BACEndSequencing

BAC End-Sequencing(Diana Bocskai)For every 4 mls of culture, dissolve the BAC DNA pellet in 40 µl of water. for example: Usually each BAC is grown in 20 mls LB/CM total, then is dispensed into one Autogen tube (4 mls in each of the 5 tubes). After miniprep, add 40 µl of water to each tube (200 µl total for each BAC).Vortex the Autogen tube and let sit for at least 0.5 hour. Then pool the 5 samples into one for each B......阅读全文

活体电穿孔法介绍

1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation)是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115

一文了解呼吸速率的测定广口瓶法结果分析

  呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。测呼吸速率的方法虽很多,但不外乎测定CO2的释放量或O2的吸收量两类方法。本实验用广口瓶法测定植物的呼吸速率,并比较不同萌发阶段小麦种子及幼芽的呼吸速率。  【原理】  在密闭容器中加入一定量碱液(一般用Ba(OH

临床诊断中的FISH检测

FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病

需要知道!血红蛋白变异体对糖化血红蛋白有哪些影响

  这是一篇2017年发表在journal of clinical laboratory analysis上的文章,评价了存在血红蛋白变异体:HbJ Bangkok、HbE、HbGTaipei和α-地中海贫血HbH时,对使用IE-HPLC分析糖化血红蛋白(HbA1c)造成不同程度的干扰。  血红蛋白

菌落pcr步骤

一、引言常规的PCR扩增需要进行细菌培养、质粒制备等多步操作后才能进行基因扩增,操作繁琐耗时较长,同时在反复的操作中DNA量损失也较大,产率较低。在1989年 Gussow Clackson3建立了菌落PCR( colony PCR)法,菌落PR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以单个菌

3分钟了解广口瓶法测定植物的呼吸速率

呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。测呼吸速率的方法虽很多,但不外乎测定CO2的释放量或O2的吸收量两类方法。本实验用广口瓶法测定植物的呼吸速率,并比较不同萌发阶段小麦种子及幼芽的呼吸速率。【原理】在密闭容器中加入一定量碱液(一般用Ba(OH)2),并悬

选择重组蛋白表达的合适方法(二)

三、毕赤酵母酵 母 作 为 另 一 种 表 达 重 组 蛋 白 的 强 有 力 的 传 统 工 具 ,已 被 成 功 应 用 于 大 量 蛋 白 质 的表 达 。酵 母 既 具 有 大 肠 杆 菌 的 许 多 优 点 ,如 增 殖 时 间 短 、基 因 组 易 于 操 作 ,又 具 有 真

云序生物最新m6A“RNA甲基化”研究汇总—病毒篇

  RNA甲基化领域是当前最耀眼的国际科研明星,也是国自然申请的大热点;究其原因,是因为最近一两年,RNA甲基化的功能与分子机制方面取得了巨大的进展。RNA甲基化已被证实在癌症发生发展,病毒感染,神经发育,干细胞分化等过程中发挥着关键作用。今天,我们承接上一期的癌症篇,为您带来病毒领域的RNA甲基化

多重端粒荧光原位杂交实验(四)

(2)杂交后洗脱、抗体检测和复染1.准备封闭液和抗体溶液1〜3。2.振荡抗体溶液,在微型离心机中以最大转速离心10min。避光放置,如有必要可在室温中预温。3.加洗脱液I到干净的染色缸中,水浴中预温到72℃后调整pH至7.0。4.加洗脱液II到干净的染色缸中,室温(20〜25℃)放置。5.同时将用水

新一代测序技术之三国时代(中):Roche/454

      454公司可谓新一代测序技术的奠基人。2005年底,454公司推出了革命性的基于焦磷酸测序法的超高通量基因组测序系统——Genome Sequencer 20 System,被《Nature》杂志以里程碑事件报道,开创了边合成边测序(sequencing-by-synthesis)的先河

纯水生产过程中的重要工艺

纯水生产过程中的重要工艺1 活性炭吸附分离纯净水在灌装前都必须经过过滤,以除去水中的泥渣、悬浮物、藻类、细菌、霉菌等杂质。在水处理工艺中,活性炭处理是必需的。活性炭具有很多微孔和巨大的比表面积,凭借这些微孔对有机物的吸附作用来去除水中的致突变物质,它可降低水中TOC和THMs等,同时可去除水中色、嗅

m6A“RNA甲基化”研究汇总—病毒篇

RNA甲基化领域是当前最耀眼的国际科研明星,也是国自然申请的大热点;究其原因,是因为最近一两年,RNA甲基化的功能与分子机制方面取得了巨大的进展。RNA甲基化已被证实在癌症发生发展,病毒感染,神经发育,干细胞分化等过程中发挥着关键作用。今天,我们承接上一期的癌症篇,为您带来病毒领域的RNA甲基化研究

相建海研究员获国际甲壳动物学会杰出研究贡献奖

  近日,国际甲壳动物学会(The Crustacean Society,TCS)理事会授予中国科学院海洋研究所研究员相建海2017年度“国际甲壳动物学会杰出研究贡献奖(The Crustacean Society Award for Excellence in Research, TCSAER)”

农林RNA测序助力玉米籽粒Dek10突变体研究

  呼吸作用是线粒体最重要的代谢。其中,线粒体中5个和呼吸相关的复合物起到了重要影响。很多呼吸链相关蛋白都是由线粒体基因组编码的。这些RNA会受到细胞核内诸如pentatricopeptide repeat (PPR) 蛋白的转录后修饰。玉米defective kernel 10(dek10) 是一

长寿有风险!PNAS找到端粒调控因子,既能延寿也可促癌

  细胞是生物学中构成生物体的基本单位,也会经历“生老病死”的过程。其中,细胞的分裂、复制是细胞寿命的“风向标”,也是生物体生长、发育和繁殖的基础。一旦细胞停止分裂,生物体便迎来了衰老。从这个角度来说,如果能够打破细胞分裂的天花板,衰老将距离人类更遥远。  当然,理想总是很美好。有时候细胞的无限繁殖

农林RNA测序助力玉米籽粒Dek10突变体研究

呼吸作用是线粒体最重要的代谢。其中,线粒体中5个和呼吸相关的复合物起到了重要影响。很多呼吸链相关蛋白都是由线粒体基因组编码的。这些RNA会受到细胞核内诸如pentatricopeptide repeat (PPR) 蛋白的转录后修饰。玉米defective kernel 10(dek10)

磷酸苯丙哌林的性状鉴别检查方法

性状本品为白色或类白色粉末;微带特臭本品在水中易溶,在乙醇中略溶,在丙酮或乙醚中不溶。熔点本品的熔点(通则0612)为148~153℃。鉴别(1)取本品约20ng,加水5ml溶解后,加稀盐酸ml,加硫氰酸铬铵试液3~5滴(或少许颗粒),产生粉红色沉淀。(2)取本品少量,加水0.5m1溶解后,加0.2

重组表达载体pET32aHisAPC10的序列测定

通过上述实验所构建的表达质粒pET-32a-His-APC10经限制性内切酶分析正确后,必须进行DNA序列测定,以获得序列完全正确的克隆。1. 基本原理目前应用的DNA序列测定方法有双脱氧法(Sanger法)和化学测序法(Maxam-Gilbert法),在变性聚丙稀酰胺凝胶(测序胶)上进行高分离度的

ULS标记实验

基本方案             实验方法原理 Universal Linkage System(ULS®;KREATECH Biotechnology BV

南科大环境学院郑国贸团队在室内新污染物筛查方面取得进展

近日,南方科技大学环境科学与工程学院副教授郑国贸团队在 Environmental Science & Technology  上发题为“High-Resolution Mass Spectrometry Screening of Quaternary Ammonium Compounds (QAC

磷酸苯丙哌林

含量测定取本品约0.3g,精密称定,加冰醋酸20ml与醋酐4m1溶解后,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显绿色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于40.74mg的C21H27NO·H3PO4。类别镇咳药贮藏遮光,密封保存。制剂

ULS标记实验

实验方法原理Universal Linkage System(ULS®;KREATECH Biotechnology BV)是用铂染色络合物与鸟嘌呤核苷的N7残基反应进行标记的方法。反应使核酸与铂荧光基团之间形成稳定的化学键。依据反应条件,ULS化合物在较低的程度上也与腺嘌呤形成络合物。该方法已用于

磷酸苯丙哌林介绍

含量测定取本品约0.3g,精密称定,加冰醋酸20ml与醋酐4m1溶解后,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显绿色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于40.74mg的C21H27NO·H3PO4。类别镇咳药贮藏遮光,密封保存。制剂

ULS标记实验

实验方法原理 Universal Linkage System(ULS®;KREATECH Biotechnology BV)是用铂染色络合物与鸟嘌呤核苷的N7残基反应进行标记的方法。反应使核酸与铂荧光基团之间形成稳定的化学键。依据反应条件,ULS化合物在较低的程度上也与腺嘌呤形成络合物。该

中国学者4月参与发表多篇Nature文章

  4月中国学者参与的多项研究在Nature杂志及其重要子刊上发表,其中主要包括中科院学者结构药理学研究成果,厦门大学Nur77与p38的互作研究,以及陆地棉基因组的测序成果。  首先来自中国科学院上海药物研究所的研究人员首次测定了该受体蛋白的高分辨率三维结构,揭示了P2Y1R抑制剂分子的作用机理,

三丰SJ210粗糙度仪维修更换测针

作为日常工具使用的便携式表面粗糙度仪。SJ210粗糙度仪(日本三丰Mitutoyo)作为日常工具使用的便携式表面粗糙度仪,适合现场使用,重量轻巧、操作简单、测量精度高;大型的LCD文字表示,易于清晰读取;检出器的量测范围扩大为350μm;检出器的驱动部有退避功能;可对应新/旧 JIS、DIN、ISO

重组DNA的分离、克隆与测序实验手册4

H. Fragment purification on Sephacryl S-500 spin columnsDNA fragments larger than a few hundred base pairs can be separated from smaller fragments by

二倍体人类基因组的首次全面分析

  2003年人类基因组测序的完成可谓生命科学史上的一个里程碑。然而,这个项目并非没有缺陷。最终组装好的序列,也就是人们所说的参考基因组,是由单倍体序列组成,但是人类基因组却是二倍体的。  近日,美国的一组研究人员首次对二倍体的人类基因组进行了全面分析,并将其结果发表在《Nature Methods

三丰SJ210粗糙度仪维修更换测针

  品牌:三丰   型号:SJ-210   轻量精巧,操作简便!   作为日常工具使用的便携式表面粗糙度仪。   SJ210粗糙度仪(日本三丰Mitutoyo)作为日常工具使用的便携式表面粗糙度仪,适合现场使用,重量轻巧、操作简单、测量精度高;大型的LCD文字表示,易于清晰读取;检出器的量测

常用化学试剂英文缩写一览表(一)

  在分析检测实验中我们经常会用到各种试剂,而有的试剂名字会很长并且书写繁琐,所以,经常会以他的缩写形式来表达。千万不要别人说了一个DMF,你还傻傻的不知所谓何物,而闹笑话哦。   A   英文缩写 全称   A/MMA 丙烯腈/甲基丙烯酸甲酯共聚物   AA 丙烯酸   AAS