胰酶分离提取
一、原理与目的提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活。因此提取制备胰酶的全部操作过程应在低温和低PH下进行。胰酶以无活性的酶原形式存在于动物的胰脏中。胰蛋白酶原在正常生理条件下可被肠激酶和钙离子所激活或自我环化成为有活性的酶。猪胰蛋白酶原分子量约24000-25000,而猪胰酶分子量为23400。在酶原活化的过程中,酶原N端Lys与Ile之间的 一个肽链被断裂,丢失一个6肽,分子构象发生改变,PI变成10.8。本实验拟通过从猪胰脏中制备胰酶结晶实验,掌握酶的制备、一般分离、提取、纯化和结晶的操作技术。同时为亲和层析、免疫学实验准备实验样品。二、材料与试剂1.仪器紫外光分光光度计、恒温水......阅读全文
胰酶的药物相互作用介绍
1.与等量碳酸氢钠同服可增加疗效。 2.西咪替丁能抑制胃酸分泌,增加胃和十二指肠内的pH值,故能防止胰酶失活,增强口服胰酶的疗效。因为所有的H2受体拮抗药均可降低胃内酸度,故推测雷尼替丁、法莫替丁、尼扎替丁等与胰酶也存在此相互作用,合用时可能需要减少胰酶剂量。 3.本品在酸性溶液中活性减弱,
关于胰脂肪酶的基本介绍
胰脂肪酶是水解膳食脂肪的最重要的酶, 等电点为5.0的酸性蛋白分子。胰脂肪酶(Pancrelipases),特别是它的缓释剂型(例如: Creon, Pancreaze, Pertzye, Ultresa, Zenpep) 是猪源性胰淀粉酶的商用混合物(作用于淀粉水解酶),胰脂肪酶和胰凝乳蛋白酶
简述胰激肽原酶的适应症
胰激肽原酶可用于多种心、脑血管病变,如原发性高血压、动脉硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑动脉硬化、脑血栓、视网膜供血障碍以及周围血管病变等。近来研究发现,本品可用于防止糖尿病微血管病变及早期糖尿病性肾病(有较好的治疗效果,可减少尿清蛋白的排出量)。国外有临床资料提示,胰激肽原酶可增加精子的活性
关于胰酶的注意事项介绍
1.孕妇及哺乳期妇女慎用。 2.本品口服常用肠溶制剂,以避免被酸灭活,但肠衣可能会影响胰酶在十二指肠和空肠上段的生物利用度。 3.服用时不可嚼碎,以免药粉残留于口腔内,导致严重的口腔溃疡。胰腺外分泌功能测定前应至少停用本品3日。 4.胰酶有微臭但无腐败臭气,煮沸或遇酸即失去活力。
使用胰酶的不良反应介绍
1.本药可引起颊部及肛周疼痛、消化道的任何部位出血、过敏或刺激引起呼吸道症状(如喷嚏、流泪、皮疹、鼻炎甚至哮喘)。 2.囊性纤维化的患者应用本药治疗时,可见尿中尿酸增多,且与剂量相关。 3.偶见腹泻、便秘、胃不适感、恶心及皮疹。
关于胰酶的基本信息介绍
胰酶(Pancreatin)为助消化药。主要含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶等,胰蛋白酶能使蛋白转化为蛋白胨,胰淀粉酶使淀粉转化为糊精与糖,胰脂肪酶则使脂肪分解为甘油和脂肪酸。在中性或弱碱性条件下活性较强。在肠液中消化淀粉、蛋白质及脂肪,从而起到促进消化和增进食欲的作用。
关于胰激肽原酶的鉴别测定介绍
1、胰激肽原酶的鉴别测定— 照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。 供试品溶液:取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1mL中含10单位的溶液。精密量取4mL,置10mL量瓶中,用上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)稀释至刻度。 测定法:
胰凝乳蛋白酶_用-GLUPHEPA-测定
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾GLUPHEPA仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」测定 25℃、405 nm 处光吸收值的增加,对硝基苯胺的吸收系数 ε405=10.2×103 l(mol · cm)。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.610 mmol/
胰激肽原酶的效价测定方法
酶活力照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1ml中约含10单位的溶液。标准品溶液取胰激肽原酶标准品,按标示单位,加上述磷酸盐缓冲液(pH7.0)适量使溶解并定量稀释制成每1m中含10单位的溶液。底物
简述胰激肽原酶的药理作用
胰激肽原酶的作用机制为: 1、降解激肽原,生成激肽,从而扩张小血管和毛细血管、改善血管通透性及血流量。 2、通过缓激肽和组胺多肽对血栓烷B2(TXB2)的负反馈,促使血管内皮细胞产生PGI2,从而抑制血小板效应以防止凝血。 3、激活纤溶酶原转变为纤溶酶,以提高纤溶活性,降低血浆中纤维蛋白含
胰酶使用注意及贴壁细胞
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据
胶原蛋白的提取分离介绍
由于胶原是细胞外间质成分,在体内以不溶性大分子结构存在,并与蛋白多糖、糖蛋白等结合在一起,因此胶原的制备包括材料的选择、预处理、酸碱酶盐水法提取、不同类型胶原的分离和纯化。
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方
叶绿体色素的提取与分离
一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等
叶绿素的提取和分离方法
提取叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。提取步骤如下:(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。(2) 将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。(3) 将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100
叶绿体色素的提取与分离
植物叶绿体色素主要有三类:1)叶绿素 2)类胡萝卜素 3)藻胆素。高等植物叶绿体中含有前两类,藻胆素仅存在于藻类植物中。实验方法原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(
叶绿体色素的提取与分离
一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物
膜分离提取法提取黄酮类物质的介绍
膜分离技术也是一种常用的辅助提取技术,其中超滤法作为唯一能用于分子级别的分离方法广泛的应用于黄酮类化合物的提取分离。利用超滤技术分离纯化黄酮化合物最大的优点是操作简便、无需加热、不破坏活性成分的结构,纯化和浓缩一步完成,超滤装置还可反复使用。于涛等利用膜分离方法在对影响超滤效果的工艺条件研究中,
胰酶肠溶胶囊的效价测定
胰蛋白酶照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品原液取装量差异项下的内容物,混匀,精密称取适量(约相当胰酶0.45g),置研钵中,加冷至5℃以下的氯化钙溶液少量,研磨均匀,移至100m量瓶中,用氯化钙溶液稀释至刻度,摇匀;精密量取适量,用冷至5℃以下的硼酸盐缓冲液定量稀释制成每1ml中约含
胰酶肠溶胶囊的鉴别方法
干燥失重取本品内容物,在105℃千燥4小时,减失重量不得过7.0%(通则0831)微生物限度取本品,照胰酶项下的方法检查,应符合规定其他应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)
胰酶肠溶片的基本性状
本品为肠溶片,除去肠溶衣后,显白色至淡黄色。
胰激肽原酶肠溶片的检查方法
纯度照高效液相色谱法(通则0512)测定磷酸盐缓冲液(pH7.0)见胰激肽原酶纯度项下。辅料溶液取淀粉1.3g、糊精0.36g与微晶纤维素0.52g,置离心管中,加流动相A3ml,在漩涡振荡器上混匀分钟,离心(每分钟3000转)15分钟,取上清液滤过,取续滤液,即得。供试品溶液取本品,除去包衣,研细
胰酶肠溶片的鉴别方法
微生物限度取本品,照胰酶项下的方法检查应符合规定。其他应符合片剂项下有关的各项规定(通则0101)。
胰激肽原酶的性状及鉴别方法
性状本品为白色或类白色粉末;无臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中几乎不溶鉴别(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取已测得效价的本品适量,精密称定,加纯度项下的磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解并定量稀释制成每1ml中含10单位的溶液。精密量取4ml,置10ml量瓶中,用上述磷酸盐缓冲
胰酶肠溶片的合成方法
胰蛋白酶照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品原液取本品5片(0.3g规格)或3片(0.5g规格),除去肠溶衣,研细,加冷至5℃以下的氯化钙溶液适量,研磨均匀,移至200ml量瓶中,用氯化钙溶液稀释至刻度,摇匀精密量取适量,用冷至5℃以下的硼酸盐缓冲液定量稀释制成每1ml中约含胰蛋白酶0.
简述胰脂肪酶的基本性质
胰腺脂肪酶包括甘油三酯脂酶与其相关蛋白1 和2、胆盐刺激性脂酶及磷脂酶 A2。这些脂肪酶协调作用,是膳食脂肪消化的主要酶。胰腺脂肪酶的发育不仅与年龄相关,还受到膳食结构、内分泌激素等的调节,其表达的改变与肥胖等代谢性疾病有着密切的关系。胰腺脂肪酶的调节可能是治疗肥胖等代谢性疾病的靶点。
胰弹性蛋白酶的基本信息
中文名称胰弹性蛋白酶英文名称pancreatic elastase定 义编号:EC 3.4.21.36。优先水解丙氨酸羧基端肽键的弹性蛋白酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
关于胰激肽原酶的基本信息介绍
胰激肽原酶,存在于哺乳动物胰腺等器官及尿液分泌物中,是激肽体系中的一个组成部分,又称血管舒缓素或胰激肽释放酶,从动物胰腺中提取的一种蛋白水解酶,属蛋白水解酶类。由18种氨基酸和4种糖所组成,有扩张血管、改善血液循环和微循环以及防止血栓形成的作用。
关于胰激肽原酶的物质检查介绍
1、酸碱度:取胰激肽原酶适量,加水溶解并制成每1mL中含300单位的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为5.5~7.5。 2、溶液的澄清度:取胰激肽原酶适量,加水溶解并制成每1mL中含2mg的溶液,依法检查(通则0902第二法),溶液应澄清。(供注射用) 3、脂肪:取胰激肽原酶1.0g