琼脂糖电泳步骤之超级基础篇

一、电泳前准备准备内容作用1.刷干净电泳制胶的梳子,板子,槽子,蒸馏水洗净晾干防止不必要的重复污染,减少外来的污染。梳子干净有利于梳孔的形成。2.检查电泳槽,根据情况更换buffer排除电泳槽的电极接触不良,确保buffer的缓冲能力,减少污染。3.根据DNA的分离范围选择合适的胶浓度并记录达到较好的分离效果,防止样过快跑出胶或者是过慢浪费时间。4.计算agarose的用量和制胶 buffer的用量记录,胶最终越薄越好。实验记录备查二、制胶步骤注意事项1.称量agarose和bufferBuffer不要用成H2O,称量相对准确2.融胶,加热到胶产生大量的气泡时,拿出摇匀,继续加热到完全溶解,拿出摇匀,再加热到沸腾。非常热,小心烫手,另外注意不要加热过度使胶冲出瓶子。因此注意选择起码为胶体积2倍以上的瓶子。保证胶混匀和完全溶解,减少可能因此引起的胶中孔径不均匀影响分离效果。3.倒胶,可用水浴的办法使胶冷却到60度左右,即......阅读全文

琼脂糖凝胶电泳

   学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理;  (2) 掌握使用水平式电泳仪的方法;  (3)掌握核酸琼脂糖凝胶电泳的基本操作  2实验原理  琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小

琼脂糖核酸电泳实验

琼脂糖核酸电泳实验1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架 好梳子;2.根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确 称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30 ml);3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳1.      用封边带封住塑料托盘开放的两边或清洁干燥的玻璃板的边缘形成一个模具,置一个水平支架上。2.      配制足量的电泳缓冲液(1×TAE或0.5×TBE)用以灌满电泳槽和配制凝胶。 配胶和灌满电泳槽使用同一批缓冲液。3.      根据欲分离DNA片段大小用电泳缓冲液配制

琼脂糖凝胶电泳

            实验方法原理 琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维,后者再聚合成半径 20~30 nm 的超螺旋结构。

DNA琼脂糖核酸电泳

            实验方法原理 带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳可以用于:(1)检测PCR结果;(2)分离不同大小的DNA条带。实验方法原理琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维,后者再聚合成半径 20~30 n

琼脂糖凝胶电泳

实验方法原理 琼脂糖是 D- 和 L- 半乳糖残基通过 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷键交替构成的线状聚合物。L- 半乳糖残基在 3 和 6 位之间形成脱水连接。琼脂糖链形成螺旋纤维,后者再聚合成半径 20~30 nm 的超螺旋结构。实验材料 DNA 样品DNA 大小标准品试剂、试剂盒 琼脂

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖是从琼脂中提取出来的,是由D-半乳糖和3、6-脱水-L-半乳糖结合的链状多糖,含硫酸根比琼脂少,因而分离效果明显提高。琼脂糖电泳具有以下优点:①琼脂糖含液体量大,可达98%~99%,近似自由电泳,但样品的扩散度比自由电泳小,对蛋白质的吸附极微;⑦琼脂糖作为支持体有分辨率高、重复性好等优点;③电

产品设计之接口篇

导语随着科学技术的进步,芯片的集成度越来越高,所以在产品的设计上,能够保证产品本身稳定,抗干扰,防静电等因素,芯片外围的接口设计,也是产品开发过程中一个重要的环节,接下来,本文就针对产品设计过程中常见的几种接口,和大家交流下。电源接口电源接口是电子产品不可缺少的一部分,芯片供电不管是通过外部电池直接

IVD凝血试剂之原料篇

凝血诊断试剂盒的研发最关键的是原材料的获得,原材料的质量不同会直接影响到试剂盒的性能指标,下面我将最常用的一些凝血原料做一个介绍。PT兔脑粉将新鲜兔脑彻底除去软脑膜及血管网,用生理盐水清洗,置于研钵中加丙酮研磨,使得脑组织完全脱水成灰白色细粉末,用滤纸过滤干燥即可。 重组TF通过基因工程的手段,分子

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

实验方法原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

一、实验目的学习RNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术。二、实验原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

一、实验目的学习RNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术。二、实验原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的

RNA的变性琼脂糖凝胶电泳实验原理、材料和操作步骤

            实验方法原理 RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的

琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品的基本步骤

  1. 制备琼脂糖凝胶,尽可能薄。DNA样品与上样缓冲液混匀,上样。推荐使用的靶基因的上样量见不同条件下上样本的使用指针比较表。一般而言,对地高辛杂交系统,所需DNA样品的浓度较低,每道加2.5-5μg人类基因组DNA;如果基因组比人类DNA更复杂(如植物DNA)则上样量可达10μg;每道上质粒D

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理、仪器试剂和操作步骤

一、原理DNA在碱性的溶液中带有负电荷,因此,在电场作用下朝正极移动。在琼脂糖凝胶中电泳时,由于琼脂糖凝胶具有一定孔径,长度不同的DNA分子由于所受凝胶的阻遏作用大小不一,迁移的速度不同,从而可以按照分子量大小得到有效分离。溴化乙锭可插入到DNA分子的双链中。在紫外光的照射下,插入溴化乙锭的DNA呈

琼脂糖凝胶电泳实验

【实验目的】学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的方法和技术。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳技术是DNA 分子片段的分子量测定和分子构象研究以及DNA 分离纯化的重要实验手段。DNA 分子在琼脂糖凝胶电泳中泳动时受到电场驱动力和凝胶的摩擦阻力。一般情况下,单位长度双链DNA 带有几乎相等的电荷,故在

琼脂糖凝胶电泳实验

实验方法原理 用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大

琼脂糖凝胶电泳实验

实验方法原理 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决

碱性琼脂糖凝胶电泳

实验方法原理 碱性琼脂糖凝胶电泳是在高 pH 条件下进行的,它能引起胸腺嘧啶和鸟嘌呤残基丢失一个质子,从而阻止与其各自的配对碱基-腺嘌呤和胞嘧啶间氢键的形成。变性的 DNA 保持单链状态,根据其分子大小在碱性琼脂糖凝胶中泳动。其他的变性剂如甲酰胺和尿素由于能引起琼脂糖橡胶化,因此结果往往较差

琼脂糖凝胶电泳实验

            实验方法原理 用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分

琼脂糖凝胶电泳简介

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。

碱性琼脂糖凝胶电泳

碱性琼脂糖凝胶电泳是在高 pH 条件下进行的,它能引起胸腺嘧啶和鸟嘌呤残基丢失一个质子,从而阻止与其各自的配对碱基-腺嘌呤和胞嘧啶间氢键的形成。变性的 DNA 保持单链状态,根据其分子大小在碱性琼脂糖凝胶中泳动。其他的变性剂如甲酰胺和尿素由于能引起琼脂糖橡胶化,因此结果往往较差。本实验来源「分子克隆

琼脂糖凝胶电泳原理

琼脂糖凝胶电泳的分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力。但由于其孔径相比于

琼脂糖凝胶电泳原理

  琼脂糖凝胶电泳原理  琼脂糖凝胶电泳,是以琼脂糖为介质,对不同大小的DNA 或 RNA 实现分离的一种电泳方法。琼脂糖是一种多糖,具有亲水性,但是不带电荷。  使得 DNA 在碱性条件下使其带负电荷(pH8.0 的缓冲液),在电流作用下,以琼脂糖凝胶为介质,由负极向正极移动,根据不同的 DNA

碱性琼脂糖凝胶电泳

            实验方法原理 碱性琼脂糖凝胶电泳是在高 pH 条件下进行的,它能引起胸腺嘧啶和鸟嘌呤残基丢失一个质子,从而阻止与其各自的配对碱基-腺嘌呤和胞嘧啶间氢键的形成。变性的 DNA 保持单链状态,根据其分子大小在碱性琼脂糖凝胶中泳动。其他的变

琼脂糖凝胶电泳,凝胶电泳条带

  原理  琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有"分子筛"和"电泳"的双重作用。  琼脂糖凝胶具有网格结构,电泳分子通过时会受到阻力,大分子物质在泳动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于

Western-Blot技术篇之样品制备

  Western Blot 是一种用于检测蛋白质以及蛋白质翻译后修饰的常用方法,可以对简单或复杂生物样品中的目标蛋白质进行半定量或定量分析。其操作步骤包括:   从细胞、组织或体液中制备样品(蛋白质提取和蛋白质浓度测量)   十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶通过电泳按大小分离蛋白质

Western-Blot技术篇之样品制备

  Western Blot 是一种用于检测蛋白质以及蛋白质翻译后修饰的常用方法,可以对简单或复杂生物样品中的目标蛋白质进行半定量或定量分析。其操作步骤包括:   从细胞、组织或体液中制备样品(蛋白质提取和蛋白质浓度测量)   十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶通过电泳按大小分离蛋白质

Western-Blot技术篇之样品制备

  Western Blot 是一种用于检测蛋白质以及蛋白质翻译后修饰的常用方法,可以对简单或复杂生物样品中的目标蛋白质进行半定量或定量分析。其操作步骤包括:   从细胞、组织或体液中制备样品(蛋白质提取和蛋白质浓度测量)   十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶通过电泳按