SequencingoffCosmid,BAC,PAC,withABIBigDyeTerminators
Big Dye Protocols and Notes - Cosmid, BAC, BAC, Fosmid TemplatesHi all,Over the past two months, we have been testing various reaction conditions for the ABI Big-Dye Terminators with double-stranded DNA templates ranging from pUC or pGEM without any insert up to bacterial genomes in the 2 Mbp size. Below are the results of these experiments and the conclusions we have reached. PLEASE BE ADVISED that any deviation fro......阅读全文
我国揭示ABI1sHSP22在激素ABA和Auxin互作中的作用机制
植物激素脱落酸(ABA)和生长素(auxin)相互协同或拮抗调控了植物生长发育和应对环境胁迫的过程。深入解析两种激素的交叉作用机制对于农业生产中定向编辑基因、培育优良性状具有重要意义。目前已鉴定多个既能响应脱落酸也能响应生长素的基因,但其交叉作用机制理解甚少。图: ABI1-sHSP22介导AB
长距离PCR
· Long PCR (Church Lab)PCR conditioning for different templates, primer design, and moreLong PCR Reagents and Guidelines (Harusr/locald)Detail
杆状病毒表达系统用于表达融合型蛋白的转染质粒
是一类早期构建的转染质粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每个载体中,多角体蛋白基因启动子下游ATG启始密码后含有一个单一的BamHⅠ酶切位点,当外源基因和多角体基因的读码框架正确时,就可以获得含1个或几个多角体蛋白N端氨基酸的融合型外源基因。
Simplified-Arabidopsis-Transformation-Protocol
实验概要Our present protocol (Clough and Bent, 1998; modified from Bechtold et al. 1993) is extremely simple. We have found that the MS salts, hormone
DNA-序列分析技术
实验方法原理 本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDeoy TM Terminator
DNA-序列分析技术
DNA序列分析技术可用于:(1)分析物种的遗传多样性;(2)鉴定新的物种;(3)用于比较基因组学。实验方法原理本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDe
关于黏性质粒载体的简介
由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位
CNAS首批通过食品安全管理体系认证互认同行评审
近日,太平洋认可合作组织(PAC)同行评审组对中国合格评定国家认可委员会(CNAS)进行了为期4天的食品安全管理体系互认现场评审。CNAS以“零”不符合的优异成绩顺利通过了现场同行评审。 来自PAC的两位同行评审员对CNAS的食品安全管理体系和认可活动进行了全面、细致的评审,并到北京中安质
ARM存储格式之大端小端
开头讲个有关 大端小端的故事: 端模式(Endian)的这个词出自Jonathan Swift书写的《格列佛游记》。这本书根据将鸡蛋敲开的方法不同将所有的人分为两类,从圆头开始将鸡蛋敲开的人被归为Big Endian,从尖头开始将鸡蛋敲开的人被归为Littile Endia
SLAFseq技术:大规模基因分型高通量策略
大规模基因分型在遗传相关性研究中起着重要作用,尤其是和高通量测序技术结合后,它为基因挖掘带来了新的机遇。大规模基因分型的有效解决方法:SLAF-seq(specific-locus amplified fragment sequencing),该技术前期利用生物信息学方法,对目标物种的参考基因组(
DNA三代测序技术原理、平台、特点介绍
人类基因组计划、基因芯片、个性化分子诊断、生物云计算……这些在21世纪第一个十年里吸引无数眼球的热门词汇,都和一个产业颇有渊源——DNA测序。生物技术和信息技术在这片创意新天地里水乳交融,如果用一句诗来形容坐拥两大技术护航的DNA测序产业,那就是——天生丽质难自弃。随着人类基因组计划的完成,人类对自
絮凝剂配药及加药系统操作规程
配药及加药系统主要为气浮反应及污泥调理提供所需混凝药剂,以强化反应效果,提高处理效率。今天,我们就来了解一下絮凝剂配药及加药系统的操作步骤及注意事项。一、操作步骤:(1)PAC聚合氯化铝药剂的配制与投加①先将自来水放入PAC药剂箱2/3处,开启PAC搅拌机,同时将所需PAC均匀加入箱内,一边搅拌一边
柯斯质粒载体的特点
柯斯质粒是一类人工构建的含有lDNA的cos序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体,cosmid是cos site carrying plasmid的缩写。柯斯质粒的大小为4-6kb,由3部分组成:A.多克隆位点区B. 含有cos位点的lDNA区C. 复制起始位点和抗性标记区
酒精测试仪的功能及注意事项
功能 1、人体呼气酒精含量测试 2、3档酒精浓度含量提示,LED灯直观显示 --安全(绿类): 低于 0.02% BAC (0.10mg/ l BRAC) --警示(黄灯): 0.02% BAC (0.10mg/l BRAC) 至 0.05% BAC (0.25mg/l BRAC)
Complete-PCR-Guide
In the polymerase chain reaction (PCR), a thermostable DNA polymerase amplifies DNA that is flanked by known sequences. The known sequences correspond
血气分析的临床应用
1.判断呼吸功能 (1)通气功能障碍:此时PaCO2升高,PaO2降低,且二者升降数值大致相等。 (2)换气功能障碍:此时Pa02降低,PaC02正常或降低。 (3)通气与换气功能障碍并存:此时PaO2降低较PaCO2降低明显。 2.判断酸碱失衡 (1)代谢性酸中毒:血气分析:pH<7
DNA序列分析技术2
3)电泳电极缓冲液 1 倍TBE(pH 值8.0)预电泳 30 分钟至1 小时恒温方式 测序胶板上夹盖铝恒温板电泳温度 50℃左右电泳条件 恒功率 90~110W电泳时间 2.5 小时至5 小时4)干胶制备和压片电泳结束后取下胶板,用工具撬开玻璃板,使胶留在其中一块板上。将裁剪好的新华3 号滤纸在胶
DNA自动序列测定试验
[实验原理]DNA 测序(DNA sequencing)是对DNA 分子的一级结构的分析。其基本原理是DNA 的复制反应体系中需要存在DNA 聚合酶、DNA 模板、寡核苷酸引物和dNTP,引物和模板退火形成双链后,DNA 聚合酶在引物的引导下在模板链上沿3’→5’的方向移动,dNTP 按照碱
ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-2
EGFR实验抗EGFR抗体在培养基中梯度稀释,并添加20ul到384孔板中(Costar#3712)。对于Mirrorball系统,暂停用CFSE标记A431细胞含有1 ×105个细胞/ mL和6nM抗鼠IgG AlexaFluor647二抗。对于ABI的8200平台,准备A431细胞的悬浮液包含4
DELLAICE1ABI5转录复合物-调控植物ABA激素信号转导
种子萌发是开花植物生活史中的一个关键阶段,受到植物体内多种信号物质和外界环境因子的精密调控。植物种子只有在适宜的环境条件下萌发,才有可能发育成正常的植株。各种不利环境因子可诱导植物合成脱落酸激素(Abscisic acid,ABA),从而抑制种子萌发和萌发后生长发育。前人研究表明,ABI5转录因
ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-1
ABI 8200 FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式,给您带来不用于ELISA和流式的抗体筛选新体验以抗体技术为基础的免疫检测应用和相关的疾病治疗领域如癌症,自身免疫系统疾病等一直推动着抗体筛选的研究。单克隆抗体由特定的细胞系分泌到上清液中,而对上清液中特异性抗体的筛选则成为了药物初
样芯分析技术:高光谱成像研究波兰Żabińskie湖万年沉积物
2008到2010年,我国处于富营养的湖泊数量已占多数,占调查总数的78.7%,其中,处于轻度富营养、中度富营养和重度富营养湖泊数量分别占调查总数的50.7%、21.3%和6.7%;处于中营养的湖泊数量占调查总数的14.6%,且不断向富营养化湖泊转变;处于贫营养状态的湖泊数量只占调查总数的 6.7%
ABI-8200-FMAT的理想替代技术:“混合即读一步法检测”模式-3
图3 Mirrorball允许不依赖荧光抗体的结合量来测量CFSE标记的细胞。而在ABI 8200平台上,细胞必须有荧光抗体的结合才能被检测的到不仅Mirrorball提供了和ABI 8200一样的高灵敏度,而且与ABI 8200只能扫描1 mm2的区域相比,它能够扫描整个孔内的细胞并且不受细胞分布
上海高研院煤制乙炔研究取得进展
乙炔(C2H2)和一氧化碳(CO)是制备各种化学品的重要平台化合物。电石(碳化钙,CaC2)法煤制乙炔工艺提供了将包括煤炭在内的各种固体碳(C)直接转化为乙炔和一氧化碳的方法,是乙炔化工的龙头工艺。然而,电石合成温度高(2000℃~2300℃)、废气废渣排放大,是典型的能源密集和高碳排放、高污染
上海高研院煤制乙炔研究取得进展
乙炔(C2H2)和一氧化碳(CO)是制备各种化学品的重要平台化合物。电石(碳化钙,CaC2)法煤制乙炔工艺提供了将包括煤炭在内的各种固体碳(C)直接转化为乙炔和一氧化碳的方法,是乙炔化工的龙头工艺。然而,电石合成温度高(2000℃~2300℃)、废气废渣排放大,是典型的能源密集和高碳排放、高污染
新工艺能从源头解决电石法煤制乙炔工艺存在的问题
乙炔(C2H2)和一氧化碳(CO)是制备各种化学品的重要平台化合物。电石(碳化钙,CaC2)法煤制乙炔工艺提供了将包括煤炭在内的各种固体碳(C)直接转化为乙炔和一氧化碳的方法,是乙炔化工的龙头工艺。然而,电石合成温度高(2000℃~2300℃)、废气废渣排放大,是典型的能源密集和高碳排放、高污染
北京基因组所资源建设取得阶段性进展
近日,中国科学院北京基因组研究所生命与健康大数据中心团队以Database Resources of the BIG Data Center in 2018为题的研究论文,在线发表Nucleic Acids Research上。这是继去年首次在该期刊发布我国生命组学数据资源建设成果The BIG
Streptomyces:Protocols/Conjugation
Intergeneric Conjugation and OverlayDescription Transfer of plasmid/cosmid DNA from a host strain, e.g. E.coli ET12567 [pUZ8002], to the recipient str
基因组DNA文库构建必备实验技巧2
技术支持资料:材料缓冲液和溶液- 碱裂解液I , 4°C50 mM 葡萄糖25 mM Tris-Cl (pH 8.0)10 mM EDTA (pH 8.0)配制碱裂解液I 约100ml,灭菌,保存在四度。- 碱裂解液II,新鲜配置,室温保存0.2 N NaOH (从10N的NaOH新鲜制备)1% (
胡杨基因组与其其耐盐机制被揭示
近日,由兰州大学、深圳华大基因研究院和中国科学院青岛生物能源与过程研究所等单位的科学家合作,发表了题为《胡杨基因组揭示其耐盐适应性机制》(Genomic insights into salt adaptation in a desert poplar)的文章,宣布完成了胡杨(Populus