BACEndSequencing
BAC End-Sequencing(Diana Bocskai)For every 4 mls of culture, dissolve the BAC DNA pellet in 40 µl of water. for example: Usually each BAC is grown in 20 mls LB/CM total, then is dispensed into one Autogen tube (4 mls in each of the 5 tubes). After miniprep, add 40 µl of water to each tube (200 µl total for each BAC).Vortex the Autogen tube and let sit for at least 0.5 hour. Then pool the 5 samples into one for each B......阅读全文
DNA测序40周年：DNA测序的过去、现在和未来（上篇）
在DNA测序过去的40年中，我们见证了诸多技术的变革和测序规模的极度增长。从几千个碱基到第一个人体基因组，乃至当前数以万计的人体和无数其它的基因组。包括作为大量分子现象的“计数器”在内，DNA测序被广泛和创造性地应用于各个领域。从长远来看，我们可以预测DNA测序技术所带来的影响将会与显微镜的使用
VITEK32全自动微生物鉴定及药物敏感试验分析系统
1． 工作原理1.1 用途：VITEK-32全自动微生物分析系统，用于对临床标本分离细菌进行菌种鉴定及药物敏感试验分析检测。1.2 检测原理：VITEK-32全自动微生物分析仪由真空充液泵/读数器/恒温器、电脑主机及打印机组成。真空充液泵三分钟内把样本注入试验卡中；读数器/恒温箱可同时容纳32个反应
外源电场辅助堆肥过程多污染物协同调控影响机制研究
我国动物蛋白生产量高达世界总产量20%，畜禽粪便产生量亦十分巨大，达40亿吨/年。高温好氧堆肥技术是实现畜禽粪便无害化处理，将其转化为有机肥料，实现农牧循环的重要技术。然而，饲料添加剂中重金属残留、堆肥产品腐殖化程度低、堆肥过程氨气和温室气体排放量高等问题，严重危害畜禽粪便肥料化利用的安全性以及
关于血行播散型肺结核的鉴别诊断介绍
多数血行播散型肺结核临床表现不典型，容易出现患者自我延误和临床误诊。 1.伤寒 血行播散型肺结核常高热、有明显中毒症状、而呼吸道症状不明显、疾病早期（ 1～3 周）胸部 X 线检查可无异常发现或仅显示肺纹理粗乱及网织样改变， 尤其是婴幼儿血行播散型肺结核更应与伤寒加以鉴别。伤寒是伤寒杆菌引起的
袁隆平，朱立煌等人最新PNAS解析杂种优势
来自中科院遗传与发育生物学研究所，湖南杂交水稻研究中心等处的研究人员通过系统遗传学的途径，综合表型组、基因组和转录组等组学信息，通过对二个永久性分离群体的遗传分析和图位克隆揭示了两系杂交稻两优培九的杂种产量优势的关键性状及相关的基因和QTLs。 这一研究成果公布在《美国国家科学院院刊》（PNA
转基因小鼠的“三段进阶”
小鼠转基因的“三段进阶”。这里我们说的转基因小鼠是指：将一段外源基因随机插入到小鼠基因组中，获得过量表达目的基因的小鼠模型。转基因1.0 显微注射法构建完全随机插入转基因小鼠用显微注射针将线性化的外源DNA片段直接注入小鼠受精卵的原核中，使外源基因整合到小鼠基因组中，从而获得转基因小鼠。优点：过程较
岷江上游林线附近土壤磷素研究取得进展
在高山地区，磷和氮通常都被认为是影响植物群落分布和限制初级生产力的重要因子。与氮供应受大气沉降影响相比，高山地区植物所需要的磷，其供应更依赖于土壤过程。土壤中磷素受生物地球化学作用的影响存在着多种形态，不同形态磷素的生物有效性及其在土壤中的转换能力均存在较大差异。高山林线作为亚高山
如何选择BTX转基因仪（电转仪）？
1、确定目标对象：也就是你所有转的目的物是什么东西？ 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato，Tr
VITEK32全自动微生物鉴定及药物敏感试验分析系统1
1． 工作原理1.1 用途：VITEK-32全自动微生物分析系统，用于对临床标本分离细菌进行菌种鉴定及药物敏感试验分析检测。1.2 检测原理：VITEK-32全自动微生物分析仪由真空充液泵/读数器/恒温器、电脑主机及打印机组成。真空充液泵三分钟内把样本注入试验卡中；读数器/恒温箱可同时容纳32个反应
基因构建策略
基因构建策略下面我们介绍一下转基因和基因打靶载体构建策略的一般原则。转基因转基因是线性化的DN**段，通常包含一个启动子（promoter），一个cDNA，一个内含子和一个多聚腺苷酸信号，常常克隆到一个质粒载体上。当注射到小鼠受精卵的前核内时，它们整合到随机的位点，通常是包含不同的拷贝数从头到尾的多
Rosa2基因组中的安全位点
当我们提到“safe harbour”，你首先想到的什么呢？我们今天要讨论的不是船只安全停泊的港口，而是小鼠基因组中外源基因定点整合的安全位点。接下来就让我们一起探索小鼠基因组中的最经典的安全位点之一：Rosa26，作为基因组中的安全位点是种怎样的体验吧。 Rosa26：安全这块我拿捏的死死地！ 随
如何选择BTX转基因仪（电转仪）？（一）
1、确定目标对象：也就是你所有转的目的物是什么东西？ 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato
重组杆状病毒的纯化实验——编码β半乳糖苷酶
杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒，可用于（1）作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率（2）作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白（3）研究杆状病毒基因组的结构与功能（4）研究真核基因表达的调控机制。实验方法原理由于昆虫杆状病毒环状双链DNA基因组很大 (约 13
DNA抽提
DNA抽提（主要内容如下）· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction from Cell and Tissue· Mitochondria DNA Isola
Roche－454（GS－FLX－Titanium－System）超高通量测序技术原理
Roche 454（GS FLX Titanium System）超高通量测序技术原理2005年底，454公司推出了革命性的基于焦磷酸测序法的超高通量基因组测序系统——Genome Sequencer 20 System，被《Nature》杂志以里程碑事件报道，开创了边合成边测序的先河。2007
基因组印记
这是根据我写的一个PPT摘录的，希望能有朋友讨论这方面的问题。并拓宽这个领域，讨论epigenetics更广泛的问题。毕竟epigenetics是现在动物功能基因组研究的主流和一个重要方向。1. 印迹基因的概念及重要意义概念:基因组印迹是特指来源于亲本的等位基因进行不对称后成修饰后而导致的单等位基因
外显子捕获与扩增（一）
实验材料 大肠杆菌菌株 HB101 质粒 pSPL3COS-7 细胞载体 pBluescriptⅡ大肠杆菌 DH5α试剂、试剂盒 pSPL3 多克隆位点图谱限制性内切核酸酶PvuⅡT4DNA 连接酶LB 琼脂平板黏粒载体TESOC 培养基琼脂糖凝胶LB 肉汤培养基PBS胰酶-EDTA 溶液D
白细胞分化抗原的分类（二）
Bm，Ba,,Ma,Eo gp45～50 参与IgE生成的调节，调节B细胞分化，IgE介导的ADCC，结合CD21？CD24 BA-1 B,G gp41/38 ？CD25 TAC,7G7/B6;(IL-2Rα) Ta,Ba,Ma gp55 组成高亲力受体，T细胞生长CD26 5.9,Tal Ta,B
杆状病毒昆虫细胞表达系统2
五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进，对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初，最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法，这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中，转移质粒和亲代杆状病毒
DNA测序技术的现状和发展（二）
三、新一代DNA测序技术DNA测序技术已广泛应用于生物学研究的各个领域，很多生物学问题都可以借助高通量DNA测序技术予以解决。过去三年，大规模平行 测序平台（massively parallel DNA sequencing platform）已经发展为主流的测序技术，这项测序技术的出现不仅
沉淀重量法
一. 沉淀重量法的基本步骤 例：沉淀形式与称量形式相同 沉淀形式与称量形式不同： 二. 沉淀重量法对沉淀的要求 （一）对沉淀形式的要求 1. S 要小：溶解损失小于称量误差； 2. 沉淀要纯净； 3. 沉淀易于过滤、洗涤（尽可能生成晶型 ¯ ）。
微阵列中期分裂相染色体的比较基因组杂交（CGH）－实验
实验方法原理 实验材料 高分子质量基因组DNA EcoR I 或 Dpn II试剂、试剂盒 SSCcDNA阵列dNTP 混合液 dCTP 酵母 tRNADNA 聚合酶 I仪器、耗材 Qiaquick PCR 纯化试剂盒 BioPrime 标记试剂盒Micrcon 30 滤器杂交炉Maxiprep D
香山科学会议综述：学科交叉为植物染色体工程注入新活力
安徽中医学院中药标本中心收藏有药用植物蜡叶标本7万多份，数量居全国医药院校之首。除一般的标本外，还有许多地道药材和特色药材的专题标本和珍稀濒危的模式标本，为研究安徽和全国中药材资源，以及普及中药知识提供了丰富的实物资料。图为研究人员向参观者介绍标本中心珍藏的珍贵中药标本。（
揭开玉米“自私”基因的面纱－有助遏制花粉漂移
玉米是很多粗粮爱好者的心头好。细心的“吃货”会发现，市面上的“纯种”玉米单价更高。 和小麦、水稻的自花授粉不同，作为三大主粮之一的玉米，虽然“雌雄同株”，但却是典型的异花授粉作物，这使得大田里的玉米往往因为“串粉”而难以保持其“纯种”特性。为了生产卖相和口感更好的纯种玉米，不得不采取时间或空间
微阵列中期分裂相染色体的比较基因组杂交（CGH）－实验
染色体 CGH 的独特优点在于它的全基因筛查功能，与检测单一靶 DNA 剂量改变的低通量方法，如 Southern 分析、PCR 和荧光原位杂交（FISH) 相比，速度显著提高且省力。目前染色体 CGH 是一种比较完善的分子细胞遗传学方法，但是它的两个缺陷限制其作为一种综合性筛查工具的应用。来源：《
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体3
在作为载体时，这些噬菌体有一个很大的优点，即克隆到M13mp载体的外源DNA片段（双链），在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆，可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板：①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板；②制备仅有一条
揭开玉米“自私”基因的面纱
白色玉米为单向杂交不亲和新品种，未见与邻近黄色玉米“串粉”现象。受访者供图 玉米是很多粗粮爱好者的心头好。细心的“吃货”会发现，市面上的“纯种”玉米单价更高。 和小麦、水稻的自花授粉不同，作为三大主粮之一的玉米，虽然“雌雄同株”，但却是典型的异花授粉作物，这使得大田
Complete－PCR－Guide
In the polymerase chain reaction (PCR), a thermostable DNA polymerase amplifies DNA that is flanked by known sequences. The known sequences correspond
免疫检查点阻断疗法，原来依赖于这些细胞
在与病毒或癌症的长期对抗中，精疲力竭的T细胞会逐渐丧失功能，这种状态被称为T细胞耗竭。在当今大热的免疫治疗中，检查点阻断会促进肿瘤浸润CD8+ T淋巴细胞的增殖。不过，这种现象背后的机理仍不清楚。 瑞士洛桑大学Werner Held领导的研究团队近日鉴定出肿瘤内Tcf1+PD-1+CD8+
揭开玉米“自私”基因的面纱
白色玉米为单向杂交不亲和新品种，未见与邻近黄色玉米“串粉”现象。受访者供图 玉米是很多粗粮爱好者的心头好。细心的“吃货”会发现，市面上的“纯种”玉米单价更高。 和小麦、水稻的自花授粉不同，作为三大主粮之一的玉米，虽然“雌雄同株”，但却是典型的异花授粉作物，这使得大田里的玉米往往因为“