糖,胰脂肪酶则使脂肪分解为甘油和脂肪酸。在中性或弱碱性条件下活性较强。在肠液中消化淀粉、蛋白质及脂肪,从而起到促进消化和增进食欲的作用。

关于胰激肽原酶的鉴别测定介绍

  1、胰激肽原酶的鉴别测定— 照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。  供试品溶液:取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1mL中含10单位的溶液。精密量取4mL,置10mL量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度。  测定法:

胰激肽原酶的效价测定方法

酶活力照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1ml中约含10单位的溶液。标准品溶液取胰激肽原酶标准品,按标示单位,加上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1m中含10单位的溶液。底物

胰激肽原酶的性状鉴别检查方法

性状本品为白色或类白色粉末;无臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中几乎不溶鉴别(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。精密量取4ml,置10ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲

胰激肽原酶的类别及贮藏方法

类别血管舒张药。贮藏遮光,密封,在阴凉干燥处保存。制剂胰激肽原酶肠溶片